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一种利用亲和双水相系统提高凝血因子Ⅷ及其类似物分离效率、纯度与生物比活性的方法技术方案

技术编号:7594301 阅读:257 留言:0更新日期:2012-07-21 14:43
本发明专利技术公开了一种提高凝血因子VIII及其类似物分离效率、纯度与生物比活性的简单、快捷方法。此方法基于应用亲和双水相技术,即将特征亲水高分子化合物,优选聚乙二醇(PEG),与磷酸盐、或葡聚糖、或其它第二组份在水溶液中形成稳定亲和双水相,其核心技术之一是:实现PEG与凝血因子VIII特异性亲和小肽配位体共价连接。凝血因子VIII优先地定位于连接了亲和小肽配位体的特征亲水高分子化合物相中,而来自细胞提取物的大部分蛋白(或称杂蛋白)倾向于移动至另一相。本发明专利技术通过改变目的蛋白或多肽在一相或另一相中的存在,从而得以高效和高纯度纯化所述蛋白或多肽。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种提高分离、纯化凝血因子VIII及其类似物效率及其生物活性的方法,属于生物制药领域,其关键是使用共价连接凝血因子VIII特异性亲和小肽配位体的特征亲水高分子化合物,优选聚乙二醇(PEG),使得特征亲水高分子化合物表面具有凝血因子VIII特异性亲和结合位点。此特异性亲和结合位点不但使凝血因子VIII与特征亲水高分子化合物发生很强的亲和吸附相互作用,而且决定了凝血因子VIII可以富集分散在亲和双水相中的特征亲水高分子化合物相(上相)。本专利技术方法可以将凝血因子VIII从含凝血因子VIII的体系,包括表达基因重组凝血因子VIII的含成千上万种蛋白质的复杂细胞体系或含凝血因子VIII的人血浆中简单、快捷、特异性地分离出来,且纯度、生物比活性、 回收率均大幅度提高。
技术介绍
凝血因子是参与血液凝固过程的各种蛋白质组分。它的生理作用是,在血管出血时被激活,和血小板粘连在一起并且补塞血管上的漏口。这个过程被称为凝血。凝血因子 VIII基因位于X染色体长臂末端(Xq28),长为186kb,由26个外显子组成,其中第14号外显子为3. lkb,是目前发现的人类最大的外显子之一。凝本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:汪志友
申请(专利权)人:汪志友
类型:发明
国别省市:

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