一种两步法制备无患子皂苷的方法技术

一种两步法制备无患子皂苷的方法，涉及无患子皂苷。大孔树脂吸附分离；泡沫分离，得无患子皂苷。采用大孔树脂与泡沫分离两步法提取分离高纯度无患子皂苷，并设计出一种操作简单、能快速检测无患子总皂苷的方法，为无患子皂苷的质量控制提供基础，推进无患子皂苷提取分离工业化应用的研究。无患子皂苷由亲油性的苷元部分和亲水的糖基构成。其亲油性苷元部分又使其能被吸附树脂吸附，进行第一步分离。无患子皂苷又为一种天然表面活性剂，具有表面活性，是泡沫分离的必要条件，其在气流鼓泡作用下产生泡沫，第二步通过泡沫分离与其他杂质分离精制制得高纯度无患子皂苷品。

【技术实现步骤摘要】
一种两步法制备无患子皂苷的方法
本专利技术涉及无患子皂苷，尤其是涉及一种两步法制备无患子皂苷的方法。
技术介绍
无患子皂苷主要包括以长春藤皂苷元为基本骨架的三萜皂苷及部分倍半萜糖苷。它们是一种天然的非离子型表面活性剂，具有抗菌、杀菌、消炎、发泡和较强的去污能力，可用作洗涤剂。无患子的分离纯化是其开发利用的基础，目前提取分离方法有大孔树脂分离法、萃取法和超滤法等。魏凤玉等([1]魏凤玉,余锦城,解辉.天然无患子皂苷的提取分离[J].安徽化工,2007,33(3):15-17)采用水提-大孔树脂吸附分离法及超滤法对无患子皂苷进行分离纯化，总皂苷纯度可分别达85％和67％。但是该方法的溶剂消耗量大，操作周期长。泡沫分离是以气泡为介质，利用组分的表面活性差进行分离的一种方法。通过鼓泡使溶质选择性地聚集在气-液界面，并借助浮力上升至溶液主体上方形成泡沫层，从而达到富集皂苷的过程([2]YanJ,WuZ,ZhaoY,etal.Separationofteasaponinbytwo-stagefoamfractionation[J].SeparationandPurificationTechnology,2011,80(2):300-305)。近年来，在分离人参皂苷、三七皂苷和文冠果果皮等天然类皂苷中取得了较好的成效。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对市面上无无患子质控品售卖，无患子总皂苷检测方法缺失及实际应用研究少的问题，提供一种两步法制备无患子皂苷的方法。本专利技术包括以下步骤：1)大孔树脂吸附分离(一次大孔树脂分离)；在步骤1)中，所述大孔树脂吸附分离的具体方法可为：以无患子果皮为原料，粉碎，醇提，合并无患子提取液，喷雾干燥，得到无患子皂苷粗粉末，再定容，超声后上树脂柱，水洗除糖，醇洗除去杂质，再醇洗收集皂苷，旋转蒸发，挥干溶剂后，得到皂苷粗粉末。所述醇提可醇提2～3次；所述超声的时间可为15min；所述树脂柱可采用D101树脂柱；所述水洗除糖可采用去离子水；所述醇洗可采用质量百分浓度为20％的乙醇；所述再醇洗可采用质量百分浓度为70％的乙醇。2)泡沫分离，得无患子皂苷。在步骤2)中，所述泡沫分离的具体方法可为：树脂产品粉末配制水溶液，从底端装有砂芯(作为气体分布器)的层析柱的上方原料液进口进样，空气经空气泵进入空气流量计，再进入缓冲瓶和增湿瓶后，通过层析柱底端的空气进口，然后经过层析柱底端的砂芯，分散成气泡通过层析柱底的无患子皂苷粗提液，泡沫溢出后进入外层由下到上再从蒸馏管顶端的泡沫液进口通入60℃循环热水的直型蒸馏管，加速泡沫破裂，收集其底端泡沫液，待消泡后测溶液的体积，用分光光度法检测泡沫液中无患子皂苷含量，挥干溶剂后测固含量浓度，计算其纯度。所述进样可分三次进样；所述空气的气速可为2min/L。所述层析柱的内径可为25mm，高可为300mm；所述蒸馏管的内径可为35mm，高为600mm。本专利技术采用大孔树脂与泡沫分离两步法提取分离高纯度无患子皂苷，并设计出一种操作简单、能快速检测无患子总皂苷的方法，为无患子皂苷的质量控制提供基础，推进无患子皂苷提取分离工业化应用的研究。本专利技术的工作原理是：无患子皂苷由亲油性的苷元部分和亲水的糖基构成。其亲油性苷元部分又使其能被吸附树脂吸附，进行第一步分离。无患子皂苷又为一种天然表面活性剂，具有表面活性，是泡沫分离的必要条件，其在气流鼓泡作用下产生泡沫，第二步通过泡沫分离与其他杂质分离精制制得高纯度无患子皂苷品。附图说明图1为泡沫分离装置结构示意图。图2为本专利技术实施例制备的无患子皂苷样品图。图3为本专利技术实施例制备的无患子皂苷ESI-MS色谱图。具体实施方式实施例11)大孔树脂吸附分离(一次大孔树脂分离)以无患子果皮为原料，粉碎，醇提2～3次，合并无患子提取液，喷雾干燥，得到无患子皂苷粗粉末。准确称取0.5001g样品粉末，去离子水定容至100ml，超声15min，上D101树脂柱，用去离子水300ml水洗除糖，20％醇洗100ml除其他杂质，70％醇洗100ml收集皂苷，旋转蒸发，挥干溶剂后，收到皂苷粗粉末。70％醇洗可采用2次，2次70％醇洗均取0.5ml和0.1ml用紫外分光光度计分别测皂苷及总糖吸光度值，代入各自关系式中：吸光度值(A)与齐墩果酸标准溶液浓度(C)的关系式为A＝48.9228C+0.0353，相关系数R＝0.9995。吸光度值(A)与总糖标准溶液浓度(C)的关系式为A＝25.525C+0.0186，相关系数R＝0.9900。70％醇洗中皂苷浓度1.533mg/ml，皂苷含量＝0.01022g，固含量＝0.0495g，纯度＝20.64％。大孔树脂各阶段无患子皂苷浓度参见表1。表12)泡沫分离，得无患子皂苷(参见图1)。所述泡沫分离的具体方法可为：树脂产品粉末配制水溶液，从底端装有砂芯11(作为气体分布器)的层析柱1的上方原料液进口13进样，空气经空气泵3进入空气流量计4，再进入缓冲瓶5和增湿瓶6后，通过层析柱1底端的空气进口12，然后经过层析柱1底端的砂芯11，分散成气泡通过层析柱底的无患子皂苷粗提液，泡沫溢出后进入外层由下到上再从蒸馏管2顶端的泡沫液进口21通入60℃循环热水的直型蒸馏管2，加速泡沫破裂，收集其底端泡沫液，待消泡后测溶液的体积，用分光光度法检测泡沫液中无患子皂苷含量，挥干溶剂后测固含量浓度，计算其纯度。该产品最终无患子皂苷纯度为92％。所述进样可分三次进样；所述空气的气速可为2min/L。所述层析柱的内径可为25mm，高可为300mm；所述蒸馏管的内径可为35mm，高为600mm。在图1中，标记22为泡沫液出口，23为泡沫液接收器，24为热水出口，25为热水入口。实施例21)大孔树脂吸附分离(两次大孔树脂分离)以无患子果皮为原料，粉碎，醇提2～3次，合并无患子提取液，喷雾干燥，得到无患子皂苷粗粉末。准确称取1.0g样品粉末，去离子水定容至250ml，超声15min，上D101树脂柱，用去离子水300ml水洗除糖,20％醇洗100ml除其他杂质，70％醇洗100ml收集皂苷，旋转蒸发，挥干溶剂后，丙酮沉降，离心，挥干丙酮，加去离子水溶解，用饱和水正丁醇萃取三次，取有机层挥干溶剂后，配制20mg/mL无患子皂苷水溶液，以1mL/min速度上D101大孔树脂，3BV去离子水洗后用1BV的70％乙醇洗脱，挥干溶剂收集粉末，皂苷均取0.1ml测吸光度，并测固含量，D101树脂对无患子皂苷的饱和吸附量达481.57mg/mL，纯度约35.51％。2)泡沫分离树脂产品粉末配制0.2mg/mL水溶液，从底端装有层析柱的上方进样，分三次进料，共100mL，空气气速2min/L，经空气泵进入空气流量计，进入一个缓冲瓶和增湿瓶后，通过层析柱底端的砂芯，分散成气泡通过柱底的无患子皂苷粗提液，泡沫溢出后进入外层由下到上通入60℃循环热水的直型蒸馏，加速泡沫破裂，待消泡后测溶液的体积，用分光光度法检测泡沫液中无患子皂苷含量，挥干溶剂后测固含量浓度，计算求其纯度。实验装置见说明书图1。泡沫分离无患子皂苷收率19.68％，富集比1.96，纯度92.92％。为了判断质控品的成分，选择正离子模式进行无患子皂苷的ESI-MS检测，图中出现各皂苷的【M+Na】+准分子离本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种两步法制备无患子皂苷的方法，其特征在于包括以下步骤：1)大孔树脂吸附分离；2)泡沫分离，得无患子皂苷。

【技术特征摘要】
1.一种两步法制备无患子皂苷的方法，其特征在于包括以下步骤：1)大孔树脂吸附分离；2)泡沫分离，得无患子皂苷。2.如权利要求1所述一种两步法制备无患子皂苷的方法，其特征在于在步骤1)中所述大孔树脂吸附分离的具体方法为：以无患子果皮为原料，粉碎，醇提，合并无患子提取液，喷雾干燥，得到无患子皂苷粗粉末，再定容，超声后上树脂柱，水洗除糖，醇洗除去杂质，再醇洗收集皂苷，旋转蒸发，挥干溶剂后，得到皂苷粗粉末。3.如权利要求2所述一种两步法制备无患子皂苷的方法，其特征在于所述醇提是醇提2～3次。4.如权利要求2所述一种两步法制备无患子皂苷的方法，其特征在于所述超声的时间为15min。5.如权利要求2所述一种两步法制备无患子皂苷的方法，其特征在于所述树脂柱采用D101树脂柱。6.如权利要求2所述一种两步法制备无患子皂苷的方法，其特征在于所述水洗除糖采用去离子水；所述醇洗采用质量百分浓度为20％的乙醇；所述再醇洗采用质量百分浓度为70％的乙醇。7.如权...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄加乐，苏曦瑶，王海涛，李清彪，孙道华，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：福建,35