一种从松针中制备酪氨酸酶抑制剂的方法技术

本发明专利技术公开了一种从松针中制备酪氨酸酶抑制剂的方法，其特点是将干松针粉碎，按料液比1g∶10～50ml加入浓度40～80%的甲醇，在室温下震荡、分离，将上清液浓缩干燥得甲醇浸膏；将浸膏分散于水中，加入醋酸乙酯萃取2～3次；将水相萃余物浓缩至20～30ml，上反相树脂层析柱，用浓度为0%、20%、40%、100%甲醇洗脱；将上述40%组分浓缩到10～15ml，上Sephadex?LH-20层析柱，用浓度为0%、50%、100%甲醇洗脱；再将上述50%组分浓缩到10～15ml，上反相树脂层析柱，用浓度为0%、10%、20%、30%、50%、100%甲醇洗脱，收集30%甲醇洗脱峰，浓缩干燥后得到酪氨酸酶抑制剂有效成分，得率为0.5～2%。酪氨酸酶抑制的活性，在浓度为50μg/ml时，对酪氨酸酶活性的抑制率达到56.3%，IC50值为46.7?g/ml。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，更具体地说涉及一种以雪松松针为原料提取生物活性成分的方法，属于化学化工

技术介绍
酪氨酸酶(EC I. 14. 18. I)广泛存在于自然界中，是催化酪氨酸氧化成多巴、多巴氧化成多巴醌反应的含铜酶。酪氨酸酶是黑色素合成的关键酶。黑色素是色素沉着聚合物的一种，在人体和动物的皮肤、眼睛和毛发中都有分布。黑色素的过量会导致一系列疾病，包括皮肤癌、雀斑、褐斑病、老年斑，这不仅影响了人们的美观，更严重的是黑色素细胞的大量增殖而导致的黑色素瘤已成为严重威胁人类生命健康的重大疾病之一。同时，酪氨 酸酶是果蔬酶促褐变的重要酶。在食品加工过程中，果蔬中的多酚类物质与空气中的氧气在酪氨酸酶(又称多酚氧化酶，ΡΡ0)的催化下反应生成邻醌类化合物，随后，邻醌继续将多酚类物质氧化成羟基醌，羟基醌最终聚合成黑褐色的黑色素物质，它严重影响果蔬的质量品质。因此，从天然植物中提取新的高效、低毒的酪氨酸酶抑制剂是国内外的研究热点。雪松(Cedrus deodara)，又名喜马拉雅雪松，是裸子植物门、松科、雪松属植物，在我国广泛栽培。雪松不仅可作为优良的木材资源，也是常见的绿化树木。松针是松属本文档来自技高网...

【技术保护点】
从松针中制备酪氨酸酶抑制剂的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：（1）将干雪松松针粉碎，平均粒度为400～600μm，按料液比1g∶10～50ml加入浓度40～80%的甲醇作为提取剂，在室温下震荡36～48h，分离上清液，并将上清液浓缩干燥后获得甲醇浸膏，得率为15～25%；（2）将上述甲醇浸膏分散于蒸馏水中，料液比为1g∶10～30ml，然后按体积比1∶2～4加入醋酸乙酯震荡萃取2～3次，收集水相萃取物；？？？（3）将上述水相萃物浓缩至20～30ml，上反相树脂SciBioChem？MCI？GEL层析柱，用甲醇？水梯度洗脱，浓度为0%、20%、40%、100%甲醇，洗脱流速为1～2ml/mi...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：高鸿，梁雪，钟凯，黄毅娜，祝瑞雪，山口五十磨，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：