本发明专利技术涉及一种枯草芽孢杆菌BC-198、及其富硒菌剂与应用。所述枯草芽孢杆菌（Bacillus?Subitilis）BC-198，其保藏号为CCTCCNo.M2012321。本发明专利技术还提供了一种复合菌剂，其有效成分为枯草芽孢杆菌BC-198和褐球固氮菌AS1.212。本发明专利技术提供的富硒菌剂的制备方法可利用现成的通用发酵设备，操作简单，制作成本低，制得的产品对作物有固氮、促生长、防治真菌病害等多种功能，作物施用后可增加产量，改善农产品品质，生产农产品含硒量提高20倍以上，达到富硒产品质量标准。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物
，特别涉及一种枯草芽孢杆菌BC-198及其其富硒菌剂与应用。
技术介绍
硒是人类和动物必须的微量元素，有防癌和抗癌作用，长期缺硒，可引起多种疾病，是引起克山病的病因之一。现在人们认识到补硒必要性，通过食品补硒被认为最安全，最方便的手段。同世界大多数国家一样，我国也是缺硒地区。我国缺硒省市达20多个，土壤中硒含量约O. 03-0. lmg/kg,向土壤补硒是获得富硒农产品(食品)的一种有效办法。多年来，人们以富硒矿石、富硒煤矸石等原料，经粉碎、碱处理得到少部分(20%)可溶性无机硒，与 氮、磷、钾、铜、锌、铁、镁、硼等无机盐或有机质复混成富硒肥料，或把硒制备成硒酸钠、亚硒酸钠，并以其溶液再与无机或有机肥料混配成富硒肥料，喷施到作物叶片或直接施到土壤中，这些富硒肥料虽然可以生产富硒农产品和富硒食品，但对肥料中无机硒作物利用率仅10%-15%，仍很低，施用有机硒可能是提高作物对硒利用率的途径。农用微生物菌剂是一类有别于无机复合肥料、有机肥料的功能性微生物肥料。利用有益微生物转化硒，把无机硒转化成有机硒，以提高农作物对硒利用率，提高农产品含硒量。目前富硒微生物包括富硒酵母、富硒食用菌、光合细菌等。专利CN200710010871专利技术的一种富硒联合固氮菌剂，在制备菌剂中加入可溶性硒，利用固氮菌对无机硒进行转化，但其制剂中只采用固氮菌，仅具有单一固氮生理功能的富硒微生物肥料。专利CN102618469A，专利技术名称一种荚膜红细菌及其应用，公开了一种荚膜红细菌AYGHJ-16，属光合细菌，利用光能对物质进行代谢，促进无机硒的转化和吸收，并有固氮和固碳作用。专利100512666C，专利技术名称一种含硒微生物饲料添加剂及其制备方法，公开了利用微生物活菌为红假单孢菌、纳豆菌芽孢杆菌和酵母菌进行液体发酵、固体发酵，实现无机硒的微生物转化。与本专利技术相比，目前的菌剂对硒的转化或采用单一菌株或者同类菌株，对硒的转化以及植物对硒的利用仍比较低。而且推广使用的功能性微生物肥料如固氮、解钾、解磷、催腐、促生长、抗病等肥料大多是功能单一的普通微生物菌剂。
技术实现思路
本专利技术目的是提供一株枯草芽孢杆菌BC-198及其应用。本专利技术另一目的是提供含有上述枯草芽孢杆菌BC-198的菌剂。本专利技术再一目的是提供一种有效成分为枯草芽孢杆菌BC-198和褐球固氮菌ASl. 212的复合菌剂。本专利技术又一目的是提供所述复合菌剂的制备方法。本专利技术提供的枯草芽孢杆菌Bacillus Subitilis BC-198,已于2012年8月30日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC ;地址中国武汉，武汉大学；邮编430072)，保藏编号 CCTCCNo. M2012321。本专利技术还提供含有所述枯草芽孢杆菌BC-198的菌剂。本专利技术进一步提供一种复合菌剂，其有效成分为枯草芽孢杆菌BC-198和褐球固氮菌ASl. 212。所述枯草芽孢杆菌BC-198的活菌数为10-25亿/ml，所述褐球固氮菌ASl. 212的活菌数为10-25亿/ml。优选地，所述枯草芽孢杆菌BC-198的活菌数为15-19亿/ml，所述褐球固氮菌ASl. 212的活菌数为15-19亿/ml。本专利技术所述复合菌剂还含有防腐剂、保护剂；其中，所述防腐剂为苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钠盐、丙酸及其钠盐中的一种或几种；所述保护剂为多羟基聚合物，其中所述多羟基聚合物为海藻酸及其钠盐、聚谷氨酸及 其钠盐、羧甲基纤维素及其钠盐中的一种或几种。本专利技术还提供所述复合菌剂的制备方法，包括以下步骤I)制备枯草芽孢杆菌BC-198种子液和褐球固氮菌ASl. 212种子液；2)枯草芽孢杆菌BC-198种子液和褐球固氮菌ASl. 212种子液发酵培养，制备发酵液。其中，所述种子培养条件为种子培养基在500晕升三角瓶装100-130晕升培养基，28-35°C恒温振荡培养12-16小时得种子液。培养枯草芽孢杆菌BC-198的种子培养基组成含硒溶液100毫升中加入葡萄糖O. 5%、淀粉O. 3%、蛋白胨O. 6%、酵母膏O. 25%、氯化钠O. 4%、磷酸氢二钾O. 1%、PH7. 2 ；褐球固氮菌ASl. 212的种子培养基组成含硒溶液100毫升中加入O. 3%葡萄糖、O. 8%蔗糖、O. 2%蛋白胨、O. 6%酵母膏、O. 4%氯化钠，硝酸钾O. 2%、PH7. 4。其中，所述发酵培养条件为装料体积为发酵罐容积的65-70%。枯草芽孢杆菌和褐球固氮菌的种子接入量分别与培养液体积比为I. 0-2. 0%和I. 5-2. 5%，罐内温度28-35°C、罐压O. 04-0. 06MPa、搅拌速度190220转/分钟，培养液体积与通入空气体积比I :O. 2-0. 4 (v/v)，混合发酵14-19小时得发酵液。发酵培养基组成为在含硒溶液中加入O. 3-0. 5%葡萄糖、O. 3-0. 7%蔗糖、O. 4-0. 6% 蛋白胨、O. 3-0. 5% 酵母膏、O. 2-0. 5% 氯化钠、PH7. 4。所述发酵液中进一步加入防腐剂、保护剂。所述防腐剂按发酵液体积加入质量体积比为O. 10%-0. 50%。所述保护剂按发酵液体积加入质量体积比为O. 15%-1. 0%。所述枯草芽孢杆菌BC-198或所述菌剂或所述复合菌剂可应用于生产富硒菌剂，用于提高植物对硒的吸收和利用。本专利技术优点是本专利技术提供的菌株可用于富硒菌剂的制备.制备方法可利用现成的通用发酵设备，操作简单，制作成本低，制得的产品对作物有固氮、促生长、防治真菌病害等多种功能，可溶性硒经微生物进一步活化和转化更有利于作物对硒吸收和利用，作物施用后可增加产量，改善农产品品质，生产农产品含硒量提高20倍，达到富硒产品质量标准。附图说明图I为Bc-198细胞电镜图，放大倍数IOk ；图2为黄瓜使用枯草芽孢杆菌BC-198的长势效果图3为黄瓜未使用枯草芽孢杆菌BC-198的长势效果图。具体实施例方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。在不背离本专利技术精神和实质的情况下，对本专利技术方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本专利技术的范围。若为特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。本专利技术中涉及到的百分号“％”，若未特别说明，食指质量百分比；但溶液的百分t匕，除另有规定外，是指溶液IOOml中含有溶质若干克；液体之间的百分比，是指20°C时容量的比例。实施例I富硒多功能菌株分离和鉴定 从湖北恩施市白杨坪的富硒烟草废弃物中，通过在O. 15%NaSe03、0. 6%葡萄糖、O. 5%蔗糖、O. 8%蛋白胨、O. 3%酵母膏、O. 4%氯化钠、水100毫升配制的培养基中富集分离纯化。拮抗试验和促生长试验，筛选得一株菌株BC-198，该菌株发酵液对大豆种子发芽率、根长、比对照提高30-40% ;对镰刀菌、青霉抑制圈均大于I. 5厘米。还具有蛋白酶、纤维素酶活力；该菌株形态或生理生化特征是；革兰氏染色阳性、细胞杆状、直径< lum、如图I所示，形成芽孢，不膨大，无伴胞晶体；接触酶、氧化酶阳性，好氧生长，VP试验阳性，VP < PH6试验阳性，VP > PH7试验阴性，甲基红试验阴性，利用葡萄糖、木糖、L-阿拉伯糖、甘露醇本文档来自技高网...
【技术保护点】
枯草芽孢杆菌（Bacillus？Subitilis）BC？198，其保藏号为CCTCCNo.M2012321。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈家任，刘金龙，
申请(专利权)人：恩施和诺生物工程有限责任公司，陈家任，刘金龙，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。