【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，具体涉及一种结合了免疫磁微粒分离技术和化学发光免疫分析技术的甲状腺素(T4)的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法和检测方法。
技术介绍
甲状腺素即3，5，3’，5’一四碘甲状腺原氨酸(T4)，是一种分子量为777的甲状腺激素。T4在循环中有结合态和游离态两种形式，正常情况下两种形式之间保持着动态平衡。循环中T4有75%与甲状腺结合球蛋白(TBG)结合，15%与前白蛋白，10%与白蛋白结合。甲状腺激素的合成受许多因素的调节，最主要的是下丘脑、垂体、甲状腺轴。下丘脑分泌的促甲状腺素释放激素(TRH)可促进垂体分泌促甲状腺素(TSH)，TSH刺激甲状腺分泌甲状腺激素。相反，大量的甲状腺激素通过负反馈机制可减少TSH和TRH的分泌，使各种激素保持着动态平衡。甲状腺激素主要通过与核受体结合发挥生理作用，主要是调节能量代谢、增加产热作用和促进生长发育，具体包括①增强基础代谢；②加速蛋白质代谢；③加强脂肪代谢增加细胞氧代谢容量；⑤促进婴幼儿生长发育。测定血清T4含量是评价甲状腺生理功能的重要手段，一般情况下T4含量直接反映了甲状腺的功能状态，...
【技术保护点】
一种甲状腺素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，所述试剂盒包括：第一试剂：含荧光素标记的甲状腺素抗体的溶液；第二试剂：含碱性磷酸酶标记的甲状腺素抗原的溶液；磁分离剂：含包被着荧光素抗体的磁微粒的悬浮液。
【技术特征摘要】
1.一种甲状腺素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，所述试剂盒包括第一试剂含荧光素标记的甲状腺素抗体的溶液；第二试剂含碱性磷酸酶标记的甲状腺素抗原的溶液；磁分离剂含包被着荧光素抗体的磁微粒的悬浮液。2.根据权利要求1所述的甲状腺素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于 所述碱性磷酸酶标记的甲状腺素抗原由碱性磷酸酶与甲状腺素抗原通过交联剂辛二酸二琥珀酰亚胺酯连接构成。3.根据权利要求1或2所述的甲状腺素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于所述第一试剂中的荧光素标记的甲状腺素抗体的浓度为O. 5 1μ g/mL，所述第一试剂的PH为7-9 ;所述第二试剂中的碱性磷酸酶标记的甲状腺素抗原的浓度为O. 02、.1 μ g/ mL，所述第二试剂的pH为7-9。4.一种如权利要求3所述的甲状腺素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒的制备方法， 其包括分别制备所述含有荧光素标记的甲状腺抗体的溶液、所述含有碱性磷酸酶标记的甲状腺素抗原的溶液以及所述包被有荧光素抗体的磁微粒的悬浮液的步骤，其特征在于所述含有碱性磷酸酶标记的甲状腺素抗原的溶液的制备过程如下①使甲状腺素抗原与交联剂辛二酸二琥珀酰亚胺酯在二甲基亚砜溶剂中，在室温下反应，使生成甲状腺素抗原与辛二酸二琥珀酰亚胺酯的连接物，于2 8°C下保存备用，其中 所述的甲状腺素抗原、所述碱性磷酸酶的纯度均大于等于95wt%，且所述碱性磷酸酶的比活性超过1000u/mg ；②将含有碱性磷酸酶的缓冲液与步骤①所得溶液按照碱性磷酸酶与甲状腺素抗原与辛二酸二琥珀酰亚胺酯的连接物的摩尔比为1:1.广1. 3的比例混合，在室温下反应，使生成所述碱性磷酸酶标记的甲状腺素抗原，反应结束，将反应液通过G-25凝胶柱除盐， 选择具有适当PH值的缓冲液调整浓度和pH值即得，其中碱性磷酸酶的缓冲液的浓度为O.5 L 5mg/ml。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于步骤①中，取甲状腺素抗原，加入二甲基亚砜溶解该抗原至浓度为2(T50mg/mL，加入交联剂辛二酸二琥珀酰亚胺酯，室温反应 2 3小时，用二甲基亚砜将反应液1:1O稀释，于疒8 ...
【专利技术属性】
技术研发人员：于大为，程晓蕾，
申请(专利权)人：苏州浩欧博生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。