【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过发酵生产L-鸟氨酸的方法
技术介绍
已知L-鸟氨酸有关于肝功能的刺激作用并经常用作药剂配料和在运动营养中使用。目前通过多种方法制备L-鸟氨酸。一种方法是借助微生物的发酵制备。另一种方法是精氨酸的碱水解，例如用氢氧化钡(CN 1594282A)。另一种方法是通过固定具有精氨酸酶活性的微生物的精氨酸生物转化(KR589121B1)。从L-瓜氨酸制备L-鸟氨酸的方法在专利文献(JP 42007767B4)中也已有所描述。特征在于分泌L-鸟氨酸至培养基中的微生物在该文献中已有所描述。所述微生物的实例是棒状杆菌属(Corynebacterium)、短杆菌属(Brevibacterium)、芽孢杆菌属 (Bacillus, JP 43010996B4、JP 57041912B)、埃希氏菌属(Escherichia, US 3668072A)、普罗威登斯菌属(Providencia, JP 03195494)或节杆菌属(Arthrobacter, US 3574061)的细菌。生产L-鸟氨酸的微生物特征常常在于对氨基酸L-精氨酸或L-瓜氨酸的营养缺陷(短杆菌、芽孢杆菌、棒状杆菌在...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.03.30 DE 102010003419.31.制备L-鸟氨酸的方法，其特征在于进行以下步骤a)在培养基中发酵分泌L-鸟氨酸的细菌，所述细菌选自棒状杆菌、芽孢杆菌、链霉菌、 节杆菌和肠杆菌，其过表达编码具有L-鸟氨酸输出蛋白活性的多肽的多核苷酸，所述多肽的氨基酸序列与SEQ ID No. 2的氨基酸序列具有> 35%的相同性，b)在所述培养基中积累L-鸟氨酸，其中获得发酵液，和c)其中排除以DSM23239保藏的质粒pEC71ysE的过表达，d)并且其中所编码的多肽的长度适当地是>146至< 286个氨基酸或氨基酸残基。2.权利要求I的方法，其特征在于所编码的多肽包含SEQID No. 2或SEQ ID No. 4的氨基酸序列。3.权利要求I或2的方法，其特征在于在谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)的情况下，与ATCC13032或ATCC14067或ATCC13869相比，过表达使L-鸟氨酸输出蛋白活性水平增加至少10%。4.权利要求1-3的方法，其特征在于过表达通过一或多种措施实现，所述措施选自a)增加拷贝数，b)使用强启动子，和c)突变启动子，和d)过表达激活蛋白。5.权利要求1-4的方法，其特征在于所述细菌是棒状杆菌，优选谷氨酸棒状杆菌。6.权利要求1-5的方法，其特征在于额外地弱化一或多种基因，所述基因选自a)编码α-酮戊二酸脱氢酶(EC I. 2. 4. 2) El亚基的odhA基因，b)编码二氢硫辛酰胺琥珀酰转移酶(EC2. 3. I. 61)的sucA基因，c)编码二氢吡啶二羧酸合酶(DapA，EC4. 2. I. 52)的dapA基因，d)编码二氢吡啶二羧酸合酶(DapB,EC I. 3. I. 26)的dapB基因，e)编码内消旋_二氨基庚二酸脱氢酶(Ddh，EC I. 4. I. 16)的ddh基因，f)编码二氨基庚二酸脱羧酶(LysA，EC4. I. I. 20)的IysA基因，g)编码L-精氨酸生物合成的阻抑蛋白(ArgR)的argR基因，h)编码鸟氨酸氨甲酰基转移酶(ArgF，EC2. I. 3. 3)的argF基因，i)编码精氨琥珀酸合酶(ArgG，EC6. 3. 4. 5)的arg...
【专利技术属性】
技术研发人员：W·克莱斯，R·格斯特迈尔，
申请(专利权)人：赢创德固赛有限公司，
类型：
国别省市：
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