一种用于水胺硫磷富集的分子印迹固相萃取柱的制备制造技术

本发明专利技术公开了一种以分子印迹技术为基础的水胺硫磷固相萃取材料的制备方法，属于检测技术领域。本发明专利技术基于分子印迹与固相萃取联用技术，利用功能单体、引发剂热引发聚合，合成水胺硫磷特异的分子印迹聚合物，并以此作为特异富集元件，结合固相萃取技术，建立一种新型的水胺硫磷富集与检测方法，该方法具有特异富集大量样品中的痕量水胺硫磷，稳定性高，既可以作为样品前处理与富集手段，也可以作为特异识别材料，在农药残留检测、食品安全等行业中具有很大的应用潜力。

【技术实现步骤摘要】
—种用于水胺硫磷富集的分子印迹固相萃取柱的制备
本专利技术涉及一种基于分子印迹技术的固相萃取材料的制备，并以材料作为富集设备可以用于水胺硫磷的检测。
技术介绍
农兽药残留不仅造成环境污染，危害食品安全，威胁人民群众身体健康，还导致我国食品和农产品出口遭遇国际贸易“绿色壁垒”，阻碍相关产业的健康发展。水胺硫磷是一种速效广谱硫逐式一硫代磷酰胺类杀虫、杀螨剂，对蛛形纲中的螨类、昆虫纲中的鳞翅目、同翅目昆虫具有很好的防治作用。主要用于防治果树红蜘蛛、介壳虫和水稻、棉花害虫。水胺硫磷能通过食道、皮肤和呼吸道引起中毒，为高毒农药，禁止用于果、茶、烟、菜、中草药植物上。但是由于杀虫效果较好、价格低廉，仍被违法使用。近几年我国因农药残留问题导致出口的农产品屡遭禁运，2006年初我国出口韩国的鳗鱼由于孔雀石绿检测超标，使我国渔业遭受巨大经济损失，2010年由水胺硫磷导致的“毒豇豆”事件直接导致海南农产品种植业遭受重大损失。建立水胺硫磷残留的检测方法十分迫切并具有重要的现实意义。但是，水胺硫磷是高度农药，低浓度下就有毒性，因此测定前必需对样品进行预处理，分离富集靶标组分、去除干扰物、降低样品基质效应，而分子印迹聚合物的特异性吸附性能可以为样品中靶标物的分析提供方便。 分子印迹材料作为一种可以根据目标物分子定制的聚合物材料，可对目标物特异性吸附和分离，被称为“人工抗体”，并且易于制备、成本低、环境耐受性好。分子印迹作为富集材料的研究目前在农药残留检测方面的应用较多，其形式为特异性的固相萃取及膜分离技术。其中固相萃取技术(Solid Phase Extract1n Technology, SPET),是利用固相材料吸附液体样品中的目标化合物，使其与样品基质及干扰物分离，再通过洗脱液洗脱收集，达到分离和富集目标化合物的目的。例如=Immer等利用分子印迹聚合物固相萃取水和土壤中的三嗪类农药，回收率达到80%，最低检测量0.05-0.2μ g/L。Tamayo等利用沉淀聚合法合成聚合物对植物组织中非草隆进行了固相萃取富集，去除植物组织干扰物效果良好。Kochkodan等利用光引发法合成分子印迹聚合物，在将其涂在支持膜上，利用所制备的分子印迹膜可有效的分离和富集水中的敌草净。Sergeyeva等以特丁通为模板分子，在亲水性聚偏氟乙烯膜表面接枝合成高聚物，用于样品中除草剂的膜分离。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种水胺硫磷特异的分子印迹固相萃取材料的制备方法。 本专利技术的技术方案概述如下: 一种水胺硫磷分子印迹固相萃取材料的制备方法，具体步骤如下: 在50mL的圆底烧瓶中加入适量289.29mg水胺硫磷、0.25mL N-异丙基丙烯酰胺和25mL乙腈，于室温下震荡20min，置于冰箱中过夜，再加入1.0mL交联剂EGDMA和1mg引发齐[JAIBN，向混合液中通氮气1min以除去溶解的氧气，密封后，至于80°C水浴热聚合10h，取出冷却至室温，1000rpm离心,用10%醋酸甲醇溶剂洗漆聚合物微球至检测不到水胺硫磷分子和功能单体，于烘箱中40°C真空干燥，制得分子印迹聚合物(MIP)。按同样方法不加模板分子水胺硫磷制得非印迹聚合物(N-MIP) 所述引发剂优选为偶氮二异丁腈、过氧化二碳酸二(2-乙基己基)酯、2，2'-偶氮二(2-咪基丙烷)二盐酸盐和偶氮二异丁基脒盐酸盐。 所述功能单体优选为N-异丙基丙烯酰胺、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯、2-乙烯基吡啶。 【附图说明】 图1水胺硫磷分子印迹膜扫描电镜图。 图2分子印迹聚合物对水胺硫磷的吸附响应，从图中可以看出MIP的吸附量明显高于NIP分子。 【具体实施方式】 实施例一分子印迹材料吸附性能评价 取水胺硫磷MIP和N-MIP各lOOmg，分别置于2mL管中，加入不同梯度浓度的水胺硫磷溶液3mL，置于恒温震荡器上保持25°C振荡24h，12000rpm离心5min，取离心液0.5mL，氮气吹干后，稀释定容至适当的浓度，紫外分光光度计检测浓度。从而计算吸附平衡时溶液中水胺硫磷浓度，根据结合前后溶液中水胺硫磷的浓度变化可计算其在单位质量分子印迹聚合物上的结合量。 实施方式二分子印迹固相萃取柱的制备 根据特异吸附性能和粒径，选择适当的印迹材料作为填料，制备分子印迹固相萃取柱。称取500mg MIP和N-MIP干法装入5mL蓝心玻璃注射器中(7.7cmX0.8cm id)，上下端用压紧的脱脂棉作筛板。同法用非印迹材料为填料制备非印迹柱作为对比。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种水胺硫磷特异的分子印迹固相萃取材料的制备方法，其特征由以下步骤组成：在50mL的圆底烧瓶中加入适量289.29mg水胺硫磷、0.25mL N‑异丙基丙烯酰胺和25mL乙腈，于室温下震荡20min，置于冰箱中过夜，再加入1.0mL交联剂EGDMA和10mg引发剂AIBN，向混合液中通氮气10min以除去溶解的氧气，密封后，至于80℃水浴热聚合10h，取出冷却至室温，10000rpm离心，用10％醋酸甲醇溶剂洗涤聚合物微球至检测不到水胺硫磷分子和功能单体，于烘箱中40℃真空干燥，制得分子印迹聚合物(MIP)。按同样方法不加模板分子水胺硫磷制得非印迹聚合物(N‑MIP)。

【技术特征摘要】
1.一种水胺硫磷特异的分子印迹固相萃取材料的制备方法，其特征由以下步骤组成: 在50mL的圆底烧瓶中加入适量289.29mg水胺硫磷、0.25mL N-异丙基丙烯酰胺和25mL乙腈，于室温下震荡20min，置于冰箱中过夜，再加入1.0mL交联剂EGDMA和1mg引发剂AIBN,向混合液中通氮气1min以除去溶解的氧气，密封后，至于80°C水浴热聚合10h，取出冷却至室温，1000rpm离心,用1...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘永信，
申请(专利权)人：天津默斯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12