一种小单孢菌菌株、制备方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种小单孢菌菌株、制备方法及其应用，本发明专利技术从海洋沉积物中分离并筛选到一株抗肿瘤活性很好的放线菌，该放线菌为小单孢菌菌株FIM07-0019(Mciromonospora?sp.FIM07-0019)，并利用该小单孢菌菌株FIM07-0019制备出发酵液，再将所述发酵液经提取、正相硅胶柱层析、C18反相柱层析等处理，提取分离得到对肿瘤细胞具有细胞毒活性的大环内酯类化合物，该大环内酯类化合物为研究开发新的抗肿瘤药物提供了天然药物化学研究基础和先导化合物，对开发利用中国的海洋药物资源具有重要价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种小单孢菌菌株，该小单孢菌菌株的制备方法，及该小单孢菌菌株的应用。
技术介绍
小单孢菌属(Micromonospora)属于放线菌目小单孢菌科(Micromonosporaceae)，因菌丝上着生单个孢子而得名，该属菌为革兰氏阳性菌,不抗酸,好氧或微好气,化能异养菌,基内菌丝发达,分枝有隔。在基内菌丝上长单个孢子,有梗或无梗,孢子不游动。小单孢菌是抗生素的重要来源。临床上应用的许多氨基糖抗生素如庆大霉素等都是小单孢菌产生的。目前从该属发现的抗生素种类仅次于链霉菌，达450种以上。1987年从Caliche土壤样品中分离的棘孢小单孢菌Micromonospora echinospora subsp.calichensis产生结构新颖的烯二炔类抗肿瘤抗生素Calicheamicinγ1。该化合物细胞毒性高，至少是多柔比星的1000倍。该药物的第一个抗体靶向化疗药物CMA-676(Mylotarg)TM以在临床应用，它可治疗严重、快速发展的致命性疾病急性本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种小单孢菌菌株，其特征在于：所述菌株为小单孢菌菌株FIM07？0019(Mciromonospora？sp.FIM07？0019)，于2012年8月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC？NO.6474。

【技术特征摘要】
1.一种小单孢菌菌株，其特征在于：所述菌株为小单孢菌菌株
FIM07-0019(Mciromonospora sp.FIM07-0019)，于2012年8月23日保藏于
中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.
6474。
2.一种如权利要求1所述的小单孢菌菌株的分离方法，其特征在于：包
括以下步骤：
步骤100：将2克采集于智利南部43°32′0′S，72°52′0′W，水深20米的海
底海泥用无菌陈海水稀释成10-1和10-2倍；
步骤200：分别取原液及稀释过的样品悬液0.1mL涂布于燕麦琼脂培养基
进行菌种分离，并于30℃下培养2周，得到小单孢菌菌株FIM07-0019。
3.如权利要求2所述的小单孢菌菌株的分离方法，其特征在于：所述燕
麦琼脂培养基组分为：燕麦粉2％、琼脂2％、重铬酸钾50mg/L、微量元素
溶液0.1ml/100ml，其余成分为水，且所述水包括质量比为1∶1的蒸馏水和海
水；所述微量元素溶液包括如下组分：FeSO4·7H2O 0.1g，MnCl2·4H2O 0.1g，
ZnSO4·7H2O 0.1g，蒸馏水1000ml。
4.一种利用权利要求1所述的小单孢菌菌株制备大环内脂类化合物的方
法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)制备小单孢菌菌株FIM07-0019发酵液：将一铂环小单孢菌菌株
FIM07-0019的燕麦琼脂斜面培养物接入种子培养基，于温度35℃，转速
220rpm/min下培养48h；然后按10％的移种量转入发酵培养基，并于温度28
℃，转速220rpm/min下振荡培养96～120h；
(2)提取：将(1)中获得的小单孢菌菌株FIM07-0019发酵液于4500rpm
离心15min以获得上清液和菌丝体；所述菌丝体用2倍于菌丝体体积的甲醇
浸泡，经减压浓缩后再用水稀释；将稀释液与上清液合并后一起流经大孔吸
附树脂Hp-20，...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭飞，连云阳，王传喜，谢阳，林如，江宏磊，江红，
申请(专利权)人：福建省微生物研究所，
类型：发明
国别省市：