山葵种子催芽茎尖灭菌初代培养方法技术

技术编号:8614654 阅读:452 留言:0更新日期:2013-04-24 14:07
本发明专利技术公布了山葵种子催芽茎尖灭菌初代培养方法,包括(A)催芽;(B)选材;(C)清洗:将步骤(B)整理好的芽用洗衣粉液清洗后,用纱布包裹后,利用自来水持续冲洗2小时,再用1%浓度的消洗灵溶液浸泡30分钟,最后用无菌吸潮纸基本吸干水分;(D)灭菌:将经步骤(C)制得的山葵芽茎尖利用70%体积浓度的酒精浸泡28~32秒,然后利用0.2%升汞进行消毒处理,最后用无菌水清洗5次;(E)初代培育。本发明专利技术通过山葵种子催芽,切取茎尖培养,获得了85%的无菌成苗率,并经过后续扩大试验的验证,这是山葵外植体初代培养的一个极大突破。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及农业领域中的幼苗培育方法,具体是指。
技术介绍
我国山葵产业发展中,墨入病(也称黑心病)是山葵种植最重要的病害,严重时可引起山葵种植的完全失败。已有的研究发现,墨入病是山葵的专有病害,对其他作物不产生危害,也不对人体健康造成不利影响。墨入病是由山葵莖点霉菌(Phoma wasabiae Yokogi)侵入山葵植株体内并主要经维管束传导侵染,严重影响山葵品质和产量,甚至造成山葵绝收。墨入病可以为害山葵的根茎、须根、叶片、叶柄。经日本、台湾、大陆多年的研究,至今未找到根治或有效防治山葵墨入病的药物。所以,对其防治是以预防为主要措施,其中,培育和种植不带墨入病菌的健壮种苗是重中之重。种苗培育已成为山葵大面积发展的一个主要制约因素。在传统生产上山葵多采用种子繁殖和分株繁殖。山葵是异花授粉植物,因受高山寒冷气候及多雨的影响,媒介昆虫密度低,种子稔实率低,采收后储藏管理及打破休眠处理等技术繁琐困难,一般农户掌握难度较大。同时,山葵种子播种后,发芽率通常只有30%左右,出苗极不整齐,难以大规模培育规格一致的健康壮苗,不能满足山葵大面积种植的需要。山葵种子中,约30%感染有内生性的墨入病病菌,其育成的种苗也带有致病菌并易造成植株间相互传染,严重影响山葵根茎质量。在实生健康种苗严重不足的情况下,不少生产者采用分株苗进行种植,这带来了更为严重的问题,往往造成墨入病极其严重,山葵根茎绝收,只能采收少量的叶柄叶片,基本没有经济效益。在地种植 一年半至两年的山葵植株体内,80%以上都感染了墨入病菌,只是肉眼不一定能辨认。利用成熟植株上的蘖生侧芽分株作为种苗,墨入病极其严重,种植失败是必然的结果。目前还没有针对性的去除墨入病的种植方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供,培育出壮实、无菌的山葵苗,推广山葵的实际栽培。本专利技术的目的通过下述技术方案实现 ,包括以下步骤 (A)催芽选择需要进行培养的山葵品种,将种子保持18°C 22°C,湿度为90%,促其发芽;(B)选材当山葵种子发芽长度为I 2cm时,切取茎尖,长度为O.3 O. 4cm ;(C)清洗将步骤(B)整理好的芽用洗衣粉液清洗后,用纱布包裹后,利用自来水持续冲洗2小时,再用1%浓度的消洗灵溶液浸泡30分钟,最后用无菌吸潮纸基本吸干水分;(D)灭菌将经步骤(C)制得的山葵芽茎尖利用70%体积浓度的酒精浸泡28 32秒,然后利用O. 2%升汞进行消毒处理,最后用无菌水清洗5次; (E)初代培育将灭菌后的茎尖利用培养基培育成无菌的山葵幼苗。本专利技术采用山葵的饱满、健康种子作为培育基础,在源头上大大降低了胚芽被污染的可能性,在室内的稳定培养环境下,山葵种子的发芽率极高,而且其发芽的时间、生长的长度较为均匀,便于选取统一的茎尖,为培育提供了良好的基础;在选取茎尖时,将选取的长度定位O. 3 O. 4cm,而传统的茎尖培育方法中通常采用的茎尖长度为O. 5 O. 8cm,在试验中,专利技术人做了对比试验,统计结果如下本文档来自技高网
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【技术保护点】
山葵种子催芽茎尖灭菌初代培养方法,其特征在于,包括以下步骤:(A)催芽:选择需要进行培养的山葵品种,将种子保持18℃~22℃,湿度为90%,促其发芽;(B)选材:当山葵种子发芽长度为1~2cm时,切取茎尖,长度为0.3~0.4cm;(C)清洗:将步骤(B)整理好的芽用洗衣粉液清洗后,用纱布包裹后,利用自来水持续冲洗2小时,再用1%浓度的消洗灵溶液浸泡30分钟,最后用无菌吸潮纸基本吸干水分;(D)灭菌:将经步骤(C)制得的山葵芽茎尖利用70%体积浓度的酒精浸泡28~32秒,然后利用0.2%升汞进行消毒处理,最后用无菌水清洗5次;(E)初代培育:将灭菌后的茎尖利用培养基培育成无菌的山葵幼苗。

【技术特征摘要】
1.山葵种子催芽茎尖灭菌初代培养方法,其特征在于,包括以下步骤 (A)催芽选择需要进行培养的山葵品种,将种子保持18°C 22°C,湿度为90%,促其发芽; (B)选材当山葵种子发芽长度为I 2cm时,切取茎尖,长度为O.3 O. 4cm ; (C)清洗将步骤(B)整理好的芽用洗衣粉液清洗后,用纱布包裹后,利用自来水持续冲洗2小时,再用1%浓度的消洗灵溶液浸泡30分钟,最后用无菌吸潮纸基本吸干水分; (D)灭菌将经步骤(C)制得的山葵芽茎尖利用70%体积浓度的酒精浸泡28 32秒,然后利用O. 2%...

【专利技术属性】
技术研发人员:方季虎
申请(专利权)人:四川蓝公府农业科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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