一种楤白皮总皂苷及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种楤白皮总皂苷及其制备方法和应用。楤白皮总皂苷是从楤木的根皮当中提取得到的，其提取为：楤木的根皮经乙醇-水溶液浸渍后加热回流提取，提取液上样于大孔吸附树脂柱，用水洗脱至流出液无色后再用乙醇-水溶液梯度洗脱，收集洗脱馏分后回收乙醇，然后用乙酸乙酯萃取，将乙酸乙酯萃取液干燥后得到楤白皮总皂苷。楤白皮总皂苷对肿瘤细胞具有明显的抑制作用，能够应用于抗肿瘤药物的制备。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物药用活性成分
，涉及ー种惚白皮总皂苷及其制备方法和应用。
技术介绍
从天然动、植物中寻找低毒、高效的抗癌活性成分是新药研究的重要途径。秦巴山区是我国天然药物资源最为丰富的区域之一，其中一些从秦巴地区太白山某些中草药提取的有效成分已被《美国药典》录入或用于临床肿瘤的治疗之中，因此近年来太白山传统中草药成为新药研究的重点领域
技术实现思路
本专利技术解决的问题在于从太白山中草药中的ー种自五加科植物惚木的根皮(亦称飞天蜈蚣七)中提取药用活性成分，提供一种惚白皮总皂苷及其制备方法，所提取的总皂苷具有抗肿瘤活性。本专利技术是通过以下技术方案来实现一种惚白皮总皂苷，是从惚木的根皮当中提取得到的，其提取为惚木的根皮经こ醇-水溶液浸溃后加热回流提取，提取液上样于大孔吸附树脂，用水洗脱至流出液无色后再用こ醇-水溶液梯度洗脱，收集洗脱馏分后回收こ醇，然后用こ酸こ酯萃取，将こ酸こ酯萃取液干燥后得到惚白皮总皂苷。—种惚白皮总皂苷的制剂，以惚白皮总皂苷为药用成分，将其制备成的固体或液体形式的制剂。所述的固体形式为片剂、颗粒剂、胶囊剂，液体形式为溶液、糖浆剂，所述的惚白皮总皂苷对肿瘤细胞抑制的应用。所述的惚白皮总皂苷用于抗肿瘤药物的制备的应用。一种惚白皮总皂苷的制备方法，包括以下步骤I)将惚木的根皮经冲洗、干燥后粉碎，然后加入こ醇-水溶液浸溃8 12h，浸溃后加热回流提取I 5h，回流提取完成后收集提取液，减压回收こ醇，浓缩得到浓缩液；2)浓缩液加水后搅拌均匀，静止12 24h后抽滤；将滤液上大孔吸附树脂，先用水洗脱至流出液无色，然后再用こ醇-水溶液按照体积浓度30 80%进行梯度洗脱；收集こ醇梯度大于50%洗脱的洗脱液，并回收洗脱液中的こ醇，浓缩得到二次浓缩液；3)将二次浓缩液喷雾干燥或真空干燥后得到药物干燥粉；4)将药物干燥粉加水溶解均匀后加入こ酸こ酯萃取，萃取多次后合并こ酸こ酯萃取液，减压浓缩得到三次浓缩液，三次浓缩液真空干燥后得到惚白皮总皂苷。所述的こ醇-水溶液中こ醇的体积浓度为30 85%，其余为水。所述的浓缩液或二次浓缩液的相对密度为I. 06 I. 10，三次浓缩液的相对密度为 0. 90 0. 95。所述的大孔吸附树脂为D-101、HPD722、AB-8或DS401树脂柱。所述的梯度洗脱的流速为0. 5 2ml/min,时间为2 24h。所述的喷雾干燥时采用热风干燥，进风温度为160 180°C，出风温度为70 IOO0C，雾化器转速为80转/秒至200转/秒；真空干燥时，真空度为0. 09 0. 15Mpa，温度为50 80°C干燥20 40小h。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果本专利技术提供的惚白皮总皂苷，是以惚木的根皮(飞天蜈蚣七)作为原料，通过回流 提取、树脂分离纯化、こ酸こ酯萃取得到的具有药用活性的总皂苷。该总皂苷能够作为药用成分通过制剂得到中成药，方便使用，提高药用的安全性。本专利技术提供的惚白皮总皂苷对肿瘤细胞具有明显的抑制作用惚白皮总皂苷进行了抗肿瘤提取物对体外培养的H22肝癌细胞、FBL3白血病细胞和B16黑色素瘤细胞均具有明显的抑制作用，惚白皮总皂苷体外对FBL3和B16细胞的作用IC5tl分别为0. 199g じ1和0. 0774g じ1 ;在上述浓度下，对H22细胞的抑制率均超过80%，能够应用于抗肿瘤药物的制备。本专利技术提供的惚白皮总皂苷具有较高的安全性惚木皂苷一次性灌胃给药的LD50 为 3265mg/kg, LD50 的 95%可信限为 2931 3639mg/kg。附图说明图I为分光光度法的检测惚白皮总皂苷浓度和吸光度关系曲线；图2为惚白皮总皂苷不同时间点对FBL3细胞的抑制作用；图3为惚白皮总皂苷对H22、B16和FBL3肿瘤细胞的抑制作用。具体实施例方式本专利技术提供一种惚白皮总皂苷及其制备方法和应用，从传统太白山中草药飞天蜈蚣七中提取具有药用效果的总皂苷。下面结合具体的实施例对本专利技术做进ー步的详细说明，所述是对本专利技术的解释而不是限定。传统太白山中草药飞天蜈蚣七是采用采挖的根皮切成厚片或小节，干燥而成，具有活血止痛、祛瘀除痹等作用。利用飞天蜈蚣七提取惚白皮总皂苷的制备方法如下惚木的根皮经こ醇-水溶液浸溃后加热回流提取，提取液上样于大孔吸附树脂，用水洗脱至流出液无色后再用こ醇-水溶液梯度洗脱，收集洗脱馏分后回收こ醇，然后用こ酸こ酯萃取，将こ酸こ酯萃取液干燥后得到惚白皮总皂苷。下面通过具体的实施例对惚白皮总皂苷的制备方法进行说明。实施例I惚白皮总皂苷的制备方法，包括以下步骤取选好的飞天蜈蚣七1000克分别经过冲洗、干燥后粉碎成粗粉，加入到こ醇-水体系中先浸溃，浸溃后回流；其中こ醇-水体系中こ醇浓度为30%，其余为水，浸溃时间8小吋，回流提取温度为80°C，共提取两次(第一次提取完成后收取提取液，然后再加入与第一次提取相同的こ醇-水溶液在相同条件下提取)，每次2小时，こ醇-水体系用量为8000ml，即こ醇-水体系飞天蜈蚣七=lg/8ml ;提取完成后，合并提取液，减压回收こ醇，浓缩至相对密度I. 06至I. 10 (60°C测)，得到浓缩液2000ml ；加浓缩液量一半量水1000ml，搅拌均匀，静止24小时，抽滤；滤液上D-101树脂柱，先用水洗脱至无色，洗脱液弃去，再用こ醇溶液梯度洗脱，洗脱梯度为50% 80% (体积浓度计)，洗脱的流速为0. 5ml/min,时间为4小吋，50%こ醇洗脱液弃去，合并60%、70%、80%梯度洗脱液；合并洗脱液回收こ醇，浓缩至相对密度I. 06-1. 10 (60°C測)；喷雾干燥或真空干燥采用喷雾干燥则进风温度为160_180°C,出风温度为70-1000C，雾化器转速为80转/秒至200转/秒；若采用真空干燥，则真空度为0. 09Mpa,温度为60°C干燥20-40小时；得药物干燥粉170克；取药物干燥粉，加水适量溶解均匀后加こ酸こ酯一半量900ml萃取，萃取三次(毎次加入量为900ml)，合并こ酸こ酯萃取液，进行减压浓缩，浓缩温度为50°C，真空度为0. 09Mpa,浓缩至溶液相对密度0. 90-0. 95 (50°C測)，浓缩液进行真空干燥真空度为 0. 09Mpa，温度为60°C干燥10-20小时；即得中草药提取物惚白皮总皂苷80克。惚白皮总皂苷抗肿瘤疾病方面有效成分为皂苷类，含齐墩果酸和糖生成的皂甙。用紫外分光光度法以齐墩果酸-3-0-0- D -吡喃葡萄糖醛酸苷为对照，分光光度检测结果如图I所示，可以根据图中所示曲线进行计算，或者重新测定标准曲线(检测波长为238nm);提取物中测定惚白皮总皂苷以齐墩果酸-3-0-0- D -吡喃葡萄糖醛酸苷计不得少于30%。实施例2惚白皮总皂苷的制备方法，包括以下步骤取选好的飞天蜈蚣七1000克分别经过冲洗、干燥后粉碎成粗粉，加入到こ醇-水体系中先浸溃，浸溃后回流；其中こ醇-水体系中こ醇浓度为50%，其余为水，浸溃时间10小吋，回流提取温度为85°C，共提取两次，每次I. 5小吋，こ醇-水体系用量为6000ml，即こ醇-水体系飞天蜈蚣七=lg/6ml ;提取完成后，合并提取液，减压回收こ醇，浓缩至相对密度I. 06至I. 10 (60°C测)，得到浓缩液2000ml本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种楤白皮总皂苷，其特征在于，是从楤木的根皮当中提取得到的，其提取为：楤木的根皮经乙醇？水溶液浸渍后加热回流提取，提取液上样于大孔吸附树脂，用水洗脱至流出液无色后再用乙醇？水溶液梯度洗脱，收集洗脱馏分后回收乙醇，然后用乙酸乙酯萃取，将乙酸乙酯萃取液干燥后得到楤白皮总皂苷。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：肖志强，杨建刚，封卫毅，倪亚会，郭晨，孟祥海，
申请(专利权)人：陕西新药技术开发中心，
类型：发明
国别省市：