天麻素作为酪氨酸酶抑制剂的应用制造技术

本发明专利技术公开了天麻素具有强烈的酪氨酸酶抑制作用，能显著降低细胞黑色素生成量，其效果明显优于目前在化妆品中常用的作为酪氨酸酶抑制剂的熊果苷，并且具有较好的稳定性和较低的细胞毒性，可应用于防治老年斑、色斑等皮肤色素沉着和美白，以及作为食品保鲜添加剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物和医药
，设及天麻素的新应用，具体设及天麻素作为酪 氨酸酶抑制剂在药物、化妆品和食品添加剂中的应用。
技术介绍
随着人们生活水平和审美标准的不断提高，对拥有健康美白肌肤的愿望日益迫 切。在中国、日本、韩国和印度运样的国家，皮肤增白具有广阔的市场，运些地区的众多女性 把更白的皮肤视为美丽、健康和崇高社会地位的象征。一项研究估计，亚洲国家一半的女性 使用皮肤增白霜，每年的花费相当于数十亿美元。人们也使用运类产品稱去难看的老年斑、 雀斑和收集了色素的瘤痕。因此，有关皮肤美白类化妆品已成为护肤类化妆品的主流产品， 其消费市场日益扩大。然而，有些增白化妆品中含有有毒的化学物质，如具有较强的细胞毒 性的隶、对二苯酪和氨酿化合物等，长期使用能导致发红、痒，甚至出现炎症等皮肤问题。更 为严重的是，运些化学合成物质如果频繁地高剂量使用，一些增白成分可能增加皮肤癌的 风险，许多国家已经禁止使用。因此，需要研究更安全、更有效的替代品。 研究表明，皮肤色素沉着是由于黑色素细胞内黑色素产生过多导致的，而酪氨酸 酶是黑色素合成过程中的关键酶，其广泛分布于微生物、动植物和人体中。黑色素合成量的 多少与酪氨酸酶酶量的表达和活性大小密切相关，减少酪氨酸酶的产生和抑制其活性即可 控制黑素生成量。因此，通过降低酪氨酸酶表达量和抑制其活性，可W有效地限制皮肤中黑 色素合成，从而减少皮肤的色素沉着，达到治疗各种色斑或者与之相关的各种皮肤病的目 的。所W，酪氨酸酶抑制剂在化妆品、临床药物、防止水产品等食品褐变应用研究越来越受 到重视。 许多天然植物提取物中含有抑制酪氨酸酶的活性物质，由于其作用安全而且溫 和，能有效地清除氧自由基，而被广泛作为皮肤美白护理的原料用于开发成美白化妆品，例 如曲酸和熊果巧等。但是仍然存在问题，不能满足消费市场需求。曲酸由于性质不稳定， 美白效果较弱；熊果巧虽然相对较为稳定，但使用浓度过高，在有增白效果的浓度时具有毒 性。有些植物提取物往往由于颜色较深，对化妆品外观产生不良影响。因此，从植物中寻找 安全有效和颜色较淡的美白天然化合物已成为化妆品行业研究发展趋势。 阳〇化]此外，果品蔬菜、鱼邮类水产品的保鲜也是亟待解决的问题。如鱼邮水产品和香 蕉、±豆等蔬菜水果在加工和储存过程中往往会变黑。运是由于其内源酪氧化酶和酪氨酸 酶容易发生褐变反应，形成黑褐色斑块，从外观上就降低了品质，带来巨大经济损失。因此， 寻找一种防止食品褐变的安全有效的天然化合物作为添加剂，即通过寻找对酪氨酸酶具有 特效的抑制剂用于果品蔬菜和水产品保鲜无疑是一种有效的方法。
技术实现思路
熊果巧又名熊果素，呈白色针状结晶或粉末。萃取自熊果的叶子，能够加速黑色素 的分解与排泄，从而减少皮肤黑色素沉积，桂除色斑和雀斑，同时还有杀菌、消炎的作用，主 要用于高级化妆品的制备，起到美白的效果。 熊果巧的结构如式（I)所示： 天麻（Gastrodia elata B1.)是一种传统的中药材，其主要生物活性物质 是天麻素，天麻素化学名称：4-径甲基苯-P -D- [I比喃葡萄糖巧【4-(hy化oxymethyl) pheny；L-P-D-Glucopyranoside】，化学分子式：C13H1SO7,其化学结构式如式（II)所示： 临床试验已证实天麻素具有较好的镇静和安眠作用，可作为治疗痛眩晕、肢体麻 木、惊痛抽摇、头痛和癒痛辅助治疗药物。近几年研究发现天麻素还能够有效的治疗血管性 痴呆。 天麻素化学结构与熊果巧类似，熊果巧是在葡萄糖上连接一个酪径基基团，天麻 素是在葡萄糖上连接一个苯甲醇基团，天麻素比熊果巧具有更好的稳定性。鉴于此，专利技术人 有理由相信天麻素也应具有类似熊果巧的抑制酪氨酸酶，减少细胞中黑色素的生成量的效 果，更稳定的结构甚至带来更佳的抑制效果。 通过天麻素对酪氨酸酶抑制活性的测定和抑制时间分析，发现天麻素表现出对酪 氨酸酶具有抑制活性，并呈现浓度依赖性；W熊果巧作为对照，发现天麻素对酪氨酸酶抑制 作用明显；通过抑制时间分析发现，天麻素的抑制作用具有较好的稳定性。 通过天麻素对人黑色素瘤细胞的黑色素生成量和细胞毒性试验发现，W熊果巧作 为对照，天麻素能显著减少细胞黑色素生成量并具有较低的细胞毒性，说明天麻素能够有 效调控黑色素生成途径而且安全性较好。 本专利技术证实了天麻素对酪氨酸酶活性具有有效地抑制作用，能显著减少细胞中黑 色素的生成量。 作为美白化妆品成分，天麻素可W单独使用，也可W与其它化合物混合使用，并与 药学上所允许的辅料或常规的药用载体一起用作抑制黑色素生成的美白化妆品。本专利技术 还可W任意选择添加如下1种或者2种W上美白成分：如内皮素括抗剂、桑树提取物、甘草 提取物、胎盘提取液、果酸、芦苔a-抗坏血酸，也可W采用不排除上述罗列的其它美白剂成 分。 天麻素可进一步在药品制备或食品添加剂中使用，其中的使用量可视不同用途有 所不同。 制备药物或者化妆品时，天麻素可与常规药物载体，如软膏基质、乳化剂、表面活 性剂、渗透剂、稳定剂等制成乳剂或软膏等外用制剂，制备工艺可采用常规的药物制剂制备 技术。天麻素在化妆品中或药品中的用量W重量百分比计为0. 1~2%比较合适。 酪氨酸酶参与了许多水果蔬菜W及鱼邮等水产品及其加工产品的褐变反应，是导 致变褐生斑和黑化而失鲜的主要原因，由于天麻素能够有效抑制酪氨酸酶活性和黑色素形 成量，能够在预防褐变的食品添加剂中应用。 综上所述，天麻素具有强烈的酪氨酸酶抑制作用，能显著降低黑色素生成量，而且 安全又稳定，可应用于防治老年斑、色斑等皮肤色素沉着和美白，W及作为食品保鲜添加 剂。【附图说明】 为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使 用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的有关本专利技术的附图仅仅是本专利技术的一 些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可W根据运些 附图获得其他的附图。 图1是天麻素和熊果巧对人HEM细胞内酪氨酸酶抑制活性比较； 图2是不同浓度的天麻素在不同时间对酪氨酸酶活力影响曲线图，天麻素浓度为 0( □ )mM、8( ▼ )mM、32( ▲ )mM、125( ? )mM和 500( )mM; 图3是天麻素和熊果巧对人HEM细胞黑素含量影响柱状比较图； 图4是天麻素和熊果巧对人HEM细胞黑化影响直观比较图； 图5是天麻素和熊果巧对人HEM细胞毒性影响柱状比较图。【具体实施方式】 下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行详细的描 述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术 中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施 例，都属于本专利技术保护的范围。 实验所用试剂和仪器：1640细胞培养液、膜蛋白酶、曲拉通X-lOO(triton)、胎牛 血清（FB巧、左旋多己化-dopa)、二甲基亚讽值MS0)、嚷挫兰（MTT)、天麻素（Gastrodin)、熊 果巧（Arbutin)、紫外分光光度计、酶联免疫检测仪。 阳〇29] 实施例1 天麻素对人黑色素表皮细胞（HEM)内酪氨酸酶抑制活性的测定 1)实验细胞制备当前第1本文档来自技高网...

【技术保护点】
天麻素作为酪氨酸酶抑制剂的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：许维岸，韩宏岩，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32