【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物技术及免疫学领域，特别涉及一种人类AECS体外免疫抑制作用分子机制的检测方法。
技术介绍
协同共刺激分子在T淋巴细胞的活化增殖中起到很重要的作用。“协同刺激信号”是1970年由Bretseher和Cohn在T细胞活性双信号模型的基础上提出的，即除了通过APC递呈MHC处理过的抗原给抗原特异性T细胞提供第一个信号外，还需协同刺激分子作为辅助信号的协同作用，达到生理活化阈值后才能使T细胞产生正常的免疫调节机制。如果缺乏协同共刺激分子的第二信号，将会导致调节性T细胞的无反应性或特异性免疫耐受。B7家族是唯一能从APC单向传送信号至T细胞的协同共刺激分子，PD-Ll是B7家族一个重要的负性协同刺激分子，抑制T细胞的活化增殖，在机体免疫应答中发挥了重要的调节作用。以往的实验已经验证了 AECS低表达HLA-DR，并对活化的T细胞具有抑制作用，但AECS是否表达与T细胞活化或抑制相关的协同刺激分子以及其中的机理，未见相关的文献报道。以负性协同刺激分子ro-Ll为切入点，通过流式细胞仪检测、免疫荧光染色、3H-TdR掺入法、ELISA等实验分析TO-Ll在A...
【技术保护点】
一种人类AECS体外免疫抑制作用分子机制的检测方法，其包括下述步骤：?S1：羊膜上皮细胞分离培养与鉴定；?S2：免疫荧光染色法检测羊膜上皮细胞中PD?L1表达；?S3：PD?L1mAb阻断AECS对T细胞增殖的抑制作用检测；?S4：AECS与T细胞体外共培养及PD?L1阻断实验；?S5：T细胞活性早期标志CD69的检测；?S6：AECS对活化T细胞周期影响的检测；?S7：AECS对活化T细胞细胞因子分泌影响的检测。
【技术特征摘要】
1.一种人类AECS体外免疫抑制作用分子机制的检测方法，其包括下述步骤 S1:羊膜上皮细胞分离培养与鉴定； 52:免疫荧光染色法检测羊膜上皮细胞中ro-Ll表达； 53=PD-LlmAb阻断AECS对T细胞增殖的抑制作用检测； 54=AECS与T细胞体外共培养及I3D-Ll阻断实验； 55T细胞活性早期标志⑶69的检测； 56=AECS对活化T细胞周期影响的检测； 57=AECS对活化T细胞细胞因子分泌影响的检测。2.如权利要求1所述的一种人类AECS体外免疫抑制作用分子机制的检测方法，其中所述步骤IAECS的分离及培养过程如下选用剖宫产后的人...
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