一种花青素的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种花青素的提取方法，包括：(1)、将蓝靛果原果置于容器中，通二氧化硫、加30％的盐酸，粉碎，发酵，酶解，过滤得蓝靛果酶解液；(2)、将蓝靛果酶解液滴加至大孔树脂柱子中，用浓度为10～90％乙醇溶液洗涤,洗涤液减压浓缩至无乙醇味时,调pH至9,离心分离,得蓝靛果提取液；(3)、在反应容器中加入蓝靛果提取液、如式(I)所示的酰胺类离子液体，5～50℃的下，搅拌萃取1～50小时，静置分层，分离出有机相，测定含量；

Method for extracting anthocyanin

The invention discloses a method for extracting anthocyanins, including: (1), the original fruit EELC is placed in the container, the sulfur dioxide, and 30% hydrochloric acid, crushing, fermentation, enzymatic hydrolysis, filtering EELC enzyme solution; (2), Lonicera edulis enzymolysis liquid dripping to the big hole in the resin column, with a concentration of 10 ~ 90% ethanol washing, washing liquid is vacuum concentrated to no alcohol taste, pH adjusted to 9, centrifugal separation, have loniceraedulis extract; (3), added in the reaction vessel loniceraedulis extract, such as formula (I) amide shown in ionic liquids the 5 ~ 50 DEG C, stirring extraction for 1 ~ 50 hours, layering, separation of the organic phase, content determination;

【技术实现步骤摘要】
一种花青素的提取方法
本专利技术涉及一种花青素的提取方法，尤其是从蓝莓提取液中分离提取花青素的方法。
技术介绍
花青素是黄酮类化合物，是广泛存在于植物中的天然水溶性色素，因主要以糖苷的形式存在，所以也称花色苷，是现今所发现的最有效的天然水溶性自由基清除剂。花青素有延缓衰老，激活巨噬细胞，使血清免疫球蛋白免受自由基的侵害，提高免疫力，降低心脑血管疾病的发病率，降低糖尿病及其并发症的发病机率，改善退行型老年痴呆，保护基因的完整性，降低癌症的发病率，抗发炎，预防视力衰退等诸多功效。蓝莓含有丰富的花青素，在我国北方有大量的天然蓝莓，亦称为蓝靛果。蓝靛果果肉细腻，甜酸适度，除了直接食用新鲜果实，蓝莓全身上下全是宝，可以深度加工成各种产品，例如在国内深受欢迎的蓝莓汁、蓝莓功能饮料和蓝莓酒等；还可以加工成各式各样的配料，掺加在调味剂、烘焙品和奶制品中。果胶可以用来生产果酱、果冻、糖果和馅饼等；花青素可以用于药物生产、制造食用色素、保健品或精细化工产品等；加工产品过程中产生的蓝莓果渣可以用于红色素的提取、制醋和酶的生产等；蓝莓种子中30％的干性油可以用来生产油漆和高价值药品的提炼，果树叶片中的鞣质可提取单宁，单宁是一种烤胶原料。因此，蓝莓果实中高价值活性成分的提取蓝莓深加工的研究的一个重要的领域，作为可持续发展的可再生能源，不仅可以开拓新的产业结构，促进相应的制造业和服务行业的发展，还可以增加就业、开拓新的经济增长点。目前花青素的提取主要是溶剂提取，而且，提取过程中要受到浸提溶剂、液料比、温度、时间以及pH值等因素的影响。例如，加入乙醇紧接着加热到40～50℃循环提取，并通过真空蒸馏的方法进行浓缩，最后用喷雾干燥处理制得花青素粉末。人们通过正交试验得到提取花青素的最优条件确定浸提剂、提取时间、提取温度、液固比、酸度、光照等的影响。在分离纯化技术的应用中，主要是膜分离、凝胶色谱、大孔树脂分离和高速逆流色谱等技术。大孔树脂目前已经成为分离和纯化的主要方法。但是，溶剂法提取花青素，由于提取过程中，成分中含有较多糖、有机酸和蛋白等杂质，使得产品的质量差、稳定性低，要获得高纯度，质量稳定的产品，分离纯化技术还有待进一步改进，降低成本和进行产业化生产也需要开展进一步研究。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，提供一种所得产品稳定的适于工业化生产的从蓝靛果酶解液中分离提取花青素的方法。为解决上述技术问题，本专利技术公开了一种花青素的提取方法，该方法包括如下步骤：(1)、将蓝靛果原果置于容器中，通入二氧化硫适量和以及加入质量浓度为30％的盐酸适量，依次经粉碎，自然发酵，酶解，过滤得到蓝靛果酶解液；(2)、将蓝靛果酶解液滴加至大孔树脂柱子中，用质量浓度为10～90％乙醇溶液洗涤,洗涤液减压浓缩至无乙醇味时,调pH至9,离心分离,取清液即为蓝靛果提取液；(3)、按比例在反应容器中加入蓝靛果提取液、如式(I)所示的酰胺类离子液体，于5～50℃的温度下，搅拌萃取1～50小时，静置分层，分离出含有花青素的有机相，用HPLC测定含量；离子液体在后续回收即可，且可循环使用。其中，R1、R2各自独立为碳原子数1～10的酰胺基或碳原子数1～10的烷基；L－为下列之一：BF4－、PF6－、OAC－、CF3SO3－、N(SO2CF3)2－。进一步地，步骤(1)中二氧化硫所用质量用量为蓝靛果原果质量用量的1～5％。进一步地，步骤(1)所述质量浓度为30％的盐酸的质量用量为蓝靛果原果质量用量的1～10％。进一步地，步骤(1)酶解所用酶为复合果胶酶、纤维素酶、淀粉酶、脂肪酶或果胶酶中的任意一种或任意两种及以上的混合物。进一步地，步骤(1)所述酶质量用量为蓝靛果原果质量用量的1～10％。进一步地，步骤(2)所述大孔树脂采用D-101型或AB-8型或DM301型。进一步地，步骤(3)所用蓝靛果提取液中花青素浓度为1～20mg/mL。进一步地，步骤(3)中式(I)所示的酰胺类离子液体为咪唑类四氟硼酸盐或咪唑类六氟磷酸盐。最佳选择为咪唑类六氟磷酸盐。进一步地，步骤(3)所用酰胺类离子液体与蓝靛果提取液中花青素的质量比为(1～10)：1。本专利技术中以蓝靛果提取液的代表性成分进行含量分析，通过分析萃取前后花青素的含量检测萃取效率。分析方法采用HPLC。色谱柱为KromasilRP-C18柱(250×4.6mm)，A：10％(v/v)的甲酸水溶液B：乙腈。采用梯度洗脱，T＝0min，B％：4％；T＝8min，B％：5％；T＝15min，B％：7％；T＝25min，B％：10％：T＝30min，B％：15％；T＝35min，B％：15％；T＝36min，B％：70％：T＝40min，B％：70％：T＝41min，B％：4％，即系统回复初始状态平衡9min。流速0.8ml/min；检测波长530nm；进样量10μl；温度控制在35℃。本专利技术将酰胺类离子液体作为萃取剂用于从蓝靛果提取液分离花青素，并配合对应的提取过程以及合理的参数条件，可防止花青素在分离过程中被氧化，极大改善了萃取效果，且离子液体可以循环使用，产品安全稳定，对环境无污染，是经济实用的环保技术，适于工业化生产。具体实施方式本专利技术的实施例：下面通过具体实施方式对本专利技术作进一步详细地说明。蓝靛果提取液的制备：实施例1：取蓝靛果原果100Kg，通入二氧化硫3Kg，加入30％盐酸5Kg，粉碎后，自然发酵，加入纤维素酶1Kg，淀粉酶1Kg，脂肪酶1Kg酶解，过滤得到蓝靛果酶解液。将蓝靛果酶解液慢慢滴加到装入D-101型大孔树脂柱子中，用60％乙醇溶液洗涤,洗涤液减压浓缩至无乙醇味时,调pH至9,离心,取清液即为蓝靛果提取液。用去离子水将蓝靛果提取液中的花青素质量浓度调为1.2mg/mL。实施例2：取蓝靛果原果100Kg，通入二氧化硫1Kg，加入30％盐酸10Kg，粉碎后，自然发酵，加入复合果胶酶5Kg酶解，过滤得到蓝靛果酶解液。将蓝靛果酶解液慢慢滴加到装入AB-8型大孔树脂柱子中，用90％乙醇溶液洗涤,洗涤液减压浓缩至无乙醇味时,调pH至9,离心,取清液即为蓝靛果提取液。用去离子水将蓝靛果提取液中的花青素质量浓度调为1.2mg/mL。实施例3：取蓝靛果原果100Kg，通入二氧化硫5Kg，加入30％盐酸1Kg，粉碎后，自然发酵，加入复合果胶酶5Kg酶解，过滤得到蓝靛果酶解液。将蓝靛果酶解液慢慢滴加到装入DM301型大孔树脂柱子中，用20％乙醇溶液洗涤,洗涤液减压浓缩至无乙醇味时,调pH至9,离心,取清液即为蓝靛果提取液。用去离子水将蓝靛果提取液中的花青素质量浓度调为1.2mg/mL。实施例4：取蓝靛果原果100Kg，通入二氧化硫3Kg，加入30％盐酸5Kg，粉碎后，自然发酵，加入复合果胶酶1Kg，纤维素酶1Kg，淀粉酶1Kg，脂肪酶1Kg酶解，过滤得到蓝靛果酶解液。将蓝靛果酶解液慢慢滴加到装入D-101型大孔树脂柱子中，用60％乙醇溶液洗涤,洗涤液减压浓缩至无乙醇味时,调pH至9,离心,取清液即为蓝靛果提取液。用去离子水将蓝靛果提取液中的花青素质量浓度调为1.2mg/mL。花青素的提取：实施例5将蓝靛果提取液(花青素质量浓度为1.2mg/mL)10毫升，1-甲基-3-丙酰胺基咪唑六氟磷酸盐12毫克，放在50毫升反应瓶中，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种花青素的提取方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：(1)、将蓝靛果原果置于容器中，通入二氧化硫适量和以及加入质量浓度为30％的盐酸适量，依次经粉碎，自然发酵，酶解，过滤得到蓝靛果酶解液；(2)、将蓝靛果酶解液滴加至大孔树脂柱子中，用质量浓度为10～90％乙醇溶液洗涤,洗涤液减压浓缩至无乙醇味时,调pH至9,离心分离,取清液即为蓝靛果提取液；(3)、按比例在反应容器中加入蓝靛果提取液、如式(I)所示的酰胺类离子液体，于5～50℃的温度下，搅拌萃取1～50小时，静置分层，分离出含有花青素的有机相，用HPLC测定含量；

【技术特征摘要】
1.一种花青素的提取方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：(1)、将蓝靛果原果置于容器中，通入二氧化硫适量和以及加入质量浓度为30％的盐酸适量，依次经粉碎，自然发酵，酶解，过滤得到蓝靛果酶解液；(2)、将蓝靛果酶解液滴加至大孔树脂柱子中，用质量浓度为10～90％乙醇溶液洗涤,洗涤液减压浓缩至无乙醇味时,调pH至9,离心分离,取清液即为蓝靛果提取液；(3)、按比例在反应容器中加入蓝靛果提取液、如式(I)所示的酰胺类离子液体，于5～50℃的温度下，搅拌萃取1～50小时，静置分层，分离出含有花青素的有机相，用HPLC测定含量；其中，R1、R2各自独立为碳原子数1～10的酰胺基或碳原子数1～10的烷基；L－为下列之一：BF4－、PF6－、OAC－、CF3SO3－、N(SO2CF3)2－。2.根据权利要求1所述花青素的提取方法，其特征在于：步骤(1)中二氧化硫所用质量用量为蓝靛果原果质量用量的1～5％。3.根据权利要求1或2所述花青素的提取方法，其特征在于：步骤(1)所述质量浓度为30％的盐酸的质量用量为蓝靛...

【专利技术属性】
技术研发人员：裴文，何甫长，刘乘风，洪秋玲，朱鹏超，卢玉杰，马光明，
申请(专利权)人：临海市利科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33