一种杯苋甾酮的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种杯苋甾酮的制备方法，其制备方法是：A.取川牛膝粗粉，用乙醇或甲醇提取后除渣；B.将提取液浓缩，再经大孔树脂吸附洗脱；C.制备液相分离；D.庚烷-丙酮重结晶，得到纯度98.5％以上的杯苋甾酮结晶产品。本发明专利技术方法简单、得率高，可一次性得到大量高纯度产品，具有较高的经济价值和学术价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然植物提取领域，具体涉及ー种杯苋留酮的制备方法。
技术介绍
川牛膝为常用中药，是著名的川产道地中药材。具有逐瘀通经、通利关节、利尿通淋之功效,用于经闭癥瘕、胞衣不下、跌扑损伤、风湿痹痛、足痿筋挛、尿血血淋。川牛膝的主要成分为生物碱和留醇类物质，如杯苋留酮、头花蒽草留酮、促脱皮留酮、红留酮等，另外还有阿魏酸。川牛膝的主要药理作用有活血通经、祛风湿、通利关节、利尿通淋，以及对高血压性心脏病和痛经等疾病的治疗作用。杯觅甾酮(cyasterone)分子式C29H44O8,分子量 520. 65, mp. 168-173 V,为无色针状結晶。杯苋留酮在白毛夏枯草和川牛膝均有分离得到，但在川牛膝中的含量较高。T. Konoshima等报道，从白毛夏枯草中分离得到的杯苋甾酮对由肿瘤细胞生长促进剂12-0-te-trade canoylphorbo 1-13-acetate (TPA)诱导产生的 Epstein-Barr 病毒早期抗原(EBV-EA)具有強烈的抑制作用，并显出潜在的抗肿瘤活性。黎万寿等研究发现杯苋甾酮对去势小鼠的体重和子宮系数有増加趋势，子宮湿重有显著增长，提示其为川牛膝的雌激素样活性的有效成分；杯苋留酮能増加去势大鼠提肛肌重量，提示其有蛋白质同化作用；实验结果表明，杯苋留酮的药理活性与川牛膝强筋健骨“其滋补之功如牛之多力也”相符，与中医临床用药功能主治基本吻合。目前主要采用溶剂萃取、常压反复硅胶柱层析或氧化铝柱层析进行分离，存在产量小、得率低、生产周期长等问题，不适用于エ业生产。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供ー种杯苋留酮的制备方法，该方法操作简单、得率高、安全环保，可快速大量分离高纯度杯苋甾酮。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下(I)提取取川牛膝药材粉碎成粗粉，加甲醇或こ醇加热至65°C _85°C，恒温浸泡2-4小时，滤出，滤液减压回收得川牛膝浸膏；(2)大孔树脂柱富集将川牛膝浸膏过大孔吸附树脂柱，用水和こ醇洗脱，醇洗脱液浓缩后得到浓缩液；(3)制备液相分离取一定量的浓缩液，用甲醇溶解上反相C18色谱柱，用こ酸こ酷-甲醇或氯仿-甲醇作为流动相，梯度洗脱，紫外检测器检测流出液，根据所得的色谱图收集杯苋留酮组分，将洗脱液旋转蒸发浓缩，得杯苋留酮粗晶；(4)重结晶将杯苋甾酮粗晶用庚烷-丙酮重结晶，冷冻干燥得到高纯度杯苋甾酮晶体。 步骤(2)所述大孔树脂可选D1300、AB-8、D101、HPD100等非极性或弱极性大孔吸附树脂。步骤(2)所述大孔吸附树脂洗脱用こ醇溶液体积百分比为70-80%，洗脱用量为原药材的6-12倍。步骤(3)所述流动相こ酸こ酷-甲醇中甲醇的体积百分比为20-80%。步骤(3)所述流动相氯仿-甲醇中甲醇的体积百分比为20-80%。步骤(3)所述洗脱梯度程序如下 色谱柱填料为C18，流动相为こ酸こ酯或氯仿(A)和甲醇(B)，洗脱梯度见下表，流速为2-10ml/min，柱温为室温。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种杯苋留酮的制备方法，其特征在于它包括以下步骤 (1)提取取川牛膝药材粉碎成粗粉，加甲醇或乙醇加热至65°C_85°C，恒温浸泡2-4小时，滤出，滤液减压回收得川牛膝浸膏； (2)大孔吸附树脂柱富集将川牛膝浸膏过大孔吸附树脂柱，用水和乙醇洗脱，醇洗脱液浓缩后得到浓缩液； (3)制备液相分离取一定量的浓缩液，用甲醇溶解上反相C18色谱柱，用乙酸乙酯-甲醇或氯仿-甲醇作为流动相，梯度洗脱，收集杯苋留酮组分，将洗脱液旋转蒸发浓缩，得杯苋甾酮粗晶； (4)重结晶将杯苋留酮粗晶用庚烷-丙酮重结晶，冷冻干燥得到高纯度杯苋留酮晶体。2.根据权利要求I所述的杯苋甾酮的制备方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：李法庆，刘东锋，
申请(专利权)人：苏州宝泽堂医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：