CTLA4蛋白和其用途制造技术

本发明专利技术涉及CTLA4蛋白，以及所述蛋白的用途，例如治疗与免疫反应调节异常相关的疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及CTLA4蛋白、包含CTLA4蛋白的医药组合物、和所述蛋白的治疗用途。
技术介绍
T细胞淋巴细胞通过提供对特定病原体的适应性反应而在细胞介导的免疫中起关键作用。T细胞活化取决于至少两种信号传导途径的活化，其中ー种途径为抗原特异性，另ー种途径为抗原非特异性。T辅助细胞抗原性反应需要通过T细胞受体与在抗原呈递细胞(APC)表面上的MHC(主要组织相容性复合体)所结合的抗原结合而活化第一信号传导途径。抗原性反应还需要通过T细胞表面上的⑶28蛋白与APC表面上的⑶80(B7-1)及CD86(B7-2)结合而活化可产生共刺激信号的第二信号传导途径。因为抗原特异性信号不足以产生完全抗原性反应，所以无共刺激的T细胞受体/抗原-MHC结合可导致克隆失活或无反应性(anergy)。(參看例如坚金斯(Jenkins)等人，1993，免疫学新见(Curr.Opin. Immunol. )5:361)。共刺激途径不仅在T细胞活化和分化中起作用，而且在组织迁移和外周耐受性诱导中起作用。(参看萨洛蒙(Salomon)等人，2001，免疫学年评(Ann. Rev.Immunol.) 19:225)。经活化的T细胞还在其细胞表面上表达细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)，CTLA4为以较高亲和カ结合⑶80和⑶86的⑶28同系物。CTLA4表达引起竞争性结合⑶80和CD86、阻断⑶80/86-⑶28相互作用以及终止T细胞活化。因为这些信号传导途径决定T细胞对抗原的反应以及对抗原的下游反应的量值，所以例如通过阻断CD80/CD86与CD28和/或CTLA4之间的ー种或ー种以上相互作用而调节ー种或ー种以上共刺激信号的药剂可有效治疗由细胞介导的免疫反应调节异常所引起的病症。(參看例如穆勒(Mueller)等人，1989,免疫学年评(Annu. Rev. Immunol.) 7:445)。适合破坏⑶80/86-⑶28相互作用的药剂包括抗体和融合蛋白。举例来说，在实验性自身免疫脑脊髄炎(EAE)模型中，使用抗CD80和抗CD86抗体阻断T细胞。(參看拉克(Racke)等人，1995，临床研究杂志(J. Clin. Invest. )96:2195)。在另ー实例中，抗CD80和抗CD86抗体用于阻断2型活体内免疫反应(即由IgG抗体介导且针对细胞表面或基质抗原的免疫反应)和IL-4产生。(格里沃尔德(Greenwald)等人，1997，免疫学杂志(J. Immunol.) 158:4088)已证明⑶28_Ig融合蛋白与树突状细胞上的⑶80和/或⑶86相互作用且使其活化，由此导致在活体内产生增强的T细胞介导免疫反应的可溶性CD28的辅助活性。(奥拉博纳(Orabona)等人，2004，自然免疫学(Nature Immunol.) 5 (11) : 1134)。或者，CTLA4-Ig融合蛋白已用于破坏⑶80/86-⑶28相互作用。(參看例如麦肯泰尔(McIntyre)等人，2005，未来药物(Drugs of the Future)，30:873)。对T细胞活化和共刺激途径的新近研究表明⑶80和⑶86可在免疫反应中，尤其在自身免疫性方面起不同作用。因此，已显示仅阻断⑶80或⑶86之一与⑶28的结合会在活体内产生不同影响，其视所研究的疾病和投药时序而定(參看萨洛蒙(Salomon)，2001，免疫学年评(Annu. Rev. Immunol.) 19:225 ;库齐罗(Kuchroo)等人，1995，细胞(Cell) 80:707 ;拉克(Racke)等人，1995，临床研究杂志(J. Clin. Invest.) 96:2195 ；兰斯乔(Lenschow)等人，1995，实验医学杂志(J. Exp. Med.) 181:1145 ;和格里沃尔德(Greenwald)等人,免疫学杂志(J. Immunol.), 1997 , 158:4088)。当前正在开发结合CTLA4且破坏CTLA4对⑶28介导的T细胞反应的抑制的抗体以用于治疗各种癌症。人类抗CTLA4 IgG1抗体易普利姆玛(Ipilimumab)正处于黑素瘤的III期试验中以及乳癌和前列腺癌的II期试验中。人类抗CTLA4 IgG2抗体曲美利姆玛(Tremelimumab)正处于前列腺癌、膀胱癌和结肠直肠癌的II期试验中。结合⑶80和/或⑶86且破坏与CTLA4和⑶28的相互作用的融合蛋白为用于开发免疫调节剂的良好候选者。融合蛋白允许工程改造例如溶解性、稳定性、可传递性和/或活性改进的蛋白质。一种此类免疫调节剂为可溶性融合蛋白阿巴西普(abatacept) (Orenda )，其经开发用于治疗类风湿性关节炎(RA)和幼年特发性关节炎，攻击关节、导致最終会引起骨侵蚀和关节变形的疼痛膨胀的自身免疫病症。阿巴西普为ー种CTLA4_Ig融合蛋白，其由人类CTLA4的细胞外域以及人类免疫球蛋白G1 (IgG1)的包括铰链、CH2和CH3域的经修饰Fe部分组成。CTLA4域提供结合活性且威信Fe部分提供稳定性、溶解性和可传递性。阿巴西普抑制T细胞上的CD28与APC细胞上的⑶80和/或⑶86蛋白的相互作用，由此导致T细胞活化受抑制。(參看例如史瓦兹(Schwartz), 1992,细胞(Cell) 71:1065)。因此，投与阿巴西普可导致T细胞増殖、活化和信号传导的減少，且减弱类风湿性关节炎中的自身免疫反应。称为贝拉西普(belatacept)的第二代可溶性重组CTLA4-Ig融合蛋白有两个氨基酸与阿巴西普不同且对⑶80和⑶86具有较大结合亲和カ。贝拉西普正处于进行中的用于肾和其它器官移植的III期试验中。(參看林赛(Linsley)等人，2009,免疫学评论(Immunol. Reviews) 229:307-321)。第三种融合蛋白MAXY-4，一种来源于阿巴西普但对CTLA4标靶的结合增加的蛋白质，当前正处于由普塞德治疗剂有限责任公司(Perseid Therapeutics, LLC)和阿斯特拉制药公司(AstellasPharma, Inc.)进行的临床前开发中用于治疗自身免疫疾病和移植排斥反应。使用阿巴西普的疗法可能导致成本过高。阿巴西普的具有较高亲和力的变体可降低所需的有效治疗剂量且因此降低疗法成本。此外，由于为达成有益结果所需的药剂较少，所以显现对药剂自身的免疫原性反应的风险也可降低。其它副作用也可減少。需要提供与CD80和CD86蛋白的结合有差异的改进的融合蛋白，例如通过产生对ー种同功异型物的相对亲和力相对于另ー者较高的变体。所述改进的变体可提供对特定病况或病变的靶向免疫调节。在CTLA4-Ig和抗CTLA4抗体疗法的一些情况下观测到的不良反应、或免疫反应的恶化也可降低。在章节2中或在本申请案的任何其它章节中对任何參考文献的引用或鉴别不应解释为承认所述參考文献可用作本专利技术的现有技木。
技术实现思路
本专利技术涉及能够结合⑶80和/或⑶86且序列与SEQ ID NO: I (图1A)相关的包含CTLA4结合域的蛋白质。在某些方面，本专利技术CTLA4蛋白另外包含为非CTLA4蛋白的融合搭配物，例如免疫球蛋白域。CTLA4具有3个⑶R样环，在本文中称为(以氨基端至羧基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：赤松谦子，罗伯特·B·迪布里吉，大卫·B·鲍尔斯，维罗妮卡·阮，
申请(专利权)人：亚培生物医疗股份有限公司，
类型：
国别省市：