The invention provides a sunflower stem core with antitumor activity of the polysaccharide extraction and separation method, first issued by water extraction and alcohol precipitation extraction of crude polysaccharide, crude polysaccharide after removing protein by ion exchange chromatography, respectively with NaCI solution of different concentration gradient elution were isolated by dialysis after desalting concentrating, freeze drying, the sunflower stem core high antitumor activity of polysaccharide HALWP 4. Compared with the prior art, the invention has the anti-tumor effect of purified water soluble active polysaccharide isolated from sunflower stem core in the activity tracking separation method, and the traditional purification of chemical composition of monomer activity test method, can greatly reduce the blindness in work and result in in the process of separating the active ingredient loss.
【技术实现步骤摘要】
一种具有抗肿瘤活性的向日葵茎芯多糖的提取分离方法
本专利技术涉及向日葵茎芯多糖
,特别是涉及具有抗肿瘤活性的向日葵茎芯多糖及四种分级组分HALWP-1、HALWP-2、HALWP-3、HALWP-4及其提取分离方法。
技术介绍
自21世纪以来,癌症严重威胁着人类的生命,据报导我国每年因癌症死亡的人数约为150万,因此寻找一种可以高效的杀伤或者抑制肿瘤细胞,而对正常细胞不具有毒性或具有保护作用的药物十分重要。目前用于治疗癌症的化学药物有许多不足之处,例如药物在作用于癌症肿瘤细胞的同时也对正常细胞产生了毒副作用,使患者产生严重的不良反应,或有在治疗肿瘤的同时诱发了另外一种肿瘤的可能性。近年来基于天然植物药具有毒副作用较低、无致突变性及可以通过增强自身免疫力而促进癌症肿瘤细胞凋亡等特点,对其抗癌抗肿瘤作用的研究不断深入。向日葵(拉丁文:Helianthusannuus.L)为菊科向日葵属植物,别名望日莲、太阳花、向阳花。向日葵现于我国的东、西部地区和内蒙古等地均有广泛栽培。据我国药典记载,向日葵的茎、叶、盘、根均有治疗疾病的作用。向日葵茎芯为向日葵的茎内髓芯,又名向日葵茎髓、向日葵瓤、葵花秆心、葵秆。其化学成分主要为多糖类,同时也含黄酮、酚酸、不饱和脂肪酸、萜、香豆素类等。向日葵茎芯水煎液可以明显抑制小鼠的移植瘤,它还可以破坏亚硝胺,从而达到防治癌症的目的。多年以来,杭州市第二人民利用向日葵茎芯煎液治疗胃癌的结果表明,胃癌转移的患者可以通过口服葵芯煎液来使病情得到有效的缓解。据研究表明,向日葵的茎心多糖能够增强小鼠免疫功能。向日葵茎芯中主要的活性成分可能是 ...
【技术保护点】
一种具有抗肿瘤活性的向日葵茎芯多糖的提取分离方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)取于秋季采收的向日葵的秆,将向日葵茎芯剥离出来,置于阴凉处自然风干,再放入40℃烘箱中干燥8h。将干燥的向日葵茎芯用粉碎机粉碎后备用。(2)取一定量干燥的向日葵茎芯粉末,过筛,用95%乙醇回流提取两次,以去除脂溶性成分;再用80%乙醇回流提取两次,以除去单糖和低聚糖。所得残渣烘干,挥发去除有机溶剂后,在一定的料液比、浸提时间和浸提温度下,对向日葵茎芯多糖进行多次浸煮提取。(3)收集合并多次浸煮提取所得提取液,将提取液过滤后减压浓缩后加入95%乙醇,静置24h,3000r/min离心15min得沉淀,将所得沉淀用丙酮、乙醇洗涤并烘干,即得到向日葵茎芯多糖粗产品。(4)根据苯酚‑硫酸法测定上述多糖粗产品在490nm波长处的吸光度,并以多糖提取率为考察指标,测定得到的多糖粗产品中多糖的含量为85.37%。(5)取上述多糖粗产品,经过除蛋白后,溶解于纯化水中,过DEAE纤维素DE‑52离子交换柱进行分离,以一定的流速,依次用4种不同浓度的NaCI溶液梯度洗脱,收集四种洗脱组分,经透析、浓缩、冷冻干燥,得到四种不同 ...
【技术特征摘要】
1.一种具有抗肿瘤活性的向日葵茎芯多糖的提取分离方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)取于秋季采收的向日葵的秆,将向日葵茎芯剥离出来,置于阴凉处自然风干,再放入40℃烘箱中干燥8h。将干燥的向日葵茎芯用粉碎机粉碎后备用。(2)取一定量干燥的向日葵茎芯粉末,过筛,用95%乙醇回流提取两次,以去除脂溶性成分;再用80%乙醇回流提取两次,以除去单糖和低聚糖。所得残渣烘干,挥发去除有机溶剂后,在一定的料液比、浸提时间和浸提温度下,对向日葵茎芯多糖进行多次浸煮提取。(3)收集合并多次浸煮提取所得提取液,将提取液过滤后减压浓缩后加入95%乙醇,静置24h,3000r/min离心15min得沉淀,将所得沉淀用丙酮、乙醇洗涤并烘干,即得到向日葵茎芯多糖粗产品。(4)根据苯酚-硫酸法测定上述多糖粗产品在490nm波长处的吸光度,并以多糖提取率为考察指标,测定得到的多糖粗产品中多糖的含量为85.37%。(5)取上述多糖粗产品,经过除蛋白后,溶解于纯化水中,过DEAE纤维素DE-52离子交换柱进行分离,以一定的流速,依次用4种不同浓度的NaCI溶液梯度洗脱,收集四种洗脱组分,经透析、浓缩、冷冻干燥,得到四种不同的洗脱组分HALWP-1、HALWP-2、HALWP-3和HALWP-4,分别测定各不同洗脱组分的体内抗肿瘤活性,其中抗肿瘤活性最好的为HALWP-4。2.根据权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的向日葵茎芯多糖的提取分离方法,其特征在于:步骤(2)中向日葵茎芯粉末所...
【专利技术属性】
技术研发人员:祖元刚,姜守刚,谭笑,吴磊,袁颖洁,张星垚,魏亮,吴比,胡艳,孟祥东,张军,孙志强,赵修华,
申请(专利权)人:东北林业大学,祖元刚,
类型:发明
国别省市:黑龙江,23
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