一种肝素钙化合物及其制法制造技术

本发明专利技术公开了一种肝素钙化合物及其制法，该制法包括：将低分子肝素钙粗品溶于水中，搅拌下滴加非氧化还原性酸；加入活性炭吸附，然后过滤，再将滤液用超滤膜超滤浓缩；向浓缩液中加入氧化钙或氢氧化钙，剧烈搅拌；向溶液中加入中性氧化铝搅拌均匀，加到中性氧化铝制备型色谱柱上端进行分离纯化，收集洗脱液；向洗脱液中加入乙醇；梯度降温，析出沉淀；将沉淀干燥，得到精制的低分子肝素钙。该方法工艺简单，操作方便，成本低，适合于规模化生产，而且提高了低分子肝素钙化合物的纯度，保障了其在抗凝血药物中的安全性，提高了制剂产品质量，减少了毒副作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种肝素钙化合物，尤其是低分子肝素钙，以及其制法，属于医药

技术介绍
肝素钙，即低分子肝素钙或低分子量肝素钙，其化学名称硫酸氨基葡聚糖钙。抗血栓药物包括肝素类、非肝素抗血小板凝集药物、酶类及其他四个小亚类，肝素类和酶类基本上以生化药物为主。其中肝素类占有最大的市场份额，在肝素类中又以肝素类药物占主导，低分子肝素钙和低分子肝素钠分别占有整个抗血栓类药物20%和7%的市场份额。生物活性肝素自被发现虽已有80余年的历史，但由于到目前为止还没有一种能完全替代它的产品，所以它仍然是最重要的生化药物之一，其在临床的应用已有60余年的历史，它是预防手术后血栓形成和治疗急性静脉血栓的首选药物。除此之外，肝素或其衍生物还用于调血脂、抗炎、抗过敏以及免疫调节等方面。普通肝素是含多种氨基葡聚糖苷的混合物。肝素钙在体内外均能延缓或阻止血液凝固。其抗凝机理复杂，对凝血的各个环节均有作用，包括抑制凝血酶原转变为凝血酶、抑制凝血酶活性，妨碍纤维蛋白原转变为纤维蛋白、防止血小板聚集。肝素钙还可降低血脂， 改变血液粘稠度，改善冠状动脉循环等作用。肝素钙的抗FIIa作用较肝素钠强，抗FXa作用较肝素钠弱。由于其是以钙盐形式在体内发挥作用，经皮下注射后，在血液循环中缓慢扩散，不会减少局部细胞间毛细血管的钙胶质，也不改变血管通透性，几乎无肝素钠皮下注射可引起局部出血的副作用。适用于预防和治疗血栓-栓塞性疾病以及血栓形成。肝素钙还具有较明显的抗肾素和抗醛固酮活性，故亦适用于人工肾、人工肝和体外循环使用。近年来的研究发现，肝素钙还有调血脂、抗炎、抗补体、抗过敏、免疫调节等多种非抗凝方面的药理作用。CN101649008A公开了一种低分子量肝素钠盐的生产工艺，它是由以低分子量肝素钠粗品为原料生产低分子肝素钠的工艺，包括制备肝素钠溶液、降解液、中和液、收集沉淀物、制低分子肝素钠粗品、制低分子肝素钠精品等工艺步骤。但是这种制作过程只是常规的精制过程，效果不是很好。CN101519459A公开了一种低分子量肝素钠(钙)的生产工艺，包括取肝素钠溶液，加入亚硝酸钠溶液，进行裂解；碱调节裂解液，再用阴离子交换柱吸附杂质；洗涤，得到超低分子肝素钠(钙)；用超滤膜过滤，再用乙醇得到沉淀物；经脱盐，脱水后，再沉淀，经冷冻干燥后制得成品超低分子肝素钠(钙)；CN101012289A公开了一种肝素钙生产工艺。它是由低分子肝素钠转变而来，包括解聚、还原、转钙，过滤、浓缩等步骤。然而这些制备方法过程都过于繁琐，制作周期较长，不适合工业化生产。由于肝素钙在强碱环境和高温环境下容易发生破坏，更容易发生水解。因此，特别需要一种可以简单有效地精制肝素钙的理想方法，并提高制剂产品的质量。
技术实现思路
本专利技术需要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种低分子肝素钙化合物及其纯化方法，可以简单有效地精制低分子肝素钙，适合于工业化大生产，而且方法简单，产品纯度高，并且提高了制剂产品的质量，减少了毒副作用。申请人:在现有文献的基础上，通过大量筛选实验，发现上述文献以及一般的纯化分离方法难于获得高纯度的化合物。本专利技术人经过长期认真的研究，意外发现了一种低分子肝素钙化合物的纯化方法，解决了目前合成的低分子肝素钙纯度低的缺点，不但工艺简单，操作方便，成本低，而且提高了纯度，保障了用药的安全性，减少了毒副作用。本专利技术方法可以用于低分子肝素钙制备的后处理过程，也可用于纯度不合格的低分子肝素钙粗品的纯化，包括以下步骤步骤1，将要纯化的低分子肝素钙溶于水中，充分搅拌下滴加非氧化还原性酸，直至溶液PH值约为1-4 ； 步骤2，加入活性炭吸附，搅拌，然后依次用板框和滤膜过滤，然后再将滤液用超滤膜超滤浓缩；步骤3，向浓缩液中加入氧化钙或氢氧化钙，剧烈搅拌，直至体系的pH值为6 7 ;步骤4，向溶液中加入中性氧化铝搅拌均匀，加到中性氧化铝制备型色谱柱上端进行分离纯化，收集洗脱液；步骤5，向洗脱液中加入乙醇，搅拌；步骤6,梯度降温,析出沉淀；步骤7，将沉淀真空干燥或在干燥剂上干燥，得到精制的低分子肝素钙。以下具体描述本专利技术。在本专利技术的步骤I中，将要纯化的低分子肝素钙溶于水中，充分搅拌下滴加非氧化还原性酸，直至溶液pH值约为1-4。本专利技术人发现，酸碱的选用以及其pH值的控制对产品的纯化和质量非常重要。步骤I中所述的酸优选不具有氧化还原性的酸，例如选自盐酸、乙酸、磷酸和硫酸中的一种， 优选盐酸，而不采用硝酸或甲酸，一般也不采用浓硫酸。加入酸至溶液的pH值为1-4，优选 2-3。在本专利技术步骤2中，加入活性炭吸附，搅拌，然后依次用板框和滤膜过滤，然后再将滤液用超滤膜超滤浓缩。活性炭的加入量为溶液总体积O. 1-0. 8% (g/ml)，优选O. 2-0. 5% (g/ml)的活性炭，保持温度为5-20°C，优选8-15°C，更优选10-12°C，搅拌15_240min，优选30_120min，更优选 45_60min。过滤所用的滤膜为O. 1-0. 5 μ m,优选O. 2-0. 4 μ m,更优选O. 3 μ m的滤膜，然后再将滤液用超滤膜超滤浓缩，所述超滤膜为8000-18000D，优选9000-15000D，更优选 10000-12000D的超滤膜，获得浓缩液。在本专利技术的步骤3中，向浓缩液中加入氧化钙或氢氧化钙，剧烈搅拌，直至体系的 pH值为6 7。无论是氢氧化钙还是能够与水形成氢氧化钙的氧化钙，都有助于体系的pH值升高，而且也不会增加含有低分子肝素钙体系中除钙以外的其他阳离子，因此避免了不同于钙离子的其他阳离子的分离过程。在本专利技术的步骤4中，向溶液中加入中性氧化铝搅拌均匀，加到中性氧化铝制备型色谱柱上端进行分离纯化，收集洗脱液。本申请人经过长期认真的大量研究，分离纯化过程中，筛选了硅胶、氧化铝或大孔树脂等各种填料色谱柱，例如硅胶的粒径为45-250 μ m、孔径为80-100Α的硅胶；氧化铝或中性氧化铝粒径为18-200 μ m的氧化铝或中性氧化铝，大孔树脂型号为AmberliteXAD-6、 AmberliteXAD-7、AmberliteXAD-8、Diaion HP2MG、⑶X-501、HPD400、HPD450、HPD750、 AmberliteXAD-9、AmberliteXAD-10、⑶X-401、⑶X-601等大孔树脂，本专利技术人意外发现应用大孔树脂对产品的纯度并没有明显改善，硅胶也不理想，而专用的中性氧化铝不仅可以充分吸附上柱物中的成分杂质及其它色素，还对本品纯化有着独到的意外效果，而且操作较简易。所述制备型色谱柱的固定相为粒径为18-200 μ m,孔径约6nm的细孔中性氧化铝。 所述中性氧化铝可以例如为供应商ICN的ICN alIumina N优选粒径为18-63 μ m，孔径为 6nm的细孔中性氧化铝，pH 7. 0，优选粒径为18-32 μ m,孔径为6nm的细孔中性氧化铝，pH7.O。或者，中性氧化铝例如为供应商Baker柱层析专用中性氧化铝，粒径为50-200 μ m,孔径为 6nm, pH 7. O 或 pH 6· 5。每次纯化药物的质量与色谱柱填料的质量之比为I : 10-200，优选质量比为 I 15-100。流动相的用量只要满足将药物基本上本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陶灵刚，赵雁鸿，
申请(专利权)人：海南灵康制药有限公司，
类型：发明
国别省市：