羧基化聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物马钱子碱纳米微粒及其用途制造技术

本发明专利技术属于药物制剂领域，具体涉及羧基化聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物马钱子碱纳米微粒及其用途。本发明专利技术以马钱子碱为活性成分，以羧基化聚乙二醇和聚乳酸作为药物辅料制成，该纳米微粒中携载马钱子碱含量为4.2％～4.6％，包封率为67％～82％。本发明专利技术的马钱子碱纳米微粒，用于抗肝癌治疗，通过外周静脉给药后，羧基化聚乙二醇/聚乳酸嵌段共聚物纳米载体能够增加马钱子碱在肝脏肿瘤组织聚集，使药物在局部缓慢释放，延长药物对肿瘤组织的作用时间，提高局部药物浓度，降低马钱子碱全身毒性。具有肿瘤组织药物聚集、药物释放稳定，抗癌效果好，安全等优势。该纳米药物的发明专利技术具有很好的临床应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物制剂领域，涉及肿瘤靶向治疗药物，具体涉及羧基化聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物马钱子碱纳米微粒及其用途。该纳米微粒可进一步制备肝脏肿瘤特异性靶向治疗药物
技术介绍
据报道,肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)位居全球恶性肿瘤发病率第5位、死因第3位，在我国则已经成为恶性肿瘤的第2位杀手，肝癌总的5年生存率不足5 %，每年新发病564000例，死亡549000例。目前原发 肝癌的治疗首选手术切除，手术切除率为15%-20%，肝癌根治性切除的5年复发率高达61.5%。对于不能手术切除的肝癌，介入治疗是首选的治疗方法，远期疗效并不理想，5年的生存率仅6%左右。近年来肝移植治疗肝癌的逐渐增多，其优势不仅在于完整切除肿瘤，除去肿瘤生长的基础病变，而且从根本上改善患者肝脏功能，尤其对于不能手术切除或不能耐受肝切除的肝癌，肝移植是目前唯一的外科根治治疗手段，但是术后肿瘤复发和转移导致低存活率严重制约肝癌肝移植的发展。Calne等研究发现37. 5%肝癌肝移植术后2月-5年死于肿瘤复发，5年生存率为18.6%，主要与残存具有生物活性的癌细胞通过体液、血液和淋巴携带转移至某一部位生长繁殖有关。虽然肝切除或肝移植术后通过全身或局部化疗预防肿瘤复发，在一定程度上提高术后生存率，但目前常用的化疗药物敏感性差，缺乏靶向性，全身毒副作用大，导致心、肝、肾等重要脏器功能损害，阻碍其临床广泛应用，因此研制新的靶向性和抗肿瘤作用强，能与肝癌细胞特异性结合，局部药物聚集、缓释，全身毒副反应小的药物是肝癌治疗及预防复发和转移研究的重点之一。纳米粒子(nanoparticles)具有比表面积大,表面原子数、表面能和表面张力随粒径的下降急剧增加，各纳米单位间存在着或强或弱的相互作用，这些特点使纳米粒子具有小尺寸效应，表面效应及很强的吸附性和生物活性，表现出许多优异性能和全新的功能，可作为药物的载体，改变药物体内分布特征，提高了药物吸收利用度和稳定性，改善药物性质和靶向性，药物缓释，药物作用时间延长，药物剂量减少，减轻或避免毒副作用，且利于储存，是近年来肿瘤治疗新的发展领域，已显示出其良好的优势。国外研究发现聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)-阿霉素纳米微粒静脉或磁性阿霉素白蛋白纳米微粒(IOO-IOOOnm)肝动脉给药后注入肝肿瘤小鼠体内，由于肝脏Kupffer细胞具有高吞噬活性，吞噬载药纳米微粒后在肝内起到药物储存库作用，缓慢释放抗肿瘤药物，与游离阿霉素相比，抗肿瘤效果显著。马钱子为马钱科植物马钱或皮氏马钱的成熟种子，具有散结消肿，通络止痛之功效，常用于治疗各种炎症和痹症。马钱子碱(Brucine)是马钱子主要成分之一，是一种弱碱性生物碱，水溶性差，作为活血通络和“以毒攻毒”代表药物，对T淋巴细胞增殖有促进作用，对小鼠淋巴细胞功能有剂量依赖性的功能调节作用，具有明显的抑瘤作用和很强的镇痛作用，近期有研究发现马钱子碱与马钱子碱-聚乳酸纳米微粒显著抑制SMMC-7721人肝癌细胞从S期进入G2、M期，诱导肝癌细胞凋亡，而且马钱子碱-聚乳酸纳米微粒抑制肿瘤细胞增殖效果显著优于马钱子碱单体，为马钱子碱及其靶向治疗肝细胞肝癌的深入研究奠定了实验基础。但由于马钱子碱是剧毒中药，其治疗量与中毒量非常接近，全身用药剂量大，毒副作用强。如何进一步改善马钱子碱的靶向性和肿瘤局部药物聚集、持续发挥抗肿瘤效应，降低全身毒副反应，是提高马钱子碱抗肝癌效应的关键所在。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种新的肿瘤靶向治疗药物，具体涉及羧基化聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物马钱子碱纳米微粒及其在制备肿瘤靶向治疗药物中的用途。本专利技术利用纳米技术制备羧基化聚乙二醇聚乳酸嵌段共聚物马钱子碱纳米微粒，该纳米微粒能克服现有技术的缺陷，增强马钱子碱在肿瘤组织特异性积聚，提高它的肿瘤 亲和性和抗肿瘤效应，降低全身应用毒副作用。具体而言，本专利技术的羧基化聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物马钱子碱纳米微粒，其特征在于，以马钱子碱为活性成分，以生物降解材料羧基化聚乙二醇(carboxylationpolyethylene glycol,CPEG)和聚乳酸(polylactic acid,PLA)作为药物辅料制成马钱子碱-羧基化聚乙二醇/聚乳酸嵌段共聚物纳米微粒(Brucine/CPEG/PLA Nanoparticles,BCPNS)，该纳米微粒中携载马钱子碱含量为4. 2% 4. 6%，包封率为67% 82%。本专利技术中，羧基化聚乙二醇、聚乳酸嵌段共聚后其重量比为羧基化聚乙二醇聚乳酸=1.5 2. 5，马钱子碱与羧基化聚乙二醇/聚乳酸嵌段共聚物的重量比为I : 20;本专利技术中，纳米微粒携载马钱子碱浓度为800ii g/ml ；本专利技术中，纳米微粒的粒径为183. 2-322. 2nm ；本专利技术中，药物释放结果为Bru_NP在48小时内释放完全，24小时累积释放超过80%。本专利技术采用超声乳化-化学交联法制备马钱子碱-羧基化聚乙二醇/聚乳酸嵌段共聚物纳米微粒，将羧基化聚乙二醇/聚乳酸嵌段共聚物、二氯甲烷和马钱子碱同时溶解于有机溶剂中，与8%聚乙烯醇混合形成初乳，干燥挥去二氯甲烷，离心除去聚集体，超滤除去游离马钱子碱，制得纳米微粒；其包括步骤将马钱子碱和PLA-PEG-C00H油相和8%聚乙烯醇水溶液水相混合，用高剪切乳匀机分散，12000rpm转速下剪切5min得分散液，再将该分散液在300w功率超声条件下继续乳化，超声，得初乳液；将初乳液倒入处方量的稀释液中，搅拌后，进行液中干燥，挥去CH2Cl2,将液中干燥后的乳液离心去除聚集体，收集上清液得马钱子碱纳米乳液；将马钱子碱纳米乳液装入超滤离心管中离心，进行浓缩并除去游离马钱子碱后，用纯化水洗涤浓缩液，再超滤离心，获得马钱子碱纳米浓缩液，6°Co辐照灭菌，4°C冰箱保存备用。本专利技术进行了马钱子碱纳米微粒组织分布与抗肿瘤作用试验马钱子碱纳米微粒经尾静脉注射24h后，在小鼠主要脏器分布相似，组织中以肝脏及脾脏浓度最高，其次是肺、肾、肌肉，心、脑、胃、脂肪含量最低，结果表明，本专利技术的马钱子碱纳米粒显著抑制肝癌细胞生长，随药物浓度的增加，肝癌细胞生长抑制作用明显，呈现剂量依赖性；其抑制 肝癌细胞生长与诱导肝癌细胞凋亡有关，其作用机制与上调肝癌细胞Fas蛋白和mRNA表达有关。本专利技术的纳米微粒利用羧基化的聚乙二醇与聚乳酸形成嵌段共聚物，共聚物末端含有水溶性聚合物聚乙二醇镶嵌，能显著提高体内长循环时相，能明显避免马钱子碱脂质体体内释药速度过快，难以在局部达到有效抗癌药物浓度等缺陷。比较现有技术公开的实验动物(大白兔)药代动力学试验研究，其中，马钱子碱溶液给药2小时后血中已经测不出Brucine，慢分布半衰期7. 5分钟，而将马钱子碱包封于脂质体后，给药12小时后血中仍然保持一定的浓度分布，消除半衰期比前者延长6. 6分钟，但药物释放仍然过快，而且肝脏靶向性不强，难以在局部达到有效的药物浓度。本专利技术的纳米微粒可进一步制备抗肿瘤纳米药物，或控释或靶向聚集抗肿瘤药物，用于肝脏肿瘤靶向治疗，其同时具有肿瘤靶向性、抗肿瘤效应和控释药物的作用。本专利技术的羧基化聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物马钱子碱纳米微粒，具有以下突本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.羧基化聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物马钱子碱纳米微粒，其特征在于，以马钱子碱为活性成分，以羧基化聚乙二醇和聚乳酸作为药物辅料制成马钱子碱-羧基化聚乙二醇/聚乳酸嵌段共聚物纳米微粒，该纳米微粒中携载马钱子碱含量为4. 2% 4. 6%，包封率为67% 82%，马钱子碱与羧基化聚乙二醇/聚乳酸嵌段共聚物的重量比为I : 20。2.按权利要求I所述的羧基化聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物马钱子碱纳米微粒，其特征在于，所述的羧基化聚乙二醇/聚乳酸嵌段共聚物中的重量比为羧基化聚乙二醇聚乳酸=1.5 2. 5。3.按权利要求I所述的羧基化聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物马钱子碱纳米微粒，其特征在于，所述的纳米微粒携载马钱子碱浓度为800ii g/mlo4.按...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦建民，盛霞，李琦，殷佩浩，杨林，撒忠秋，黄涛，高科攀，陈庆华，
申请(专利权)人：上海中医药大学附属普陀医院，上海医药工业研究院，
类型：发明
国别省市：