一种银杏原花青素-多糖混合提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种银杏原花青素‑多糖混合提取物，该提取物中原花青素含量为40～60％，多糖含量为40～60％，原花青素和多糖总含量大于90％。本发明专利技术还提供制备上述提取物的制备方法，其包括下列内容：采用梯度乙醇水溶液提取、提取浓缩液加尿素二次提取、醇沉、沉淀分离多糖、醇沉液分离原花青素等步骤得到的提取物。本发明专利技术提供的银杏原花青素‑多糖混合提取物可作为用于抗氧化、抗辐射、美容抗衰老、癌症辅助治疗为目的的保健食品、药品或化妆品。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及天然产物的提取方法和提取物，具体涉及从银杏枝皮中提取原花青素和多糖的方法以及利用该方法获得的原花青素-多糖混合提取物及其应用。
技术介绍
银杏被誉为“活化石”，药用银杏叶中含有大量的活性成分，包括内酯、黄酮、原花青素、有机酸、多糖等。其中，组成银杏原花青素的单体成分主要是没食子儿茶素和表没食子儿茶素，约占总量的85％。由于没食子儿茶素和表没食子儿茶素相对于儿茶素和表儿茶素多一个酚羟基，因此银杏原花青素的活性比葡萄籽原花青素的活性更强，这一观点在专利“含银杏原花青素提取物及其制备方法和应用”(申请号201110384337.3)中已经证实。因此，开发利用银杏原花青素对整个大健康产业和银杏产业的发展意义重大。但在银杏叶中，原花青素含量随季节和天气变化差异较大，最低不足0.5％，最高可达10％，一般在正常采收期的银杏叶原花青素含量在0.5～2％。且银杏叶中含有大量黄酮类成分，因此从银杏叶中提取分离高纯度的原花青素代价大，得率低，专利“含银杏原花青素提取物及其制备方法和应用”(申请号201110384337.3)中，获得98％以上的原花青素提取物，得率不足0.2％。在药用银杏叶种植过程中，会产生大量的废料，据估计每亩银杏树每年可以产生300～500kg废弃的银杏枝条，相当于约100～150kg枝皮。本专利技术人团队研究发现，枝皮中不含黄酮类成分，内酯成分含量不足0.1％，但含有丰富的原花青素和多糖成分，原花青素的含量为2％～8％，多糖的含量为4％～8％。因此从枝皮中开发原花青素不受黄酮类成分的干扰，纯化步骤简化，制备成本下降，更重要的是原料成本非常低廉，为废弃的枝皮。从枝皮中开发原花青素产品，可以充分利用银杏资源，变废为宝，为银杏产业增加了重大的附加经济价值。同时，本专利技术人团队还发现，原花青素和多糖一起具有协同增效的作用，等剂量下，混合物的活性大于单一成分的活性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种从银杏枝皮中制备的富含原花青素和多糖的提取物，及其制备方法，还提供所制备的原花青素-多糖提取物在制备食品、保健食品或化妆品的应用。其中，银杏原花青素-多糖提取物中含有40～60％(w/w)的原花青素，40～60％(w/w)的多糖，且原花青素和多糖的总含量大于90％(w/w)。更进一步限定银杏原花青素-多糖提取物中原花青素含量为50％-58％，多糖含量为45％-55％，且原花青素和多糖总含量大于95％。为实现上述专利技术目的，本专利技术以银杏枝皮为原料，具体制备方法包括如下步骤：1)银杏枝皮粉碎后依次用乙醇溶液、水回流提取，合并后获得提取液原液，并回收提取液原液中的乙醇至无醇味，得提取浓缩液；2)提取浓缩液中加入0.1g～1g/L尿素，加热回流0.5～6h，获得二次提取液；3)二次提取液过滤，滤液用乙醇醇沉，醇沉的醇浓度为70％～90％，分别获得醇沉液和沉淀；4)沉淀用0.5～10倍量50～100℃热水溶解，放冷，过滤，得多糖滤液；5)醇沉液浓缩至无醇味，用大孔树脂吸附分离，用0～70％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，获得乙醇洗脱液；6)将多糖滤液和乙醇洗脱液合并，干燥后即得银杏原花青素-多糖提取物产品。本专利技术制备方法中：步骤1)中，银杏枝皮粉碎至粒径0.5-2cm，先用6-20倍量的60％乙醇水溶液回流提取1.0～3.0h，提取1～3次；再用6-20倍量的水提取1.0～3.0h，提取1～3次，合并多次提取液，用减压浓缩提取液至无醇味，剩余溶液体积约为投料量的0.5～5倍量体积，得提取浓缩液。步骤1)中提取最佳工艺优选为，银杏枝皮粉碎至粒径0.5-2cm，先用10倍量的60％乙醇水溶液回流提取2.0h，提取1次；再用10倍量的水提取2.0h，提取2次，合并多次提取液，用减压浓缩提取液至无醇味，剩余溶液体积约为投料量的1倍量体积，得提取浓缩液。步骤2)中二次提取最佳工艺优选为，提取浓缩液中加入0.2g/L尿素，加热回流1.0h，获得二次提取液。步骤3)中醇沉最佳醇浓度为80％。步骤4)中沉淀溶解的最佳工艺优选为，沉淀用1倍量90℃热水溶解。步骤5)中，醇沉液浓缩至无醇味，用AB-8、HPD-750、HPD-200A、HPD-100C、HPD-417、ADS-17大孔树脂吸附分离，用0～70％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，获得乙醇洗脱液。本专利技术步骤5)中树脂分离的最佳工艺优选为，醇沉液浓缩至无醇味，用HPD-100C/ADS-17混合树脂(V/V＝1/1)进行吸附，依次用水和5％乙醇洗脱除杂，再用50％乙醇水溶液进行洗脱分离。银杏原花青素和多糖具有协同增效作用，其抗辐射、抗氧化和抗癌活性好于单一的原花青素或多糖成分；本专利技术人发现，银杏原花青素-多糖混合提取物具有较好的抗辐射、抗氧化和抗癌活性；尤其是当原花青素与多糖的重量比例为1：1时，抗辐射、抗氧化和抗癌活性最佳。因此，本专利技术制备的原花青素-多糖混合提取物，可作为制备用于抗辐射、抗氧化、美容养颜的食品、保健食品和化妆品，也可作为制备用于对抗各种因过氧化造成的机体器官损伤的食品和保健食品，还可作为制备用于辅助抗肿瘤的食品和保健食品。本专利技术以银杏枝皮为原料，用梯度乙醇水溶液进行提取，再通过加尿素的二次提取，大大增加了原花青素的转移率，之后通过醇沉，将原花青素和多糖分离开来，单独纯化，最终合并纯化溶液，以获得高含量原花青素和多糖的提取物。本专利技术取得以下有益效果：1.本专利技术提供了一种原花青素-多糖混合提取物，含有40～60％(w/w)的原花青素，40～60％(w/w)的多糖，原花青素和多糖的总含量大于90％(w/w)，更进一步限定银杏原花青素-多糖提取物中原花青素含量为50％-58％，多糖含量为45％-55％，且原花青素和多糖总含量大于5％。银杏原花青素和多糖具有协同增效作用，其抗辐射、抗氧化和抗癌活性好于单一的原花青素或多糖成分；当原花青素与多糖的重量比例为1：1时，抗辐射、抗氧化和抗癌活性最佳。2.本专利技术提供的提取物是以银杏枝皮为原料，充分利用了银杏资源，变废为宝，为银杏原花青素和多糖提供了又一重要的来源，为银杏产业增加了重大的附加经济价值。3.本专利技术中用乙醇溶液、水多次提取银杏枝皮中的原花青素和多糖，可最大限度的将原花青素提取出来，也可最大限度的提取出多糖成分，整个提取效率远远大于等度乙醇水溶液的提取效率。4.本专利技术中的提取浓缩液，加入尿素进行二次提取，可以有效的提高原花青素的转移率，去除蛋白质等水溶性杂质。5.本专利技术的工艺路线包括回流提取、醇沉、过柱，对仪器设备的要求低、成本低，适合工业化生产。6.本专利技术提取制备方法除乙醇外，未再次引入有机溶剂，有利于后续三废的处理。7.本专利技术制备方法制备的原花青素-多糖混合提取物相对于单一原花青素成分或单一多糖成分，抗辐射、抗氧化和抗癌活性更强，可用于保健食品、食品和化妆品的制备。附图说明：图1为枝皮原花青素的HPLC色谱图，其中7.8min的峰是单体峰，14.4和15.7min的峰是两个二聚体峰，17.9、19.0和20.1min的峰是三个三聚体峰。图2为银杏叶原花青素的HPLC色谱图，其中8.0min的峰是单体峰，14.5和15.8min的峰是两个二聚体峰，18.0、19.1和20.1mi本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种银杏原花青素‑多糖混合提取物，其特征在于，提取物原料为银杏枝皮，提取物中原花青素含量为40～60％，多糖含量为40～60％，且原花青素和多糖总含量大于90％。

【技术特征摘要】
1.一种银杏原花青素-多糖混合提取物，其特征在于，提取物原料为银杏枝皮，提取物中原花青素含量为40～60％，多糖含量为40～60％，且原花青素和多糖总含量大于90％。2.根据权利要求1所述的一种银杏原花青素-多糖混合提取物，其特征在于，所述提取物中原花青素含量为50％-58％，多糖含量为45％-55％，且原花青素和多糖总含量大于95％。3.权利要求2所述的一种银杏原花青素-多糖混合提取物的制备方法，包括以下步骤：1)银杏枝皮粉碎后用梯度乙醇水溶液回流提取，合并后获得提取液原液，并回收提取液原液中的乙醇至无醇味，得提取浓缩液；2)提取浓缩液中加入0.1g～1g/L尿素，加热回流0.5～6h，获得二次提取液；3)二次提取液过滤，滤液用乙醇醇沉，醇沉后的醇浓度为70％～90％，分别获得醇沉液和沉淀；4)沉淀用0.5～10倍量50～100℃热水溶解，放冷，过滤，得多糖滤液；5)醇沉液浓缩至无醇味，用大孔树脂吸附分离，用0～70％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，获得乙醇洗脱液；其中，大孔树脂选自AB-8、HPD-750、HPD-200A、HPD-100C、HPD417、ADS-17这类中的一种或两种；6)将多糖滤液和乙醇洗脱液合并，干燥后即得银杏原花青素-多糖提取物产品。4.根据权利要求3所述的一种银杏原花青素-多糖混合提取物的制备方法，其特征是步骤1)银杏枝皮粉碎至粒径0.5-2cm，先用6-20倍量的60％乙醇水溶液回流提取1...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔洪翔，黄海波，刘华春，王如伟，何厚洪，张鸿书，陈君，孔琼荣，万玉华，陈杰，
申请(专利权)人：云南康恩贝植物研究院有限公司，浙江现代中药与天然药物研究院有限公司，云南希陶绿色药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：云南;53