本发明专利技术公开了一种从马铃果种子中检测它波宁的工艺方法，包括以下工艺步骤：(1)、取样及粉碎：多点均匀取样，将马铃果样品混合均匀后粉碎待用。(2)、提取：取粉碎后的马铃果样品3g，加入提取罐中，再加入25ml甲醇，用超声波提取30分钟，静置30分钟并冷却至室温。(3)、液相检测：取步骤(2)中的上清液1ml至10ml容量瓶中，定容至刻度作为供试液；对照液浓度为1mg/ml，分别精密量取对照液和供试液各5ul注入液相色谱仪，记录峰面积按含量计算公式得出供试液含量。本发明专利技术的检测方法所耗原料量少，所需时间短，检测结果准确度高，相对误差小。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，涉及它波宁的检测技术，具体涉及一种从马铃果种子中检测它波宁的工艺方法。
技术介绍
马铃果(Voacanga)是一种非洲植物，从其种子中可以分离出一种生物碱，名为它勃宁(tabersonine)，又称柳叶水甘草碱。研究表明，它勃宁有降血压、抗肿瘤作用，以及用于中风后遗症、缺血性高血压脑病、脑血管病引起的抑郁、焦虑不安、情绪不稳，适于早衰性脑退化的症状消除，如眩晕、头痛、记忆力减退、注意力不集中、失语、梅尼埃综合征等，也可用于视网膜出血、神经性心动过速和其他植物神经功能紊乱等。现有技术中一般采用加热回流提取技术检测马铃果中它波宁的含量，包括马铃 果取样粉碎、提取、浓缩、结晶、抽滤、烘干等几个步骤，此方法取样阶段原料用量通常需要IOOg左右，原料用量大，步骤较多，检测时间太长，不利于特定情况下对马铃果它波宁的快速检测要求。
技术实现思路
本专利技术提供一种所耗原料量小，检测时间短，检测结果准确度高的马铃果它波宁快速检测技术。本专利技术的技术方案一种马铃果它波宁快速检测技术，包括以下工艺步骤(I)、取样及粉碎多点均匀取样，将马铃果样品混合均匀后粉碎待用。(2)、提取取粉碎后的马铃果样品3g，加入提取罐中，再加入25ml甲醇，用超声波提取30分钟，静置30分钟并冷却至室温。(3)、液相检测取步骤(2)中的上清液Iml至IOml容量瓶中，定容至刻度作为供试液；对照液浓度为lmg/ml，分别精密量取对照液和供试液各5ul注入液相色谱仪，记录峰面积按含量计算公式得出供试液含量。步骤(I)中粉碎要求为40目。步骤(2)中超声波提取时间为30分钟。步骤(3)中检测时的进样量为5ul，流速为lml/min，检测波长为245nm，检测时的流动相为甲醇乙腈=8:2。本专利技术的技术效果所耗原料量少，所需时间短，检测结果准确度高，相对误差小。以下提供一些实验数据及对比数据现有技术常规的马铃果它波宁检测方法如下取样及粉碎多点均匀取样，再将样品混合均匀后粉碎待用。提取精密称取粉碎好的马玲果粉末IOOg置于圆底烧瓶中，再加入500ml溶剂油在60°C下回流提取四次，每次提取2小时。浓缩将四次提取液抽滤后浓缩至无液体流出为止，倾入250ml烧杯中。结晶将盐酸和溶剂油按1:5的比例调配好后，用滴管向装有浓缩液的烧杯中慢慢加入，边加边用玻璃棒快速搅拌，直到晶体析完为止，放置一小会儿。抽滤将有晶体析出的浓缩液抽滤至干，上层为粉末它波宁，下层母液继续析晶，直到将它波宁析完为止。烘干将抽滤出的它波宁放烤箱里烘干，并称重，即得粗品。对比实验取同一批马铃果，混合均匀后，平均分成6份，分别编为A、B、C、D、E、F，其中A、B、C用常规检测法检测，D、E、F用快速检测法检测。 两种方法的检测结果如下表 —规检测法停速检测__ A B C —..........................PEF 原料消耗量 ioof IOOg — IOOg ^3g 3g 3g 检测所需时 i jI1 IOh IOh IOh 2h 2h 2h IHJ_______ 它波宁含量 I 1.66% 1.7% 1.64% I 1.72% 1.70% [ 1.71%本专利技术快速检测法的验证性实验(一)、稳定性试验I、实验目的检测在常温条件下，溶剂甲醇对它波宁含量的影响。2、实验方法提取将马铃果粉碎，称取3g，加入提取罐中，再加入25ml甲醇，用超声波提取30分钟，静置并冷却至室温(约0. 5小时)，作为供试品，待取样。液相检测取上清液Iml至IOml容量瓶中，定容至刻度作为供试品，对照液浓度为lmg/ml，分别精密量取对照液和供试品各5ul注入液相色谱仪。记录峰面积按含量计算公式得供试品含量。再每隔一个小时取步骤一中的供试品，及I. 5h、2. 5h、3. 5h、4. 5h、5. 5h分别取样重复步骤二的操作。3、实验结果及结论(I)、实验结果如下表—重量峰面积含量—^标样 0. Olg 8740197 100%~0. 5h 3.07g 1680038 I. 706%~1. 5h 3.07g 1679823 I. 706%~2. 5h 3.07g 1685472 I. 712%~3. 5h 3.07g 1676543 I. 703%~4. 5h 3.07g 1683682 I. 71%~5. 5h 3.07g 1678864 I. 705%(2)、实验结论通过结果可以看出，在常温下，溶剂甲醇对它波宁含量无影响。(二 )、重现性实验I、实验方法提取取一定量的已知含量的马铃果，混匀后，分成3份，分别标为A，B，C，并将其粉碎，称取3g，加入提取罐中，再加入25ml甲醇，用超声波提取30分钟，静置并冷却至室温。液相检测分别取A，B，C样的上清液Iml至IOml容量瓶中，定容至刻度作为供试品，对照液浓度为lmg/ml，分别精密量取对照液和供试品各5ul注入液相色谱仪。记录峰面积按含量计算公式得供试品含量。2、结果及结论(I)、实验结果如下表本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种马铃果它波宁快速检测技术，其特征在于包括以下工艺步骤 (1)、取样及粉碎多点均匀取样，将马铃果样品混合均匀后粉碎待用。(2)、提取取粉碎后的马铃果样品3g，加入提取罐中，再加入25ml甲醇，用超声波提取30分钟，静置30分钟并冷却至室温。(3)、液相检测取步骤⑵中的上清液Iml至IOml容量瓶中，定容至刻度作为供试液；对照液浓度为lmg/ml，分别精密量取对照液和供试液各5ul注入液相色谱仪，记录峰面积按含量计算公式得出供试液含量。2.根据权利要求I所述的马铃果它波宁快速检测技术，其特征在于步骤(I)中粉...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗庆林，
申请(专利权)人：重庆恒星生物技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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