【技术实现步骤摘要】
本专利技术公开一种乳糖酶基因葡萄糖解阻遏敲除载体PMD19/HPT，属于生物
技术介绍
β-半乳糖苷酶(EC 3.2.1. 23)，通常称为乳糖酶，可催化牛奶和奶制品中乳糖水解产生葡萄糖及半乳糖，并且具有半乳糖苷转移作用。乳糖酶在食品、医药、能源工业和畜牧业等领域的广泛应用，因而受到越来越多的关注。通过牛奶和奶制品中乳糖的水解增加这些食品的营养价值，解决乳糖不耐症食用牛奶和奶制品出现的问题，同时产乳糖酶的微生物可以用于处理乳清废水，减少环境污染。许多细菌、丝状真菌和酵母菌可以产生乳糖酶，其中克鲁氏酵母菌如马克斯克鲁氏酵母(Jluyveromyces marxianus),乳酸克鲁氏酵母{Kluyveromyces lac ti51)和极地耐冷酵母菌Guehomyces pullulans 17_I菌株产生的乳糖酶受到广泛重视。尤其马克斯克鲁氏酵母具有很强的同化乳糖和菊粉的能力、生长速率极快、代时短、生长时耐高温、具有很强的分泌胞外产物的能力和是被美国食品药物局确认为最安全的微生物，而在许多方面得到了广泛应用。但是所有产乳糖酶的微生物乳糖酶基因表达和合成...
【技术保护点】
一种乳糖酶基因葡萄糖解阻遏敲除载体pMD19/HPT，碱基序列见如SEQ?No.1所示。
【技术特征摘要】
1.一种乳糖酶基因葡萄糖解阻遏敲除载体PMD19/HPT，碱基序列见如SEQ No.1所示。2.权利要求1所述的乳糖酶基因葡萄糖解阻遏敲除载体PMD19/HPT制备方法，包括以下步骤 将扩增的PCR产物与载体pMD19-T Simple的连接；连接产物pMD19/HPT转化E. ColiDm α感受态细胞； 质粒的提取、酶切及回收用于转化酵母的线性DNA片段 利用质粒提取试剂盒提取质粒，质粒提取过程按照试剂盒说明进行；用％01酶切PMD19/HPT 质粒；37°C酶切 4 h 后，加入 2. O μ ΙΟX loading buffer 终止反应，并用 O. 8%(w/v)的琼脂糖凝胶电泳检测，回收目的片段； 转化与筛选 (1)取80.O μ L的尤marXianus感受态细胞,加入浓缩并除...
【专利技术属性】
技术研发人员：池振明，池哲，周海翔，徐金利，李慧娟，
申请(专利权)人：吉林巨润生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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