本发明专利技术涉及一种鸭瘟卵黄抗体冻干粉，包括以下重量百分数的各组分：鸭瘟卵黄抗体87-90%、辛酸0.8-1.0%、甲醛0.2-0.3%、硫柳汞0.01-0.02%、3-4%葡萄糖、1-2%山梨醇、2-3%甘氨酸、2-3%甘露醇。该冻干粉保存时间长、溶解快、抗体效价高、生物活性良好，本产品的抗体纯度高于市场现在产品。本发明专利技术同时公开了一种鸭瘟卵黄抗体冻干粉的制备方法，包括以下步骤：分离毒株制备疫苗，免疫健康鸭群制得高免蛋，将高免蛋经过消毒、酸化处理、辛酸处理、精制提取净化处理、配制、冻干等得到鸭瘟高免卵黄抗体冻干粉。本发明专利技术制备方法中在酸化水处理时应用了巴氏消毒的温度加热卵黄液，不仅达到消毒的作用同时可以提高抗体的回收率和酸化处理时溶液的澄清度，制得的卵黄抗体的优势特征过生物活性高、抗体保存时间、效价降低速度减缓等优点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于禽类用生物制品
，尤其是。
技术介绍
鸭痕(Duckplape)又名鸭病毒性肠炎(Duck virus enteritis, DVE),是鸭、鹅和其他雁形目禽类的一种急性、热性、败血性传染病。该病的特征是流行广泛，传播迅速，发病率和死亡率都高。早在1923年Baudet氏在荷兰首次发现本病，直到1940年Bos氏首次提出鸭瘟的名称，并确认是一种不同于鸡瘟的新病毒病。以后在欧、美各国均有本病发生的报道。鸭瘟在我国流行的正式报道是黄引贤1957年在广东首先提出的，随后武汉、上海、浙江、江苏、广西、湖南和福建等地陆续发现，至80年代传播到东北各省。1957年以来，本病广泛流行于我国华南、华中、华东养鸭业较发达地区，造成很大的经济损失。因此，1963年全国农业科学规划会议将防制鸭瘟作为重点课题，其后许多单位进行了大量的防治研究工作，并成功地研制了各类预防用疫苗，从而有效地控制了本病的发生和流行，有力地保障了养鸭业的发展。鸭瘟病是养鸭业中常见的疾病，容易大范围内爆发从而造成严重的经济损失。主要防治方法包括抗病毒药、中西药及制剂、卵黄抗体及其他生物制剂等，其中卵黄抗体是最有效的治疗鸭发生病毒病的方法。卵黄抗体IgY是的一种免疫球蛋白Ig，IgY在功能上相当于哺乳动物IgG，但结构上有所不同，具有典型的的免疫球蛋白的空间构象。卵黄抗体具有很多优越性。(I)由于鸟类与哺乳类动物种系发生学的差距，鸟类更适于生产抗哺乳动物抗原的特异性抗体。卵黄抗体不会激发补体系统，不与抗哺乳动物抗原的抗体发生反应，不与哺乳动物和细菌的Fe 受体结合，这在免疫诊断中具有重要意义。(2)卵黄抗体作为一种具有生物活性的免疫球蛋白，在贮存、生产、加工、摄食及消化过程中保证其稳定性是非常关键的。多项试验表明，IgY 具有较好的稳定性，耐酸、耐碱、耐热。卵黄抗体较易保存，4°C条件下存放5年或室温条件下存放6个月对抗体活性无明显影响。(3)卵黄抗体量大，成本低，便于规模化生产。卵黄中抗体浓度能长期维持在相当于甚至超过血清抗体浓度的水平上。I只产蛋(以平均每周产蛋5-6枚,平均每枚蛋蛋黄大约15mL计算)所产蛋生产的抗体量相当于90_100mL血清或 180-200mL血液中抗体的量，例如I只兔子I个月可提取IgG约200mg，而I个月I只蛋可从蛋中提取IgY 2000mg以上。此外，在实际生产中，动物的采血不仅对动物本身是极大的应激，而且费时、费工，大规模生产是不切实际的，而利用蛋生产抗体要方便的多。总的来讲， 卵黄抗体对动物没有毒副作用，用高免卵黄抗体治疗动物疾病不但避免了高免血清价格昂贵、产量低的缺点，而且可以避免高免血清在治疗过程中引起的副作用，是一种很有前途的新型免疫球蛋白制剂。因此，卵黄抗体在禽畜疾病诊断、治疗和预防的应用越来越多。目前卵黄抗体的制备及生产工艺已经成熟，可以保质保量的生产
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种鸭瘟卵黄抗体冻干粉，该冻干粉的优点是干粉保存时间长、溶解快、抗体效价高、生物活性良好，本产品的抗体纯度高于市场现在产品。本专利技术的目的在于提供一种鸭瘟卵黄抗体冻干粉的制备方法。为了实现以上目的，本专利技术所采用的技术方案是一种鸭瘟卵黄抗体冻干粉，包括以下重量百分数的各组分鸭瘟卵黄抗体 86-91%、辛酸 O. 8-1. 0%、甲醛O. 2-0. 3%、硫柳汞 O. 01-0. 02%、3_4%葡萄糖、1-2% 山梨醇、2-3% 甘氨酸、2-3%甘露醇。本专利技术的技术方案还采用了一种所述鸭瘟卵黄抗体冻干粉的制备方法，包括以下步骤分离毒株制备疫苗，免疫健康鸭群制得高免蛋，将高免蛋经过消毒、酸化处理、辛酸处理、精制提取净化处理、配制、冻干得到鸭瘟高免卵黄抗体冻干粉。所述鸭瘟卵黄抗体冻干粉的制备方法，具体步骤为I)分离毒株制备疫苗本次病毒样品主要从福建采集鸭瘟样品，经过无菌采集临床上发病症状明显的病例，将采集的样品研磨，经过3次冻融，15000rpm/min高速离心留取上清液，将上清液接种于鸡胚囊中传代方式得到病毒株FJ株，根据GenBank登录号为 EF643557公布UL28基因序列设计引物，扩增产物经胶回收纯化后，连接至PMD18-T载体并转化感受细胞DH5 α，测序，得到克隆完整UL28基因序列2415bp ；2)免疫健康鸭群制得蛋免疫接种鸭瘟灭活疫苗I. 5mL (含毒103 2ELD5(l/0. 1M1)， 第一次免疫健康鸭群使用鸭瘟灭活疫苗，每次免疫间隔7天时间，以后免疫加I倍量,免疫三次，第二次免疫后开始检测抗体效价，使抗体效价达到I :256时，开始收集蛋，收集的蛋进行清理、消毒，晾干备用；3)水稀释法酸化处理分离高免蛋卵黄，加入等体积的无菌水，搅拌混匀至颜色发白，得到卵黄溶液；将卵黄溶液放入60-65 V水浴锅内均匀加热30min，然后加入pH为4.9-5. 2的、温度为4-6°C的酸化水溶液，加入量为卵黄溶液体积的6倍，混匀，静置沉淀，取上清液，离心20min, 15000rpm/min,留上清液；4)辛酸处理；向步骤3)上清液中加入辛酸，加入量为溶液体积的O. 8-1. 0%，混匀， 静置，弃去杂质漂浮物，离心10min，20000rpm/min，留取上清液，静置；5)用O. 45 μ m的滤膜对步骤4)所得上清液过滤，再采用截流分子量大于30KD (的滤膜孔径进行超滤浓缩，使500mL/500羽份的卵黄抗体液浓缩至2. 5mL/500羽份为止。6)向步骤5)所得卵黄溶液加入甲醛、硫柳汞防腐，甲醛的加入量为O. 2-0. 3%，硫柳汞为 O. 01-0. 02% ；7)再加入辅料3-4%葡萄糖、1-2%山梨醇、2-3%甘氨酸、2-3%甘露醇；8)预冻将浓缩后的卵黄抗体液放置-80°c，充分冷冻。9)将步骤8)所得卵黄抗体溶液冻干，冻干曲线程序是-40°C开始升华，2h后升到_35°C保持14h。本专利技术免疫采用是健康的鸭作为免疫对象，这可以增加针对性，可以使抗体效价快速达到I :256 ，提高工作效率，应用同种动物产生多元抗体针对鸭种预防免疫范围广、强度大。通过鸭强化免疫后制成的卵黄抗体对鸭病毒性肝炎病见效快、疗效显著，而且针对性强，同时对鸭的这种病具有很好的预防效果。本申请制备方法中在酸化水处理时应用了巴氏消毒的温度加热卵黄液，不仅达到消毒的作用同时可以提高抗体的回收率和酸化处理时溶液的澄清度，制得的卵黄抗体的优势特征过生物活性高、溶解快、机体吸收快、临床治疗见效快、抗体冻干粉保存时间长、效价降低速度减缓等优点。具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细的阐述。实施例I.本实施例的鸭瘟卵黄抗体冻干粉包括以下组分鸭瘟卵黄抗体90. 79%、 甲醛O. 2%、硫柳汞O. 01%,3%葡萄糖、1%山梨醇、2%甘氨酸、2%甘露醇，辛酸I. 0%,以上试剂为分析纯。本实施例鸭瘟卵黄抗体冻干粉的制备方法，具体步骤为I)免疫健康鸭群制得蛋免疫接种鸭瘟灭活疫苗I. 5mL (含毒103 2ELD5(l/0. IMl)， 第一次免疫健康鸭群使用鸭瘟灭活疫苗，每次免疫间隔7天时间，以后免疫加I倍量,免疫三次，第二次免疫后开始检测抗体效价，使抗体效价达到I :256时，开始收集蛋，收集的蛋进行清理本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种鸭瘟卵黄抗体冻干粉，其特征在于包括以下重量百分数的各组分鸭瘟卵黄抗体 86-91%、辛酸 O. 8-1. 0%、甲醛 O. 2-0. 3%、硫柳汞 O. 01-0. 02%,3-4% 葡萄糖、1-2% 山梨醇、 2-3%甘氨酸、2-3%甘露醇。2.一种如权利要求I所述鸭瘟卵黄抗体冻干粉的制备方法，其特征在于具体步骤为1)免疫健康鸭群制得蛋免疫接种鸭瘟灭活疫苗I.5mL (含毒103_2ELD5(i/0. I M1)，第一次免疫健康鸭群使用鸭瘟灭活疫苗，每次免疫间隔7天时间，以后免疫加I倍量，免疫三次， 第二次免疫后开始检测抗体效价，使抗体效价达到I :256时，开始收集蛋，收集的蛋进行清理、消毒，晾干备用；2)水稀释法酸化处理分离高免蛋卵黄，加入等体积的无菌水，搅拌混匀至颜色发白， 得到卵黄溶液；将卵黄溶液放入60-65°C水浴锅内均匀加热30min，然后加入pH为4. 9-5. 2 的、温度为4-6°C...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴红云，徐进，徐荣君，郭俊清，
申请(专利权)人：郑州后羿制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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