【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位的检测方法，检测用试剂盒以及该试剂盒的制备方法。
技术介绍
人绒毛膜促性腺激素(HCG)是由胎盘绒毛膜的合体滋养层产生的一种糖蛋白，由α和β 二个单位通过离子键和疏水键结合在一起。α亚单位是垂体前叶激素所共有,它与FSH、LH、TSH的α亚单位结构相似。β亚单位的结构与LH等的β亚单位不同，在免疫活性上可予区别。血中β亚单位大部分以全分子形式存在，游离态的β亚单位(F-13_HCG)占HCG的I 5%左右。血中游离态的β亚单位是在受孕后6 8天产生，50 80天达到高峰，以后平稳下降，直至孕18周左右稳定于一定浓度。唐氏综合征又称先天愚型，21-三体综合征，是最常见的染色体疾病和弱智的病因，新生儿中发病率约为1/700左右。根据染色体核型的不同，唐氏综合征分为单纯21三体型、嵌合型和易位型三种类型。唐氏综合征的发生起源于卵子或精子发生的减数分裂过程中染色体的不分离现象，通常是随机发生的，约95%的不分离现象来源于母亲，仅5%左右发生在精子发生期。其结果是21号染色体多了一条，多出的一条染色体因...
【技术保护点】
一种游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，包括如下试剂：第一试剂：含荧光素标记的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体、pH为7.0?9.0的缓冲溶液，所述的荧光素标记的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体的浓度为0.5~1μg/mL；第二试剂：含碱性磷酸酶标记的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体、pH为7.0?9.0的缓冲溶液，所述的碱性磷酸酶标记的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体的浓度为0.5~1μg/mL；磁分离试剂：含包被着荧光素抗体的磁微粒的悬浮液。
【技术特征摘要】
1.一种游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，包括如下试剂第一试剂含荧光素标记的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体、pH为7. 0-9. O的缓冲溶液，所述的荧光素标记的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体的浓度为O.5 I μ g/mL ；第二试剂含碱性磷酸酶标记的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体、pH为7.0-9. O的缓冲溶液，所述的碱性磷酸酶标记的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体的浓度为 O. 5 μ g/mL ；磁分离试剂含包被着荧光素抗体的磁微粒的悬浮液。2.根据权利要求1所述的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于所述的碱性磷酸酶标记的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体由碱性磷酸酶与游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体通过交联剂琥珀酰亚胺基-4-[Ν-马来酰亚胺甲基]环己烷-1-羧化物和2-亚氨基四氢噻吩连接构成。3.根据权利要求1所述的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于所述的包被着荧光素抗体的磁微粒中，荧光素抗体与磁微粒之间化学偶联。4.一种如权利要求1-3中任一项所述的试剂盒的制备方法，其包括分别制备所述的第一试剂、所述的第二试剂以及所述的磁分离试剂的步骤，其特征在于所述的第二试剂的制备方法如下(I)使游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体与交联剂2-亚氨基四氢噻吩在甘氨酸溶液中，室温静置反应，生成游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体与2-亚氨基四氢噻吩的连接物，于2-8°C下保存备用；(2 )使碱性磷酸酶溶液与交联剂琥珀酰亚胺基-4- [N-马来酰亚胺甲基]环己烷-1-羧化物溶液混合，室温静置反应，将反应液通过G-25凝胶柱除盐，将收集到的碱性磷酸酶与琥珀酰亚胺基-4_[N-马来酰亚胺甲基]环己烷-1-羧化物的连接物于2-8°C下保存备用；(3)将步骤(I)所得溶液与步骤(2)所得溶液按照游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体与2-亚氨基四氢噻吩的连接物与碱性磷酸酶与琥珀酰亚胺基-4-[Ν-马来酰亚胺甲基]环己烷-1-羧化物的连接物的摩尔比为1:广2混合，在2-8°C下反应，使生成所述的碱性磷酸酶标记的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗体，反应结束，将反应液通过Supperdex200凝胶纯化柱纯化，选择合适的pH缓冲液调整浓度和pH值即得所述的第二试剂。5.根据权利要求4所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：于大为，程晓蕾，
申请(专利权)人：苏州浩欧博生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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