利用分子印迹—基质固相分散技术分离喜树碱的方法，本发明专利技术涉及一种分离喜树碱的方法。本发明专利技术是要解决现有喜树碱分离提取技术存在选择性低、步骤复杂、有机溶剂消耗量大，基质固相分散技术的选择性低，包埋法制备分子印迹聚合物需要反复研磨，费时费力的问题。方法：一、得到混合粉末；二、将混合粉末移入注射器；三、淋洗；四、洗脱。本发明专利技术样品制备过程简单，减少了实验时间和溶剂使用量；应用分子印迹聚合物作为分离介质，提高了喜树碱提取分离的选择性效果；在制备分子印迹聚合物时采用表面印迹技术，把结合位点局限在具有良好可接近性的二氧化硅表面上，有利于模板分子的洗脱和再结合，条件易于控制，生产成本低。本发明专利技术用于分离喜树碱。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种分离喜树碱的方法。
技术介绍
喜树喊(Camptothecin, CPT),浅黄色针状结晶，分子式C20H16N2O4,分子量 348.3。它是广泛分布在我国南方的珙桐科旱莲属落叶乔木喜树(Camptotheca acuminata Decsne )中的一种生物碱；1966年Wal I等人从喜树的叶和树皮中分离出喜树碱并确证了结构，它有很强的抗肿瘤活性，尤其对消化道肿瘤、白血病、绒毛膜上皮癌、膀胱癌有效。喜树碱一般从喜树的根、皮、茎和种子中提取得到。但是由于喜树中除喜树碱以外还含有其它多种组分，导致喜树碱提取分离困难。传统提取分离技术存在着步骤复杂、能耗高、选择性低、 有机溶剂消耗量大等缺点。建立一种新型有效的喜树碱分离提取方法尤为重要。基质固相分散技术(MatrixSolid-phas e Dispersion, MSPD)是美国 Louisiana 州立大学的Barker教授在1989年提出并给予理论解释的一种快速样品预处理技术。其优点是浓缩了传统的样品预处理中的样品匀化、提取、净化等过程，避免了样品的损失，提高了净化效率。然而，常用的基质固相分散技术的分散剂为硅胶、二氧化硅、C18、活性炭等，缺乏选择性。如何提高基质固相分散技术的选择性是目前迫切需要解决的问题分子印迹技术也称模板印迹技术，是指制备对某一特定的目标分子具有特异选择性的聚合物的过程。它可以被形象的描绘为制造识别“分子钥匙”的“人工锁”技术。这种技术制备的聚合物被称为分子印迹聚合物(Molecularly Imprinted Polymer, MIP)。与传统常用的样品前处理方法相比，分子印迹技术可实现目标组分的有效分离，并且选择性高， 适用范围广。然而传统的包埋法制备分子印迹聚合物需要反复研磨，费时费力，产率低，并且有部分印迹位点被包埋在颗粒内，不能发挥作用，降低了印迹位点的利用率。综上所述现有喜树碱分离提取技术存在选择性低、步骤复杂、有机溶剂消耗量大， 基质固相分散技术的选择性低，包埋法制备分子印迹聚合物需要反复研磨，费时费力的问题。
技术实现思路
本专利技术是要解决现有喜树碱分离提取技术存在选择性低、步骤复杂、有机溶剂消耗量大，基质固相分散技术的选择性低，包埋法制备分子印迹聚合物需要反复研磨，费时费力的问题，而提供的利用分子印迹-基质固相分散技术分离喜树碱的方法。利用分子印迹-基质固相分散技术分离喜树碱的方法，具体是按照以下步骤完成的一、将喜树原料粉碎至细度为40目飞O目，得到喜树粉末，按照分子印迹聚合物与喜树粉末的质量比为I 4，称取喜树粉末和分子印迹聚合物，将喜树粉末和分子印迹聚合物混合，研磨均化5mirTlOmin,得到混合粉末；二、将步骤一得到的混合粉末移入装有玻璃棉垫底的注射器中，再在混合粉末上方放置玻璃棉，压实；三、将淋洗剂倒入压实的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速淋洗，其中注射器中混合粉末的质量与淋洗剂的体积比为Ig 5mL^25mL ；四、将洗脱剂倒入淋洗后的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速洗脱，其中注射器中混合粉末的质量与洗脱剂的体积比为Ig :5mL 25mL，完成利用分子印迹一基质固相分散技术分离喜树碱的方法。其中，步骤三中淋洗的目的是淋洗掉喜树原料中除喜树碱以外的其它组分，步骤四中洗脱目标物为喜树碱。本专利技术的有益效果是本专利技术采用基质固相分散技术作为分离模式，提取分离喜树碱，使得提取和净化在一个体系中完成，使样品制备过程简单，减少了实验时间和溶剂使用量；应用分子印迹聚合物作为分离介质，提高了喜树碱提取分离的选择性效果，该聚合物对喜树碱具有两种结合方式，总的吸附量(Qmaxl+Qmax2)可达IOlOmg g-1;在制备分子印迹聚合物时采用的是表面印迹技术，把结合位点局限在具有良好可接近性的二氧化硅表面上， 从而有利于模板分子的洗脱和再结合，并且制备过程简单，条件易于控制，生产成本低。本专利技术用于分离喜树碱。附图说明图1为实施例一制备的分子印迹聚合物的扫描电子显微镜图2为实施例一制备的分子印迹聚合物的红外光谱图3为实施例一制备的分子印迹聚合物对喜树碱的吸附等温线图4为实施例一制备的分子印迹聚合物吸附喜树碱的Scatchard分析图； 图5为实施例一制备的分子印迹聚合物对模板分子喜树碱的动力学曲线图6为实施例一制备的分子印迹聚合物吸附喜树碱的准一级动力学拟合图7为实施例一制备的分子印迹聚合物吸附喜树碱的准二级动力学拟合图。具体实施方式本专利技术技术方案不局限于以下所列举的具体实施方式，还包括各具体实施方式之间的任意组合。具体实施方式一本实施方式利用分子印迹-基质固相分散技术分离喜树碱的方法，其特征在于利用分子印迹一基质固相分散技术分离喜树碱的方法，具体是按照以下步骤完成的一、将喜树原料粉碎至细度为40目飞O目，得到喜树粉末，按照分子印迹聚合物与喜树粉末的质量比为I 4，称取喜树粉末和分子印迹聚合物，将喜树粉末和分子印迹聚合物混合，研磨均化5min IOmin,得到混合粉末；二、将步骤一得到的混合粉末移入装有玻璃棉垫底的注射器中，再在混合粉末上方放置玻璃棉，压实；三、将淋洗剂倒入压实的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速淋洗，其中注射器中混合粉末的质量与淋洗剂的体积比为Ig 5mL^25mL ；四、将洗脱剂倒入淋洗后的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速洗脱，其中注射器中混合粉末的质量与洗脱剂的体积比为Ig :5mL 25mL，完成利用分子印迹一基质固相分散技术分离喜树碱的方法。其中，步骤三中淋洗的目的是淋洗掉喜树原料中除喜树碱以外的其它组分，步骤四中洗脱目标物为喜树碱。本实施方式采用基质固相分散技术作为分离模式，提取分离喜树碱，使得提取和净化在一个体系中完成，使样品制备过程简单，减少了实验时间和溶剂使用量；应用分子印迹聚合物作为分离介质，提高了喜树碱提取分离的选择性效果，该聚合物对喜树碱具有两种结合方式，总的吸附量(Qmaxl+Qmax2)可达l(T20mg g-1;在制备分子印迹聚合物时采用的是表面印迹技术，把结合位点局限在具有良好可接近性的二氧化硅表面上，从而有利于模板分子的洗脱和再结合，并且制备过程简单，条件易于控制，生产成本低。具体实施方式二 本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中分子印迹聚合物与喜树碱样品粉末的质量比为1:1. 1 2。其它与具体实施方式一相同。具体实施方式三本实施方式与具体实施方式一或二不同的是步骤二中玻璃棉的厚度为2mnT3mm。其它与具体实施方式一或二相同。具体实施方式四本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是步骤三中混合粉末的质量与淋洗剂的体积比为Ig :10mL 20mL。其它与具体实施方式一至三之一相同。具体实施方式五本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是步骤三中淋洗剂为甲醇水溶液或乙醇水溶液，其中甲醇或乙醇与水的体积比为1:1(Γ20。其它与具体实施方式一至四之一相同。具体实施方式六本实施方式与具体实施方式一至五之一不同的是步骤四中混合粉末的质量与洗脱剂的体积比为Ig :10mL 20mL。其它与具体实施方式一至五之一相同。 具体实施方式七本实施方式与具体实施方式一至六之一不同的是步骤四中洗本文档来自技高网...
【技术保护点】
利用分子印迹—基质固相分散技术分离喜树碱的方法，其特征在于利用分子印迹—基质固相分散技术分离喜树碱的方法，具体是按照以下步骤完成的：一、将喜树原料粉碎至细度为40目~50目，得到喜树粉末，按照分子印迹聚合物与喜树粉末的质量比为1：1~4，称取喜树粉末和分子印迹聚合物，将喜树粉末和分子印迹聚合物混合，研磨均化5min~10min，得到混合粉末；二、将步骤一得到的混合粉末移入装有玻璃棉垫底的注射器中，再在混合粉末上方放置玻璃棉，压实；三、将淋洗剂倒入压实的注射器中，以1mL/min~2mL/min的流速淋洗，其中注射器中混合粉末的质量与淋洗剂的体积比为1g：5mL~25mL；四、将洗脱剂倒入淋洗后的注射器中，以1mL/min~2mL/min的流速洗脱，其中注射器中混合粉末的质量与洗脱剂的体积比为1g：5mL~25mL，完成利用分子印迹—基质固相分散技术分离喜树碱的方法。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈立钢，洪言锁，李斌，
申请(专利权)人：东北林业大学，
类型：发明
国别省市：
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