本发明专利技术公开了一种提取纯化芸苔抗毒素的方法，方法是以芥菜叶为原料，以CO2为溶剂进行超临界提取2-4小时，解析物用氨水调节pH至9，加入二氯甲烷萃取，二氯甲烷萃取液加入氧化铝中压柱，水洗至中性，再用二氯甲烷-甲醇混合溶液洗脱，TLC跟踪检测，收集高浓度流分，回收试剂，干燥得芸苔抗毒素。本发明专利技术工艺简单、污染小、得率高、产品纯度高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物有效成分提取分离领域，具体涉及ー种提取纯化芸苔抗毒素的方法。
技术介绍
芸苔抗毒素(Brassilexine)为白色微晶，是ー种吲哚生物碱，分子式为C9H6N2S,分子量为174. 23,来源于十字花科(Cruciferae) 菜Brassica juncea L.的叶。药理研究表明，芸苔抗毒素具抗肿瘤作用，抑制人癌细胞生长，其LD50为8μ g/mL ο在浓度为20 μ g/mL时，其具细胞毒活性，能100%抑制KB细胞。此外芸苔抗毒素在体外还有抗真菌活性。芥菜，(学名-.Brassica juncea L),是芸苔属一年生或二年生草本。又名雪里蕻。具有宣肺豁痰，温中利气的功效，主治寒饮内盛，咳嗽痰滞，胸隔满闷。耳目失聪、牙龈肿烂、寒腹痛、便秘等病症。性温味辛。入肺、胃、肾经。芥菜含有维生素A、B族维生素、维C和维D等。芥菜含有大量的抗坏血酸，是活性很强的还原物质，參与机体重要的氧化还原过程，能增加大脑中氧含量，激发大脑对氧的利用，有提神醒脑，解除疲劳的作用。目前对芥菜化学成分研究较少，尚未见芸苔抗毒素的相关提取研究报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供，该方法エ艺简单、污染小、得率高、产品纯度高。为了解决上述技术问题，本专利技术的技术方案如下 以芥菜叶为原料，投入萃取釜中，采用超临界CO2萃取2-4小吋，收集萃取物，用氨水调节PH至9，加入ニ氯甲烷萃取，ニ氯甲烷萃取液加入氧化铝中压柱，水洗至中性，再用ニ氯甲烷-甲醇混合溶液洗脱，TLC跟踪检测，收集高浓度流分，回收试剂，干燥得芸苔抗毒素产品O所述超临界CO2萃取条件为萃取温度为35-55°C，萃取压カ为20_28MPa，分离釜I温度为25-45°C，压カ为10-18MPa，分离釜II温度为20_35°C，压カ为4_8MPa。所述氧化铝为中性氧化铝，目数为200-400目。所述ニ氯甲烷-甲醇梯度洗脱顺序为依次按体积比ニ氯甲烷-甲醇20:1、10:1、5:1、5:2进行洗脱。本专利技术的有益效果在于采用超临界CO2萃取，具有操作温度低，选择性好，操作条件较温和，制取的产品纯度高，萃取无残留，是ー种高效环保的萃取方法；采用中压氧化铝柱分离，可进行大量制备；本专利技术エ艺稳定，可用于エ业化生产。下面将结合具体实施方式进ー步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施例方式 实施例I:将芥菜叶粉碎，过20目筛，称取IOkg加入萃取釜中，开启机器，调节參数萃取温度为35°C，萃取压カ为28MPa，分离釜I温度为25°C，压カ为18MPa，分离釜II温度为20°C，压カ为8MPa，以40L/h的流速通入CO2萃取2小时，解析萃取物，用氨水调节pH至9，再加入ニ氯甲烷萃取多次，收集合并ニ氯甲烷萃取液，减压浓缩后加入氧化铝中压柱(400目的中性氧化铝，柱径高比为1:5)，依次按体积比ニ氯甲烷-甲醇20:1、10:1、5:1、5:2进行洗脱，TLC跟踪检测，收集高浓度流分，回收试剂，干燥得芸苔抗毒素产品408mg，含量为95. 3%。实施例2: 将芥菜叶粉碎，过20目筛，称取IOkg加入萃取釜中，开启机器，调节參数萃取温度为55°C，萃取压カ为20MPa，分离釜I温度为45°C，压カ为lOMPa，分离釜II温度为35°C，压カ为8MPa，以40L/h的流速通入CO2萃取4小时，解析萃取物，用氨水调节pH至9，再加入ニ氯甲烷萃取多次，收集合并ニ氯甲烷萃取液，减压浓缩后加入氧化铝中压柱(200目的中性氧 化铝，柱径高比为1:7)，依次按体积比ニ氯甲烷-甲醇20:1、10:1、5:1、5:2进行洗脱，TLC跟踪检测，收集高浓度流分，回收试剂，干燥得芸苔抗毒素产品375mg，含量为89. 3%。实施例3 将芥菜叶粉碎，过20目筛，称取IOkg加入萃取釜中，开启机器，调节參数萃取温度为45°C，萃取压カ为25MPa，分离釜I温度为28°C，压カ为15MPa，分离釜II温度为25°C，压カ为6MPa，以40L/h的流速通入CO2萃取3小时，解析萃取物，用氨水调节pH至9，再加入ニ氯甲烷萃取多次，收集合并ニ氯甲烷萃取液，减压浓缩后加入氧化铝中压柱(300目的中性氧化铝，柱径高比为1:7)，依次按体积比ニ氯甲烷-甲醇20:1、10:1、5:1、5:2进行洗脱，TLC跟踪检测，收集高浓度流分，回收试剂，干燥得芸苔抗毒素产品345mg，含量为91. 6%。实施例4: 将芥菜叶粉碎，过20目筛，称取20kg加入萃取釜中，开启机器，调节參数萃取温度为38°C，萃取压カ为26MPa，分离釜I温度为28°C，压カ为14MPa，分离釜II温度为22°C，压カ为5MPa，以60L/h的流速通入CO2萃取4小时，解析萃取物，用氨水调节pH至9，再加入ニ氯甲烷萃取多次，收集合并ニ氯甲烷萃取液，减压浓缩后加入氧化铝中压柱(400目的中性氧化铝，柱径高比为1:6)，依次按体积比ニ氯甲烷-甲醇20:1、10:1、5:1、5:2进行洗脱，TLC跟踪检测，收集高浓度流分，回收试剂，干燥得芸苔抗毒素产品754mg，含量为93. 4%。本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.1、一种提取纯化芸苔抗毒素的方法，其特征在于包括以下步骤以芥菜叶为原料，投入萃取釜中，采用超临界CO2萃取2-4小时，收集萃取物，用氨水调节pH至9，加入二氯甲烷萃取，二氯甲烷萃取液加入氧化铝中压柱，水洗至中性，再用二氯甲烷-甲醇混合溶液洗脱，TLC跟踪检测，收集高浓度流分，回收试剂，干燥得芸苔抗毒素产品。2.2、如权利要求I所述的一种提取纯化芸苔抗毒素的方法，其特征在于所述超临界CO2萃取条件为萃取温度为35-55...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，杨成东，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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