谷氨酸产生菌的扩大培养方法技术

技术编号:8589981 阅读:218 留言:0更新日期:2013-04-18 03:18
本发明专利技术公开了一种谷氨酸产生菌的扩大培养方法,属于生物发酵技术领域。其特征是一级种子罐为多个二级种子罐提供菌种的扩大培养模式。与现有扩大培养模式相比,一级种子罐培养所得菌种数量多,可以缓解菌种室培养摇瓶种子的繁琐工作压力,同时在移种时,减少了人员手动操作,降低了杂菌污染。在生物发酵技术领域有着巨大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物发酵
具体是涉及一级种子罐为多个二级种子罐提供菌种的扩大培养模式。
技术介绍
目前,随着发酵工业的发展,发酵罐体积逐渐增大,因而发酵所需的菌种量就增多。只有足够数量活力旺盛的菌种接入发酵罐中,才有利于缩短发酵周期、提高发酵罐利用率,并且也有利于减少染菌的机会。因此,种子扩大培养的任务,不但要得到纯而壮的种子,还要获得活力旺盛、接种数量足够的种子。谷氨酸发酵企业中,菌种室制备的摇瓶种子远不能满足生产所需要的足够数量的种子,因此摇瓶种子需要在小型发酵罐中继续扩大培养。目前菌种的扩大培养方式是采用二级或三级扩大培养方式,均是单一的“一对一”扩大模式,即一个玻瓶种子对应一个种子罐。此扩大培养模式存在着以下几个弊端1、由于菌种室操作条件的限制,摇瓶的菌种量有限,进而接入到种子罐的种子数量就有限;2、摇瓶菌种接入种子罐时,需要人员在火焰下手动操作完成,此工序因与外界环境接触易造成杂菌污染;3、菌种室培养种子工作繁琐,制作摇瓶种子,人员手动操作较多,染菌机会就多;4、摇瓶菌种不适于做无菌检查,增加了菌种含有杂菌风险。
技术实现思路
本专利技术的技术任务是针对上述现有技术的不足,提供一种易于实现的一级种子罐为多个二级种子罐提供菌种的扩大培养模式。以便为二级种子罐提供足够数量的种子。本专利技术提供的技 术方案是,,米用一个一级种子罐为多个二级种子罐提供菌种,进行扩大培养。前面所述的扩大培养方法,优选的技术方案是,包括下述步骤 a、将菌种室制备的摇瓶种子接入到种子罐中培养,得到种子液,取样做无菌检测,其结果不含杂菌时,用冷却水使其降温,备用; b、将a中制备的种子液分别移入到二级种子罐中,接种量为40 50L,经培养10 12h,得到OD=O. 4 O. 6的二级种子液,取样做无菌检测; C、各个不含杂菌的二级种子液接入到其相对应的50m3三级种子罐中培养12 16h,得到OD=O. 4 O. 6的三级种子液,取样做无菌检测; d、步骤c中得到不含杂菌的三级种子液分别接入相对应的500m3发酵罐中进行发酵生产。前面所述的扩大培养方法,优选的技术方案是,步骤a摇瓶种子的体积为5L,种子罐的体积为lm3。前面所述的扩大培养方法,优选的技术方案是,步骤a在种子罐中培养的时间为20 28h (优选22 26h,更加优选24h)。前面所述的扩大培养方法,优选的技术方案是,步骤a种子液的OD=O. 4 O. 6。前面所述的扩大培养方法,优选的技术方案是,步骤a将使种子液降温至2 10°C(优选8°C),备用。 前面所述的扩大培养方法,优选的技术方案是,步骤b 二级种子罐体积为5m3,数量为6 20 (优选8-15个)。前面所述的扩大培养方法,优选的技术方案是,步骤c三级种子罐的体积为50m3。前面所述的扩大培养方法,优选的技术方案是,步骤d发酵罐的体积为500m3。本专利技术的种子扩大培养新模式与现有技术相比,所产生的有益效果是本专利技术不改变生产工艺流程,也不改变发酵配方,只改变菌种的扩大培养模式,在生产上实施后,同样可保证发酵效果。该模式的主要优点是减少染菌机会、提高种子数量、降低工人劳动量、降低设备投资。与现有技术相比,本专利技术的技术优势还体现在 1、解决了菌种室制备种子数量不足,减少了菌种室人员手动操作所致的染菌机会,为种子罐提供足够数量的菌种; 2、一级种子罐移种至二级种子罐时,可以采用密封管道转移,不与外界环境接触,降低染菌机会; 3、在接种之前增加 无菌检测,降低了菌种污染杂菌所带来的风险; 4、菌种室仅制备一次摇瓶种子,可以实现15 20批次发酵,降低了工人劳动量。本专利技术公与现有扩大培养模式相比,一级种子罐培养所得菌种数量多,可以缓解菌种室培养摇瓶种子的繁琐工作压力,同时在移种时,减少了人员手动操作,降低了杂菌污染。在生物发酵
有着巨大的应用价值。具体实施例方式下面以具体实施例对本专利技术的菌种扩大培养新模式作详细地说明。实施例1 谷氨酸种子的扩大培养过程中,采用一级种子罐为多个二级种子罐提供菌种的扩大培养模式。以I个Im3 —级种子罐,6个5m3 二级种子罐、6个50m3三级种子罐、6个500 m3发酵罐为例。该模式包括以下工序 a、将菌种室制备的5L摇瓶种子接入到Im3种子罐中培养20h,得到OD=O. 4的种子液。取样做无菌检测,其结果不含杂菌时,用冷却水使其降温至2°C左右,备用。b、将a中制备的种子液分别移入到6个同样的5m3 二级种子罐中,接种量为40L,经培养10h,得到OD=O. 4的二级种子液。取样做无菌检测。C、各个不含杂菌的二级种子液接入到其相对应的50m3三级种子罐中培养12h,得到OD=O. 4的三级种子液。取样做无菌检测。d、步骤c中得到不含杂菌的三级种子液分别接入相对应的500m3发酵罐中进行发酵生产。发酵结果谷氨酸含量18. 7%,转化率74. 6%。本专利技术菌种室仅制备一个5L摇瓶种子,采用本专利技术扩培模式可以生产15 20批次发酵,降低了工人劳动量,减少了菌种室因工人手工操作制备种子所造成的染菌机会。实施例2 谷氨酸种子的扩大培养过程中,采用一级种子罐为多个二级种子罐提供菌种的扩大培养模式。以I个Im3 —级种子罐,20个5m3 二级种子罐、20个50m3三级种子罐、20个500 m3发酵罐为例。该模式包括以下工序 a、将菌种室制备的5L摇瓶种子接入到Im3种子罐中培养28h,得到OD=O. 6的种子液。取样做无菌检测,其结果不含杂菌时,用冷却水使其降温至10°C左右,备用。b、将a中制备的种子液分别移入到20个同样的5m3 二级种子罐中,接种量为50L,经培养12h,得到OD=O. 6的二级种子液。取样做无菌检测。C、各个不含杂菌的二级种子液接入到其相对应的50m3三级种子罐中培养16h,得到OD=O. 6的二级种子液。取样做无菌检测。d、步骤c中得到不含杂菌的三级种子液分别接入相对应的500m3发酵罐中进行发酵生产。发酵结果谷氨酸含量18. 1%,转化率73. 8%。本专利技术提高了一级种子数量,缩短了二级种子制备周期,提高了二级种子罐的利用率。实施例3谷氨 酸产生菌的扩大培养方法 谷氨酸种子的扩大培养过程中,采用一级种子罐为多个二级种子罐提供菌种的扩大培养模式。以I个Im3 —级种子罐,8个5m3 二级种子罐、8个50m3三级种子罐、8个500 m3发酵罐为例。该模式包括以下工序 a、将菌种室制备的5L摇瓶种子接入到Im3种子罐中培养22h,得到OD=O. 5的种子液。取样做无菌检测,其结果不含杂菌时,用冷却水使其降温至TC左右,备用。b、将a中制备的种子液分别移入到8个同样的5m3 二级种子罐中,接种量为50L,经培养12h,得到OD=O. 4 O. 6的二级种子液。取样做无菌检测。C、各个不含杂菌的二级种子液接入到其相对应的50m3三级种子罐中培养12 16h,得到OD=O. 6的二级种子液。取样做无菌检测。d、步骤c中得到不含杂菌的三级种子液分别接入相对应的500m3发酵罐中进行发酵生产。发酵结果谷氨酸含量18. 2%,转化率74. 1%。本工艺一级种子罐移种至二级种子罐时,采用密封管道转移,不与外界环境接触,降低了染菌机会。实施例本文档来自技高网
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【技术保护点】
谷氨酸产生菌的扩大培养方法,其特征是,采用一个一级种子罐为多个二级种子罐提供菌种,进行扩大培养。

【技术特征摘要】
1.谷氨酸产生菌的扩大培养方法,其特征是,采用ー个ー级种子罐为多个ニ级种子罐提供菌种,进行扩大培养。2.根据权利要求1所述的扩大培养方法,其特征是,包括下述步骤 a、将菌种室制备的摇瓶种子接入到种子罐中培养,得到种子液,取样做无菌检测,其结果不含杂菌时,用冷却水使其降温,备用; b、将a中制备的种子液分别移入到ニ级种子罐中,接种量为40 50L,经培养10 12h,得到OD=O. 4 0. 6的ニ级种子液,取样做无菌检测; C、各个不含杂菌的ニ级种子液接入到其相对应的50m3三级种子罐中培养12 16h,得到OD=O. 4 0. 6的三级种子液,取样做无菌检测; d、步骤c中得到不含杂菌的三级种子液分别接入相对应的500m3发酵罐中进行发酵生产。3.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨玉岭满德恩张恒志程美科郭脉海李国良殷慧
申请(专利权)人:菱花集团有限公司
类型:发明
国别省市:

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