绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片及其使用方法技术

本发明专利技术公开了一种绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片及其使用方法，包括微流控盘片，所述的微流控盘片上安装有微流检测单元，所述的微流检测单元包括全血注入槽、全血分离信道、血球储存槽、血浆传送流道、混合/侦测槽、人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液注入槽、清洗液注入槽、内含磁铁的外部磁铁区域、废液槽、碱性磷酸酶标记的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体溶液注入槽、发光底物液注入槽。本发明专利技术采用简单的方法即可实现微流控盘片内部微流体的智慧控制，同时能够使反应液体得以充分混合，保证反应体系高效进行，快速实现样品中hCG浓度的定量检测；具有操作简单，检测灵敏度高，结果准确可靠，重复性好，低成本的特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片及其使用方法，属于医学免疫体外诊断领域，能够在很短时间内实现对生物样品中人绒毛膜促性腺激素β亚单位的定量检测，具有操作简单，灵敏度高，低成本的特点。
技术介绍
人绒毛膜促性腺素(Human Chorionic Gonadotropin，hCG)是由胎盘合体滋养层细胞合成和分泌的糖蛋白激素，由α、β两个不同亚单位组成，α亚单位与垂体分泌的FSH（促卵泡激素）、LH（促黄体生成素）和TSH（促甲状腺激素）等的α亚单位结构相似，相互间能发生交叉反应。β亚单位与LH的β亚单位不同，特异性更强，成为检测中的首选靶点，总β-hCG可以在很大程度上替代总hCG的指示作用。hCG具有FSH和LH的功能，可以维持月经黄体的寿命，使月经黄体增大成为妊娠黄体；可以促进雄激素转化为雌激素，同时刺激孕酮形成；可吸附于滋养细胞表面，抑制植物凝集素对淋巴细胞的刺激作用，以免胚胎滋养层细胞被母体淋巴细胞攻击；具有类LH功能，在胎儿垂体分泌LH以前，刺激胎儿睾丸分泌睾酮促进男性性分化；还可促进性腺发育，对男性能刺激睾丸中间质细胞的活力，增加雄性激素（睾酮）的分泌；能与母体甲状腺细胞TSH受体结合，刺激甲状腺活性。hCG 的检查对早期妊娠诊断有重要意义，对异常妊娠诊断、滋养层肿瘤患者（卵巢和卵巢外绒毛癌）的诊断和跟踪、非滋养层肿瘤患者（卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、胃肠癌和睾丸癌）的诊断和跟踪以及21三体综合征的筛查等有一定价值。成熟女性因受精的卵子移动到子宫腔内着床后，形成胚胎，在发育成长为胎儿过程中，胎盘合体滋养层细胞产生大量的hCG，可通过孕妇血液循环而排泄到尿中。当妊娠1～2.5周时，血清和尿中的hCG水平即可迅速升高，第8周孕期达到高峰，至孕期第4个月始降至中等水平，并一直维持到妊娠末期。血hCG检查是目前最早最准确测试是否怀孕的检查方式，一般是在性生活后8-10天可以通过抽血检查hCG来明确是否有怀孕。目前，检测 β-hCG 的方法主要有酶联免疫分析法 (ELISA) 和化学发光免疫分析法 (CLIA)。 酶联免疫分析法由于方法间差异较大，导致结果不均一，且线性范围较窄，操作复杂，不适于做单人份或少量标本的检测。化学发光技术兴起于上个世纪80年代，是继酶联免疫技术和放免技术之后发展起来的新兴技术，具有高灵敏度、高特异性，方法简便、快速，标记结合物稳定，无放射性同位素损伤和污染等特点，目前得到了广泛的应用。磁微粒免疫检测技术是利用高分子材料合成一定粒度大小的磁性固相微粒作载体，以物理吸附、化学偶联等方法包被上具有特异性亲和力的的抗体或抗原等各种免疫活性物质，具有分离速度快、效率高、可重复性好、操作简单、不影响被分离细胞或其他生物材料的生物学性状和功能等特点，在外加磁场作用下可定向运动，使某些特殊成分得以分离、浓集或纯化。微流控盘片作为一种新型的分析检测平台，具有高通量、集成化、便携式、易操作、低成本等优点，已经在众多领域中得到了广泛的应用，尤其是在免疫分析领域已崭露头角。免疫磁珠的生物微流控盘片是将磁颗粒技术，免疫分析集成到微流控芯片上的一种分析检测方法，目前这种综合性的检测方法的主要难点表现为：1) 液体在芯片内部微流动的智能控制，目前常采用的方法是在芯片内部设置多个微泵和微阀，使得微流控体系变得更加复杂化；2) 反应体系的混合不充分，导致反应不充分；3) 集成化程度不高，导致非特异性背景高。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供了一种绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片及其使用方法；本专利技术采用简单的方法即可实现微流控盘片内部微流体的智慧控制，同时能够使反应液体得以充分混合，保证反应体系高效进行，可快速实现样品中 hCG 浓度的定量检测；具有操作简单，检测灵敏度高，结果准确可靠，重复性好，低成本的特点。为了达到上述目的，本专利技术的技术方案是：一种绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片，包括微流控盘片，所述的微流控盘片上安装有微流检测单元，所述的微流检测单元包括全血注入槽，所述的全血注入槽通过全血分离信道与血球储存槽相连，所述血球储存槽与血浆传送流道连通；所述的血浆传送流道与混合/侦测槽顶部相连；所述的混合/侦测槽顶部通过管路与人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液注入槽连通；所述的混合/侦测槽顶部还通过管路与清洗液注入槽连通；所述的混合/侦测槽一侧安装有内含磁铁的外部磁铁区域；所述的混合/侦测槽底部通过管路与废液槽连通，且所述的混合/侦测槽底部与废液槽之间的管路上安装有阀门；所述的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液注入槽顶部通过管路与碱性磷酸酶标记的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体溶液注入槽的底部连通；所述的清洗液注入槽顶部通过管路与发光底物液注入槽的底部连通。所述的微流控盘片上安装6个以上且为6的倍数的微流检测单元。所述的微流控盘片上优选安装12个微流检测单元。一种绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片的使用方法，包括如下步骤：1）将微流控盘片放入检测仪器中，开启自动加样装置，将全血、人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液、碱性磷酸酶标记的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体溶液分别注入全血注入槽 、人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液注入槽、碱性磷酸酶标记的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体溶液注入槽中；2）以第一转速、第一加速度 操控微流控盘片旋转，全血经全血分离信道分离血浆及血球，同时将人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液及碱性磷酸酶标记的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体溶液传送至混合/侦测槽；人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液由于外部磁铁区域中的磁铁作用保留于混合/侦测槽中；3）以第二转速、第二加速度 操控微流控盘片旋转，将血浆经由血浆传送流道传送至混合/侦测槽，血球则被保留于血球储存槽中；4）以第三转速、第三加速度 操控微流控盘片旋转，并由外部磁铁区域中的磁铁操控，操纵人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒于混合/侦测槽内移动，进而使血浆、碱性磷酸酶标记的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体溶液、人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液之间达到良好的混合、培育效果；5）将清洗液注入至清洗液注入槽内，以第四转速、第四加速度操控微流控盘片（13）旋转，可将清洗液传送至混合/侦测槽中，清洗液用来置换混合/侦测槽内的液体，此液体会被传送至废液槽内，人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒由于外部磁铁区域中的磁铁的吸引而保留于混合/侦测槽内；6）将发光底物液注入至发光底物液注入槽内，以第第五转速、第五加速度 操控微流控盘片旋转，可将发光底物传送至混合/侦测槽，发光底物置换混合/侦测槽内的液体，此液体也会被传送至废液槽内，人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒由于外部磁铁区域中的磁铁的吸引而保留于混合/侦测槽内；最终，已反应的液体会在混合/侦测槽内进行检测，根据相对发光强度 (RLU) 与人绒毛膜促性腺激素β亚单位抗原浓度间的比例关系，检测系统进行自动换算，能快速报告测试结果，从而实现人绒毛膜促性腺激素β亚单位本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片，其特征在于：包括微流控盘片（13），所述的微流控盘片（13）上安装有微流检测单元，所述的微流检测单元包括全血注入槽(1)，所述的全血注入槽(1)通过全血分离信道(2)与血球储存槽(3)相连，所述血球储存槽(3)与血浆传送流道(4)连通；所述的血浆传送流道(4)与混合/侦测槽(7)顶部相连；所述的混合/侦测槽(7)顶部通过管路与人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液注入槽(9)连通；所述的混合/侦测槽(7)顶部还通过管路与清洗液注入槽(10)连通；所述的混合/侦测槽 (7)一侧安装有内含磁铁的外部磁铁区域(8)；所述的混合/侦测槽(7)底部通过管路与废液槽(6)连通，且所述的混合/侦测槽(7)底部与废液槽(6)之间的管路上安装有阀门（5）；所述的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液注入槽(9)顶部通过管路与碱性磷酸酶标记的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体溶液注入槽(11)的底部连通；所述的清洗液注入槽 (10)顶部通过管路与发光底物液注入槽(12)的底部连通。

【技术特征摘要】
1.一种绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片，其特征在于：包括微流控盘片（13），所述的微流控盘片（13）上安装有微流检测单元，所述的微流检测单元包括全血注入槽(1)，所述的全血注入槽(1)通过全血分离信道(2)与血球储存槽(3)相连，所述血球储存槽(3)与血浆传送流道(4)连通；所述的血浆传送流道(4)与混合/侦测槽(7)顶部相连；所述的混合/侦测槽(7)顶部通过管路与人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液注入槽(9)连通；所述的混合/侦测槽(7)顶部还通过管路与清洗液注入槽(10)连通；所述的混合/侦测槽 (7)一侧安装有内含磁铁的外部磁铁区域(8)；所述的混合/侦测槽(7)底部通过管路与废液槽(6)连通，且所述的混合/侦测槽(7)底部与废液槽(6)之间的管路上安装有阀门（5）；所述的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液注入槽(9)顶部通过管路与碱性磷酸酶标记的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体溶液注入槽(11)的底部连通；所述的清洗液注入槽 (10)顶部通过管路与发光底物液注入槽(12)的底部连通。2.如权利要求1所述的一种绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片，其特征在于：所述的微流控盘片（13）上安装6个以上且为6的倍数的微流检测单元。3.如权利要求2所述的一种绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片，其特征在于：所述的微流控盘片（13）上安装12个微流检测单元。4.一种如权利要求1所述的绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片的使用方法，其特征在于，包括如下步骤：1）将微流控盘片（13）放入检测仪器中，开启自动加样装置，将全血、人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液、碱性磷酸酶标记的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体溶液分别注入全血注入槽(1)、人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的磁微粒溶液注入槽(9)、碱性磷酸酶标记的人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体溶液注入槽 (11)中；2）以第一加速度操控微流控盘片（13）旋转，全血经全血分离信道（2）分离血浆及血球，同时将人绒毛膜促性腺激素β亚单位单克隆抗体包被的...

【专利技术属性】
技术研发人员：林佳慧，左阳，杨意枫，倪燕婕，连海燕，余波，
申请(专利权)人：绍兴普施康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33