一种辛酸纯化处理的抗毒素血清制备方法，包括以下步骤：胃蛋白酶消化；第一次沉淀及加温变性处理；第二次沉淀处理；明矾沉淀处理；超滤浓缩处理；原液配制。本发明专利技术在制备方法中增加了辛酸纯化的步骤，使抗毒素血清产品质量指标更高，使用更安全，与原有制备工艺相比，抗毒素血清产品的主要质量指标中，F（ab）2的含量从50-60%提高到80%以上，产品的比活纯度（单位/克蛋白）从35000-45000提高到78000以上，使抗毒素血清制品临床应用时的过敏反应发生率和血清病的发生率减少30%-40%。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及ー种。
技术介绍
抗毒素血清，可称为抗毒素、也称为抗血清，是由相应毒素或类毒素、細菌、病毒免疫动物(主要为马属动物)所得的免疫血浆(血清)，经胃蛋白酶消化、硫酸铵盐析制得的免疫球蛋白制剂，其制备方法为《中国生物制品规程》及《中国药典》公开的技木。目前，抗毒素血清的制备方法一般包括以下步骤1、胃蛋白酶消化，用纯化水或注射用水将各种免疫血浆(血清)稀释，并用胃蛋白酶进行消化处理得到消化液；2、第一次沉淀及加温变性处理， 消化液中加入硫酸铵，并调节PH值，然后将消化液加温并保持，再降温，过滤收集上清液， 废弃沉淀物；3、第二次沉淀处理，即在上述上清液中加入硫酸铵，静置后过滤取沉淀物，废弃上清液；4、明矾沉淀处理，将上述沉淀物稀释，加入明矾溶液，静置后过滤取上清液，废弃沉淀物；5、超滤浓缩处理，将上述上清液进行超滤脱盐并浓缩；6、原液配制，在超滤浓缩液中添加氯化钠、防腐剤，调节PH，除菌过滤，即制得抗毒素血清原液。该エ艺的不足之处是，制备的抗毒素血清制品F (ab)2的含量及比活(単位/克蛋白)较低，在临床应用时过敏反应发生率和血清病的发生率较高。
技术实现思路
本专利技术的目的就是提供ー种，该制备方法能提高抗毒素血清制品的F (ab) 2的含量及比活纯度(単位/克蛋白)，减少抗毒素血清制品临床应用时的过敏反应发生率和血清病的发生率。本专利技术的，包括以下步骤1、胃蛋白酶消化，使用现有常规エ艺；2、第一次沉淀及加温变性处理，消化结束后，按每IOOml消化液加入10-20g的硫酸铵， 调节pH至5. 20-5. 60，加温至58士 1°C，保温30分钟。保温完毕，降温至45°C以下，按IOOml 消化液加入0. 5-0. 8g硅藻土，搅拌均勻后，将消化液泵入板框式压滤机进行过滤分离，过滤收集上清液，废弃沉淀物，再将上清液，按0. 5-8. 0%的体积比例加入辛酸液，调节pH至 4. 00-7. 00，搅拌时间0. 5-4. 0小时，处理完毕，按IOOml溶液加入0. 5-0. 8g硅藻土，搅拌均勻后，将消化液泵入板框式压滤机进行过滤分离，过滤收集上清液，废弃沉淀物，所述的 PH值调节，使用的调节剂为1-2M的氢氧化钠、盐酸；3、第二次沉淀处理，使用现有常规エ艺；4、明矾沉淀处理，使用现有常规エ艺；5、超滤浓缩处理，使用现有常规エ艺；6、原液配制，使用现有常规エ艺。上述辛酸纯化抗毒素血清的原理是经过胃酶消化和硫酸铵处理后的过滤上清液，在酸性条件下，ー些残留的非IgG的蛋白成份(包括白蛋白，部分Ig等)能被辛酸等短3链脂肪酸沉淀；而上清中剰余的蛋白主要为IgG及其片段。由于减少了杂蛋白的含量，因而可获得纯度较高的抗毒素血清。所述的抗毒素血清包括破伤风抗毒素、白喉抗毒素、气性坏疽抗毒素、肉毒抗毒素、抗狂犬病血清、各类抗蛇毒血清的液体制剂和冻干制剂。所述的各种动物免疫血浆(血清)包括以下动物来源马、骡、驴、猪、羊、牛、兔、骆驼。本专利技术的，在制备エ艺中増加了辛酸纯化的步骤，使抗毒素血清产品质量指标更高，使用更安全，与原有制备エ艺相比，抗毒素血清产品的主要质量指标中，F (ab) 2的含量从50-60%提高到80%以上，产品的比活纯度(単位/ 克蛋白)从35000-45000提高到78000以上，使抗毒素血清制品临床应用时的过敏反应发生率和血清病的发生率减少30%-40%。所添加的辛酸，可以利用超滤浓缩エ艺去除，并可按照 《中国药典》(2010年版)规定的要求进行残留測定。具体实施例方式ー种，包含下述步骤1、胃蛋白酶消化，将检定合格的免疫血浆，按血浆量的2-4倍加入纯化水稀释，调pH至 2. 90-3. 50，根据稀释液总量按每ml稀释液加入3_10个活力単位的胃酶，加0. 2% (ml/ml) 甲苯(或不加)，控制消化液温度于30士 1°C，消化1-1. 5小时；2、第一次沉淀及加温变性处理方法，消化结束后，按每IOOml消化液加入10-20g的硫酸铵，调节PH至5. 20-5. 60，加温至58士 1°C，保温30分钟，保温完毕，降温至45°C以下，按 IOOml消化液加入0. 5-0. Sg硅藻土，搅拌均勻后，将消化液泵入板框式压滤机进行过滤分离。过滤收集上清液，废弃沉淀物，再将上清液按0. 5-8.0%的体积比例加入辛酸液，调节 pH至4. 00-7. 00，搅拌时间0. 5-4. 0小时。处理完毕，按IOOml溶液加入0. 5-0. 8g硅藻土， 搅拌均勻后，将消化液泵入板框式压滤机进行过滤分离，过滤收集上清液，废弃沉淀物；3、第二次沉淀处理，将上述清液泵入已灭菌的消化配液罐内，调pH至7.20-7. 40，每 IOOml加入19-21g硫酸铵，搅拌均勻后，按IOOml滤液加入0. 8_lg硅藻土，搅拌，将过滤液泵入板框式压滤机进行过滤分离，过滤收集沉淀物，废弃上清液；4、明矾沉淀处理，将注射用水注入已灭菌的消化配液罐中，冷却至30°C以下，然后将上述沉淀加入注射用水中溶解稀释至蛋白含量不超过洲(g/ml)，按不低于0.8%(g/ml)的浓度加入明矾溶液，调节PH至7. 70-7. 90，搅拌吸附0. 5-lh后，泵入板框式压滤机进行过滤分离，过滤收集上清液，废弃沉淀物；5、超滤浓縮，将上述明矾吸附后过滤之清液经预滤后泵入超滤罐，再经超滤器进行超滤浓縮，直至使超滤浓缩液中的硫酸铵含量在1. Og/L以下；6、原液配制，将上述硫酸铵含量达标之超滤浓缩液泵入配制罐，根据所需原液效价补加注射用水，按8. 0 — 8. 5g/L加入氯化钠，然后按2. 0 — 2. 5g/L加入间甲酚作为防腐剤， 调pH至6. 0-7. 0，除菌过滤得抗毒素血清原液。抗毒素原液应置于2-8°C避光处，保存至少1个月作为稳定期。按《中国药典》(2010年版)标准方法进行測定，本专利技术ェ艺制备的抗毒素血清原液，质量指标有相应的提高权利要求1.ー种，包括以下常规步骤(1)、胃蛋白酶消化；(2)、第一次沉淀及加温变性处理；(3)、第二次沉淀处理；(4)、明矾沉淀处理；(5)、超滤浓缩处理；(6)、原液配制，其特征在于所述步骤(2)的具体エ艺是，步骤(1)消化结束后，按每IOOml消化液加入10-20g的硫酸铵，调节pH至5. 20-5. 60，加温至58士 1 °C，保温30分钟，保温完毕，降温至45°C以下，按IOOml消化液加入0. 5-0. Sg硅藻土，搅拌均勻后，将消化液泵入板框式压滤机进行过滤分离；过滤收集上清液，废弃沉淀物，再将上清液按0. 5-8. 0%的体积比例加入辛酸液，调节pH至4. 00-7. 00，搅拌时间0. 5-4. 0小时；处理完毕，按IOOml溶液加入0. 5-0. Sg硅藻土，搅拌均勻后，将消化液泵入板框式压滤机进行过滤分离，过滤收集上清液，废弃沉淀物。2.根据权利要求1所述的，其特征在于所述的 PH值调节，使用的调节剂为1-2M的氢氧化钠、盐酸。全文摘要一种，包括以下步骤胃蛋白酶消化；第一次沉淀及加温变性处理；第二次沉淀处理；明矾沉淀处理；超滤浓缩处理；原液配制。本专利技术在制备方法中增加了辛酸纯化的步骤，使抗毒素血清产品质量指标更高，使用更安全，与原有制备工艺相比，抗毒素血清产品的主要质量指标中，F本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：季冲，姚晓东，邓大义，敬伟，
申请(专利权)人：江西生物制品研究所，
类型：发明
国别省市：
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