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一种羧甲基纤维素酶活力的测定方法技术

技术编号:8451855 阅读:247 留言:0更新日期:2013-03-21 07:55
本发明专利技术涉及一种羧甲基纤维素酶活力测定方法。经过考察显色剂用量、显色时间、静置时间、羧甲基纤维素钠底物浓度、酶促反应温度、酶促反应时间、酶液稀释度等猴头菌培养物活性成分酸性羧甲基纤维素酶活力测定的影响因素,以及该测定方法的精密度与适应性,最终确立了酸性羧甲基纤维素酶活力的测定方法。本发明专利技术具有测定方法简便快速,测定现象清晰明了,测定结果准确可靠。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及纤维素酶活力测定方法,具体说是一种羧甲基纤维素酶活力 (CMCNa-DNS)的测定方法。
技术介绍
纤维素酶(Cellulase)是一种多组分的复合酶,不同来源的纤维素酶其组成及各组分比例有较大差异。一般来讲,纤维素酶包括外切β-1,4-葡聚糖酶(Exop-1, 4-glucanase,E C3. 2·1. 91)、内切 β-1,4-葡聚糖酶(Endop-1,4-glucanase,E C3. 2.1. 4) 和纤维二糖酶(Cellobiase,E C3. 2.1. 21)。不同来源的纤维素酶制剂产品中三种酶组分含量的比例不同,因此其最终的表观酶活力会有差异。同时纤维素酶作用的底物也比较复杂,致使纤维素酶活力的测定方法很多,且方法复杂而不统一。常用的方法有羧甲基纤维素糖化力法、羧甲基纤维素液化力法、滤纸糖化力法、滤纸崩溃法和棉花糖化力法等。上述测定方法中,羧甲基纤维素糖化力主要代表外切β_1,4葡聚糖苷酶和内切酶的活力总和, 在研究和实际生产中应用比较普遍。国内外采用羧甲基纤维素糖化法测定纤维素酶活力的方法很多。目前,国际上有较公认的IPUAC推荐的纤维素酶测定方法(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种羧甲基纤维素酶活力的测定方法,包括如下步骤:(1)猴头菌培养物溶液的制备:猴头菌培养物经粉碎,过筛,以适量水溶解,振摇2~4小时,滤过,定容。(2)吸光度测定:精密量取1%羧甲基纤维素钠溶液1.5ml置具塞刻度试管中,精密加猴头菌培养物溶液0.5ml,混匀,置45~55℃水浴中保温25~35分钟,取出,立即精密加入DNS试剂1.5ml,摇匀,置沸水浴中保温5~15分钟,取出,迅速自来水冷却10分钟,再加水至刻度,摇匀,静置1~2小时,以空白管进行调零,在540nm波长处测定吸光度。空白管加1%羧甲基纤维素钠溶液1.5ml,置45~55℃水浴中保温25~35分钟,取出,精密加猴头菌培养物溶液...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:何述金常耀台贾林周代俊周准
申请(专利权)人:何述金
类型:发明
国别省市:

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