本发明专利技术属于分析检测技术领域，公开了采用以离子液体作为添加剂，在反向电压下利用微乳毛细管电动色谱法测定化妆品中糖皮质激素(氢化可的松，泼尼松，醋酸氢化可的松)的方法。该方法采用IL-MEEKC对化妆品的提取液进行分析检测，获得氢化可的松，泼尼松，醋酸氢化可的松的电泳谱图，根据校正曲线方程可以计算出三个物质的浓度。本发明专利技术能够同时分析检测化妆品中氢化可的松、泼尼松、醋酸氢化可的松的浓度。方法简单、快速和高效；所用的缓冲液主要是水溶液，无需大量使用有机溶剂，污染小，环境友好；所需溶剂和样品用量小，使用的空心毛细管柱价格便宜，分析成本低。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析检测
，公开了采用以离子液体作为添加剂在反向电压下，利用微乳毛细管电动色谱法测定化妆品中糖皮质激素的方法。
技术介绍
糖皮质激素(Corticosteroids),是由肾上腺皮质分泌的一类留体激素,具有调节糖、脂肪和蛋白质的生物合成和代谢的作用，有重要的生理活性，如抗炎及抗过敏，降低毛细血管壁和细胞膜的通透性，减少炎性渗出等作用。在一些化妆品中添加少量糖皮质激素能增加抗过敏的疗效并能提高皮肤的嫩白程度，长期使用该类物质易使皮肤产生激素依赖症。短时间使用激素可使皮肤保湿，恢复弹性，减少皱纹或治疗粉刺，促进毛发生长。但长期使用含有激素的化妆品会导致很多副作用，如皮肤长期接触糖皮质激素易导致皮肤变薄、发红、发痒，出现血糖升高、高血压、骨质疏松、胎儿畸形、免疫功能下降等现象。皮肤长期接触有些激素甚至能引发细胞癌、乳腺癌、卵巢癌等疾病。我国的化妆品规范中规定化妆品中不得添加激素类物质。这就需要高效快速的方法来检测其含量，这对于化妆品的质量控制有重要意义。关于糖皮质激素的测定方法有高效液相色谱法、LC-MS, GC-MS、毛细管电动色谱法和薄层色谱法等。其中高效液相色谱是最常用的方法，但是该方法需要比较复杂的样品预处理过程去除基质，且液相色谱仪及液相色谱柱价格昂贵，仪器的运行成本也比较高。因而有必要建立一种简单、快速、灵敏度高且成本低的检测方法。离子液体(ILs)是一种新型的绿色溶剂，由特定阳离子和阴离子构成，在室温或近于室温下呈液态的熔盐体系，可以和有机溶剂、水混溶或不溶形成两相或多相反应体系。作为一类新型的绿色溶剂，离子液体具有非常广泛的应用前景。离子液体良好的热稳定性、化学稳定性和溶解性使其非常适合用作色谱固定相，既可以用来分离极性物质，也可以用来分离非极性物质。在毛细管电动色谱方法中也常利用离子液体作为添加剂来改善分离度。
技术实现思路
为了解决上述现有技术的不足之处，本专利技术的首要目的在于提供一种以离子液体作为添加剂，利用反向微乳毛细管电泳(MEEKC)法测定化妆品中三种结构相似的糖皮质激素(氢化可的松，泼尼松，醋酸氢化可的松)的方法，该方法样品处理简单、样品用量少、方法经济快速、具有优良的分离度和灵敏度高等优点。本专利技术的目的通过下列的技术方案实现以离子液体作为添加剂，在反向电压下，利用合适的微乳体系同时分离分析三种糖皮质激素，达到同时检测的目的。该方法的检测步骤如下(I)精密称取氢化可的松，醋酸氢化可的松，泼尼松各14. Omg, 17. Omg, 16. Omg,置于10. OOmL容量瓶中，加甲醇超声溶解后，冷却至室温，再加甲醇稀释至刻度，摇匀后即得。避光4°C保存。使用时根据需要稀释成不同浓度的标准液。(2)在反向电压下利用经典的微乳体系，以磷酸二氢钠(pH. 2. 2)作为缓冲液，在低电渗流条件下用微乳毛细管电动色谱法(MEEKC)分离分析三个物质。再以离子液体作为添加剂的微乳毛细管电动色谱法(IL-MEEKC)分离分析三个激素，得到标准谱图。(3)采用离子液体作为添加剂的微乳毛细管电动色谱法，在最佳检测条件下，对样品的提取液进行分析，获得样品的毛细管电泳图。(4)根据氢化可的松，醋酸氢化 可的松，泼尼松的校正曲线方程，计算出步骤(3)中化妆品样品中的氢化可的松，醋酸氢化可的松，泼尼松含量。所述最佳检测条件为微乳液的组成为SDS 2.4% (界/界)，正丁醇6.6% (w/w)，正辛烷0. 5 % (w/w),35mmol/L I-甲基-3-正丁基四氟化硼(BMM-BF4)，20mmoI/L磷酸二氢钠缓冲液(pH =2.2)。微乳毛细管电动色谱条件采用低pH条件有效地抑制了电渗流，建立起低电渗流体系。在分析中采用的运行条件为在反相电压条件下，以含离子液体BMIM-BF4的微乳液作为运行液，运行电压_20kV(检测端位于正电压一端)，运行温度20°C，检测波长250nm。步骤(3)中化妆品样品预处理过程按照以下步骤进行称取2. OOOg化妆品，力口A 25. OOmL甲醇，超声助溶30min，过滤定容于50. OOmL。所有溶液进入毛细管前均经过0. 45um过滤膜过滤，经超声脱气后使用。对毛细管进行如下处理毛细管在使用时，分别用0. lmol/LHCl、超纯水、0. Imol/LNaOH、超纯水、运行缓冲液冲洗lOmin。两次MEEKC样品分析运行期间，分别用0. lmol/L NaOH、超纯水、运行缓冲液冲洗5min，以获得良好的分离检测重现性。在最佳的检测条件下，氢化可的松，醋酸氢化可的松，泼尼松在9分钟内达到基线分离，显示了良好的分离选择性和灵敏度。三个物质在该方法的线性范围分别为5-400 y g/mL、5-400 u g/mL 和 5-800 u g/mL,检出限为 0. 9 y g/mL、0. 9 u g/mL 和 I. 2 y g/mL (S/N = 3)，迁移时间和峰面积的相对标准偏差(RSD)分别小于4. 8%和3. I %。本专利技术相对于现有技术，具有如下的优点及有益效果(I)本专利技术为化妆品的质量控制提供技术支持，检测快速；(2)环境友好，经济环保，所用的缓冲液多为水相，无需消耗大量的有机溶剂，比液相色谱更环保，更有利于检测者的身体健康；(3)分析成本低，所需样品和溶剂都很少，检测一个样品消耗的缓冲溶液不到lmL，且不需要特殊的色谱柱，仅使用普通的空心毛细管柱，价格比一般的色谱柱要低好几倍，使用方便；附图说明图I为标准品混合液的微乳毛细管电动色谱图，其中I为氢化可的松和泼尼松，2为醋酸氢化可的松。图2为标准品的混合液的图离子液体微乳毛细管电动色谱图，其中I为氢化可的松，2为泼尼松，3为醋酸氢化可的松。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。所需的仪器装置为CAPEL105高效毛细管电泳系统，配有紫外检测器；未涂层石英毛细管(0 75iimX65cm，有效长度50cm)。所需试剂氢化可的松，醋酸氢化可的松，泼尼松标准品，十二烷基硫酸钠(SDS)，磷酸二氢钠(NaH2PO4)，I-甲基-3-正丁基 四氟化硼(BMM-BF4)，磷酸，乙腈，甲醇，0. lmol/L HCl，0. lmol/L NaOH,超纯水,所用缓冲液及样品溶液均经过0. 45 y m过滤膜过滤后使用。I)最佳检测条件的确定(I)微乳运行液的配制用超纯水分别配制浓度为120mmoI/LNaH2PO4和100mmol/L I-甲基_3_正丁基四氟化硼(BMM-BF4)母液。a.利用浓度为 120mmol/L NaH2POjP IOOmmoI/L BMM-BF4母液，配制 SDS分别为质量比 6. 6%，3. 3%，3. 0%，2. 8%，2. 4% 的 15mmol/L 磷酸二氢钠(pH = 2. 2)-正丁醇 6. 6%(w/w)_正辛烷0. 5% (w/w)MEEKC缓冲液。用5mmol/L氢氧化钠和磷酸调节pH为2. 2。超声30min即得不同浓度的透明稳定的微乳溶液。b.利用浓度为 120mmol/L NaH2POjP IOOmmoI/L BMM-BF4母液，配制 SDS分别为质量比 6. 6%，3. 3%，3. 0%，2. 8%，2. 4% 的 15mmol/L 本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种以离子液体作为添加剂的反向微乳毛细管电动色谱同时分析化妆品中的三种糖皮质激素的方法， 其特征在于包括如下步骤 (1)准确称取氢化可的松，醋酸氢化可的松，泼尼松各14.Omg, 17. Omg, 16. Omg,置于.10.OOmL容量瓶中，加甲醇超声溶解后，冷却至室温，再加甲醇稀释至刻度，摇匀后即得。避光4°C保存。制成待测标准品混合液，使用时根据需要稀释成不同浓度的标准液。在普通MEEKC和IL-MEEKC模式下，在最佳检测条件下，对氢化可的松，醋酸氢化可的松，泼尼松标准品进行毛细管电泳分析。得到标准谱图。(2)采用IL-MEEKC方法在最佳检测条件下，对样品的空白提取液和加标提取液进行分析。(3)根据氢化可的松，醋酸氢化可的松，泼尼松的校正曲线方程，计算出步骤(2)中不同加标样品中氢化可的松，醋酸氢化可的松，泼尼松的回收率。所述最佳检测条件为 微乳液的组成为=SDS 2.4% ( / )，正丁醇6.6% (w/w)，正辛烷 0. 5% (w/w), 35mmol/L I-甲基-3-正丁基四氟化硼(BMM-BF4)，20mmol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH = 2. 2)。进样压力为3kPa，进样时间15s，运行电压_20kV(检测端位于正电压一端)，运行温度20°C，检测波长250nm。根据权利要求I所述的一种同时分离分析化妆品中的氢化可的松，醋酸氢化可的松，泼尼松的方法，其特征在于步骤(2)化妆品中的氢化可的松，醋酸氢化可的松，泼尼松的样品预处理过程按照以...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈新，刘瑛，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：
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