本发明专利技术属于从传统中药材中提取有效提高机体免疫力的药物活性成分的领域。技术方案为取干燥的野菊花药材500g，以水为提取剂于90℃水浴中浸提1h，连续提取3次，过滤，合并水提液，浓缩后加入5倍量的95%乙醇静置24h。醇沉后的沉淀抽滤后依次用无水乙醇、丙酮、乙醚进行洗涤，干燥后得野菊花粗多糖粉末。而后利用LSA-21大孔吸附树脂对其进行纯化，接收液按前述醇沉方法，得较纯的野菊花多糖粉末，蒽酮-硫酸法检测多糖含量为81.29%。灌胃（ig）时分别用生理盐水配成浓度为40~20g·L-1的野菊花多糖溶液。最后将提取得到的野菊花多糖与常用辅料相结合，制备得到各种剂型的增强免疫力的药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于从传统中药材中提取有效提高机体免疫力的药物活性成分，尤其是将从中药材野菊花中的多糖成分用于制备增强机体免疫力药物的医药用途。
技术介绍
随着社会和经济的发展，越来越多的上班族由于过度劳累、焦虑不安、运动不足和饮食失衡等因素的影响，从而导致机体免疫力低下。如何寻找一种既安全又价格低廉的增强免疫力的来自天然的药物，是本领域科研人员一直孜孜不倦努力寻找的目标。野菊花为菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.北野菊C. boreale Mak.或岩香菊C. Iavandulaefolium (Fisch. )Mak.的头状花序。生于山坡草地、灌丛、河边水湿地，海滨盐溃地及田边、路旁，岩石上。资源分布分布于吉林、辽宁、河北、河南、山西、陕西、甘肃、青海、新疆、山东、江苏、浙江、安徽、福建、江西、湖北、四川、云南、湖南等地。野菊花含有大量的多糖成分，具有广泛的生物活性，如抗肿瘤、抗氧化、治疗糖尿病、抗病毒、抗辐射、调节性功能、调血脂等药理作用。野菊花多糖(Chrysanthemum indicum polysaccharide,CIP)具有防衰老和清除活性氧自由基等方面作用，但对其免疫调节作用的研究至今尚未见报道。本专利技术对中药多糖的增强免疫力的功效进行了深入研究，为寻找新型免疫调节剂及抗肿瘤药物提供了广阔的前景。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是利用价格低廉的常用中药材野菊花，从中提取野菊花多糖，制备具有提高机体免疫力的天然药物。本专利技术的技术方案取干燥的野菊花药材500 g，以水为提取剂，按料液比1:32，于90 °C水浴中浸提I h，连续提取3次，过滤，合并水提液，浓缩后加入5倍量的95%乙醇静置24 h。醇沉后的沉淀抽滤后依次用无水乙醇、丙酮、乙醚进行洗涤，干燥后得野菊花粗多糖粉末。而后利用LSA-21大孔吸附树脂，于温度40 °C、pH 5、流速3 BV/h对其进行纯化，接收液按前述醇沉方法，得较纯的野菊花多糖粉末，蒽酮-硫酸法检测多糖含量为81. 29%。灌胃(ig)时分别用生理盐水配成浓度为4(T20 g · L-1的野菊花多糖溶液。最后将提取得到的野菊花多糖成分与常用的辅料相结合，制备得到各种剂型的增强免疫力的药物。具体实施例方式实施例I 仪器、试剂与材料 1.1.1动物 ICR小鼠，雄性，体重18 22 g，由江苏省中医药研究院实验动物中心提供，实验动物合格证号 SCXK (苏)2007-0001。仪器 Spectrumlab 752S紫外可见分光光度计上海棱光技术有限公司梅特勒万分之一电子天平瑞士梅特勒十万分之一电子天平瑞士 HH-6型数显恒温水浴锅金坛市奥瑞电器厂 TDL-5-A型离心机上海安亭科学仪器厂 Microfuge 16 型离心机德国 Beckman Coulter I. I. 3试剂 注射用环磷酰胺江苏恒瑞医药股份有限公司，批号11061421 氯化钠注射液南京小营药业集团有限公司，批号2011081805 野菊花江苏南京药业股份有限公司中药饮片厂二硝基氟苯(DNFB)溶液称取DNFB50 mg置于干燥洁净的具塞小瓶中，将预先配好的5 mL丙酮麻油溶液(I I)，倒入小瓶并用胶布密封，混匀后使用，新鲜配制。补体(豚鼠血清)抽取4只豚鼠心脏血，雌雄各半，分离新鲜血清，混合后备用，临用时生理盐水稀释I : 10。鸡红细胞(5%CRBC):取新鲜鸡血，除去纤维蛋白，离心得压积红细胞，临用时用生理盐水洗涤三次，配成5%混悬液即可。受试药物 野菊花多糖制备取干燥的野菊花药材500 g，以水为提取剂，按料液比1:32，于90 V水浴中浸提I h，连续提取3次，过滤，合并水提液，浓缩后加入5倍量的95%乙醇静置24 h。醇沉后的沉淀抽滤后依次用无水乙醇、丙酮、乙醚进行洗涤，干燥后得野菊花粗多糖粉末。而后利用LSA-21大孔吸附树脂，于温度40 °C、pH 5、流速3 BV/h对其进行纯化，接收液按前述醇沉方法，得较纯的野菊花多糖粉末，蒽酮-硫酸法检测多糖含量为81. 29%。ig时用生理盐水配成浓度为40 g · Γ1,即野菊花多糖高浓度溶液。实验方法 I. 2. I动物分组及给药 将ICR雄性小鼠随机分为3个组正常对照组、模型组及野菊花多糖高剂量组，每组10只。各组小鼠每天ig I次，连续ig 14 d，正常对照组和模型组分别ig生理盐水10mL · kg-1 · (Γ1,野菊花多糖高剂量组ig等体积的野菊花多糖溶液400 mg · kg-1 · (Γ1。于ig的第10天开始，正常对照组经腹腔注射生理盐水10 mL · kg—1 · cf1，连续4 d ;模型组及野菊花多糖高剂量组分别经腹腔注射等体积的环磷酰胺100 mg · kg—1 · (Γ1,连续4 do对免疫功能低下小鼠碳廓清能力影响的检测 给药第14天,ig 2 h后尾静脉注射印度墨汁0.1 ml/10g,于I U1)和5 (t2) min后分别经眼眶静脉采血20 yL，加至2 mL O. 1% Na2CO3中，于紫外可见分光光度计680 nm处测定吸光度04)，采血后将小鼠脱颈处死，摘取肝、脾及胸腺称重，按下式计算廓清指数(K)和吞噬指数(α )，并计算脏器指数。K =(logA「logA5)/(t2_ ti) =Iog(A1A5)/4α =体重/ (肝重+脾重)X K173 脏器指数=脏器重量(mg)/小鼠体重(g)I.2. 3对免疫功能低下小鼠迟发型变态反应影响的检测 给药第9天时用5%硫化钠溶液给每只小鼠腹部脱毛，面积约3X3 cm2。第10天，给每只小鼠腹部涂抹DNFB溶液致敏，进行初次免疫(致敏)。致敏后4 d，用DNFB溶液均匀涂抹小鼠右耳廓内外两面进行攻击。攻击24 h后颈椎脱白处死小鼠，剪下左右耳壳，用打孔器取下直径8 _的耳片，称重。小鼠的耳肿胀度(右耳片重减去左耳片重的差值)表示迟发型变态反应的程度。对免疫功能低下小鼠血清溶血素影响的检测 给药第7天时，每鼠腹腔注射5%的鸡红细胞生理盐水混悬液0.2 mL进行免疫。免疫7天后，摘眼球取血，离心，取血清用生理盐水稀释100倍，取稀释血清I mL，与5%鸡红细胞悬液O. 5 mL、10%补体O. 5 mL混合，另设不加血清的空白管作对照，在37 °C恒温水浴锅保温30 min后，冰水浴终止反应。离心，取上清液于紫外可见分光光度计540 nm处测定吸光度值。 统计学分析数据以表示，用SPSS19. O对数据进行方差分析，采用t检验进行组间比较。Pd 05有统计学意义。实验结果 I.3. I对免疫功能低下小鼠碳廓清能力的影响 与正常对照组相比，模型组各指数均显著下降(/X0.01);与模型组相比，野菊花多糖高剂量组小鼠的碳廓清指数、吞噬指数以及脾指数与胸腺指数均升高，差异呈现显著性O°〈0. 01 或/X0. 05)。结果见表 I。表I野菊花多糖高剂量组对免疫功能低下小鼠碳廓清能力的影响(，n=10)本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种从野菊花中提取的多糖在制备提高机体免疫力药物中的应用。2.如权利要求I所述的一种从野菊花中提取的多糖在制备提高动物免疫力药物中的应用，其特征为采用以下的提取工艺取干燥的野菊花药材500 g，以水为提取剂，按料液比1:32，于90 °C水浴中浸提I h，连续提取3次，过滤，合并水提液，浓缩后加入5倍量的95%乙醇静置24 h ;醇沉后的沉淀抽滤后依次用无水乙醇、丙酮、乙醚进行洗涤，干燥后得野菊花粗多糖粉末；而后...
【专利技术属性】
技术研发人员：任爱农，
申请(专利权)人：江苏省中医药研究院，
类型：发明
国别省市：
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