草叶马尾藻多糖提取物在改善肠道菌群防治糖尿病中的应用制造技术

本发明专利技术涉及草叶马尾藻多糖提取物在改善肠道菌群防治糖尿病中的应用。具体地，提供了一种草叶马尾藻多糖提取物，其制备方法为：干燥、粉碎，得到草叶马尾藻干粉；乙醇回流提取，得到干燥脱脂的草叶马尾藻粉末；微波对干燥脱脂的草叶马尾藻粉末以水为溶剂进行提取；提取液用聚乙二醇/无机盐或乙醇/无机盐双水相系统分离纯化；收集无机盐下相，采用超滤膜过滤浓缩，干燥，得到所述的草叶马尾藻多糖提取物。该草叶马尾藻多糖提取物纯度高、生物活性好，经动物实验证实能够显著改善肠道菌群，并明显提高小鼠的免疫力，因此可用于制备改善肠道菌群防治糖尿病等代谢性疾病的药品、保健品或食品。

【技术实现步骤摘要】
草叶马尾藻多糖提取物在改善肠道菌群防治糖尿病中的应用
本专利技术涉及马尾藻多糖提取物，具体地说，涉及一种新的草叶马尾藻多糖提取物，及其在改善肠道菌群防治糖尿病等代谢性疾病中的应用。
技术介绍
马尾藻(Sargassum)是褐藻门鹿角菜目马尾藻科植物。草叶马尾藻(Sargassum.graminifolium.turn)属于马尾藻属的一种，生长于低潮带和潮下带的岩礁上，藻体绿色或褐色，高约50厘米，在我国分布在浙江舟山、象山、福建、广东及澳门沿海，资源十分丰富。马尾藻同其他类的海藻一样也含有丰富的多糖、褐藻多酚、γ-亚麻酸、氨基酸和微量元素等多种生物活性物质；其中，马尾藻多糖是从马尾藻中提取出来的一种易溶于水、黏度较高的多糖复合物，更是因为其较高的药用价值而备受关注。海藻多糖是海藻所特有的一类多糖，具有广泛的生物活性，包括抗凝、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤和免疫调节活性。然而目前国内外对马尾藻多糖的研究多数集中于提取分离、结构分析及抗肿瘤、抗过敏和防治肾结石方面。近年来，越来越多的学者关注到肠道菌群对人类健康的重要性。人类与微生物共同进化了数百万年，在此过程中人体肠道形成大量正常菌群，这些菌群在肠道中通过特定的方式形成与宿主相互作用的生理性统一体，发挥营养、免疫、代谢等一系列生理作用。人类的某些疾病是由于微生物失衡造成的，而不是由于某种致病微生物的存在，比如过敏性疾病、肥胖、炎症性肠病等疾病的发生发展。菌群失调可引起二重感染或重叠感染。菌群失调的发生多见于使用抗生素和慢性消耗性疾病等。现阶段，对高脂高糖导致的肥胖和糖尿病等相关疾病预防及治疗尚无十分理想的方法，并且糖尿病患病率居高不下，已成为威胁人们健康的重大社会问题。近年大量研究表明，糖尿病患者肠道内的菌群结构、菌群比例以及菌群的数量均与正常人有异，肠道菌群结构失调可能会造成内毒素进入血液，诱发慢性炎症，从而破坏胰岛素受体、损伤血管、干扰脂代谢过程，最终导致肥胖、糖尿病等代谢性疾病。以肠道菌群为靶点研究代谢性疾病已成为慢性病防治的重要研究领域，但目前有确切效果的药物和天然产物并不多见。目前关于马尾藻多糖可调节肠道菌群，进一步防治代谢性疾病(如糖尿病、肥胖等)方面的用途还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供一种草叶马尾藻多糖提取物及其在改善肠道菌群防治代谢性疾病中的应用。本专利技术提供了一种草叶马尾藻多糖提取物，它是通过以下方法制备得到的：(a)将原料草叶马尾藻干燥后粉碎，过10-40目筛得到草叶马尾藻干粉；(b)向草叶马尾藻干粉中加入体积分数70％-90％的乙醇后回流提取2-4小时，料液体积比为1:5-10，回流结束后除去乙醇，烘干，得到干燥脱脂的草叶马尾藻粉末；(c)选用功率在500-1000瓦的微波对干燥脱脂的草叶马尾藻粉末以水为溶剂进行提取，料液体积比为1:10-30，每次微波处理时间为15-30分钟，共微波处理1-4次；(d)合并所有提取液，过滤，滤液利用聚乙二醇/无机盐或乙醇/无机盐双水相系统分离纯化，置于恒温振荡器中在40-50℃下振荡25-35分钟，静置；所述的聚乙二醇或乙醇的质量浓度为10％-40％，所述的无机盐选自硫酸铵、硫酸钠、磷酸氢二钾或氯化钠，质量浓度为10％-25％；(e)收集无机盐下相，采用超滤膜过滤浓缩，所述的超滤膜工作压力为0.1-0.6MPa，超滤膜的截留分子量为3000-20000Da，超滤时间20-40min，超滤温度30-40℃，对超滤膜过滤浓缩后的截留液进行冷冻干燥，得到所述的草叶马尾藻多糖提取物。优选地，步骤(d)中所述的双水相系统是聚乙二醇/无机盐，所述的无机盐是硫酸铵。更优选地，所述的聚乙二醇分子量为6000，质量浓度为10％-20％；所述的无机盐质量浓度为20％-25％。优选地，步骤(d)中温度为50℃。优选地，所述的草叶马尾藻多糖提取物中硫酸根含量为19.6％-25.6％。本专利技术还提供了所述的草叶马尾藻多糖提取物在制备改善肠道菌群的药品、保健品或食品中的应用。作为一种具体的实施方式，所述的改善肠道菌群是指增加肠道双歧杆菌和乳酸杆菌数量并降低肠道大肠杆菌和链球菌数量。本专利技术还提供了所述的草叶马尾藻多糖提取物在制备防治糖尿病或肥胖的药品、保健品或食品中的应用。本专利技术还提供了所述的草叶马尾藻多糖提取物在制备提高免疫力的药品、保健品或食品中的应用。本专利技术的草叶马尾藻多糖提取物可加入到饮用水、功能饮料、酒类、各类调味品、酸奶等乳制品、面包、面条等食品中，以充分发挥改善肠道菌群促进健康的作用。当本专利技术的草叶马尾藻多糖提取物用于制备药品、保健品或食品时，可制成各种形式的制剂形式，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液以及可以预想得到的纳米制剂和靶向给药制剂等。所述的制剂优选由重量百分比为1％-99％的草叶马尾藻多糖提取物和99％-1％的药用辅料或附加剂组成。本专利技术优点在于：本专利技术提供了一种草叶马尾藻多糖提取物，其纯度高、生物活性好，经动物实验证实该草叶马尾藻多糖提取物能够显著改善肠道菌群，并明显提高小鼠的免疫力，因此可用于制备改善肠道菌群的药品、保健品或食品，以用于防治糖尿病、肥胖等代谢性疾病。具体实施方式下面对本专利技术提供的具体实施方式作详细说明。实施例1本专利技术的草叶马尾藻多糖提取物的制备(一)1、方法步骤1.1草叶马尾藻多糖提取物的制备(1)将原料草叶马尾藻去除杂质并用水洗净，将洗净的草叶马尾藻放入烘干箱内，30℃干燥20小时至恒重，然后把干燥后的草叶马尾藻在粉碎机内粉碎得到粉末，过20目筛得到草叶马尾藻干粉，冷冻保藏备用。(2)向草叶马尾藻干粉中加入体积分数80％的乙醇后回流提取3小时左右，料液比(草叶马尾藻干粉体积:乙醇体积)为1:8。回流结束后滤去乙醇，然后将草叶马尾藻粉末放置于通风橱内使乙醇完全挥发，最后将草叶马尾藻粉末在烘干箱中干燥，干燥温度为30℃，干燥至恒重，备用。(3)取干燥脱脂的草叶马尾藻粉末用微波辅助提取：选用频率为2450MHz、功率在800瓦的微波对干燥脱脂的草叶马尾藻粉末以水为溶剂进行提取，料液比(干燥脱脂的草叶马尾藻粉末体积:水体积)为1:20，每次微波处理时间为20分钟，共微波处理3次。(4)合并所有提取液，过滤，滤液利用聚乙二醇(PEG)/无机盐双水相系统分离纯化草叶马尾藻多糖，双水相萃取体系中聚乙二醇分子量6000，质量浓度为10％；无机盐为硫酸铵，质量浓度为20％。置于恒温振荡器中在50℃下振荡30分钟。静置后分成两相，草叶马尾藻多糖进入无机盐下相。(5)得到的无机盐下相，采用超滤膜过滤浓缩，超滤膜工作压力为0.15MPa，膜的截留分子量为10000Da，超滤时间30min，超滤温度35℃。对超滤膜过滤浓缩后的截留液进行冷冻干燥，得到草叶马尾藻多糖提取物。1.2粗多糖得率、粗品中多糖含量、多糖提取率的测定(1)收集上述步骤(3)的微波提取液，浓缩成浸膏，烘干即得粗多糖。粗多糖得率％＝(所得总粗多糖质量/原料质量)×100％。(2)采用苯酚-硫酸比色法测定粗品中多糖的含量。以葡萄糖为标准品，准确称取标准葡萄糖20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6ml溶液至刻度试管中，再各以蒸馏水补至本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种草叶马尾藻多糖提取物，其特征在于，它是通过以下方法制备得到的：(a)将原料草叶马尾藻干燥后粉碎，过10‑40目筛得到草叶马尾藻干粉；(b)向草叶马尾藻干粉中加入体积分数70％‑90％的乙醇后回流提取2‑4小时，料液体积比为1:5‑10，回流结束后除去乙醇，烘干，得到干燥脱脂的草叶马尾藻粉末；(c)选用功率在500‑1000瓦的微波对干燥脱脂的草叶马尾藻粉末以水为溶剂进行提取，料液体积比为1:10‑30，每次微波处理时间为15‑30分钟，共微波处理1‑4次；(d)合并所有提取液，过滤，滤液利用聚乙二醇/无机盐或乙醇/无机盐双水相系统分离纯化，置于恒温振荡器中在40‑50℃下振荡25‑35分钟，静置；所述的聚乙二醇或乙醇的质量浓度为10％‑40％，所述的无机盐选自硫酸铵、硫酸钠、磷酸氢二钾或氯化钠，质量浓度为10％‑25％；(e)收集无机盐下相，采用超滤膜过滤浓缩，所述的超滤膜工作压力为0.1‑0.6MPa，超滤膜的截留分子量为3000‑20000Da，超滤时间20‑40min，超滤温度30‑40℃，对超滤膜过滤浓缩后的截留液进行冷冻干燥，得到所述的草叶马尾藻多糖提取物。

【技术特征摘要】
1.一种草叶马尾藻多糖提取物，其特征在于，它是通过以下方法制备得到的：(a)将原料草叶马尾藻干燥后粉碎，过10-40目筛得到草叶马尾藻干粉；(b)向草叶马尾藻干粉中加入体积分数70％-90％的乙醇后回流提取2-4小时，料液体积比为1:5-10，回流结束后除去乙醇，烘干，得到干燥脱脂的草叶马尾藻粉末；(c)选用功率在500-1000瓦的微波对干燥脱脂的草叶马尾藻粉末以水为溶剂进行提取，料液体积比为1:10-30，每次微波处理时间为15-30分钟，共微波处理1-4次；(d)合并所有提取液，过滤，滤液利用聚乙二醇/无机盐或乙醇/无机盐双水相系统分离纯化，置于恒温振荡器中在40-50℃下振荡25-35分钟，静置；所述的聚乙二醇或乙醇的质量浓度为10％-40％，所述的无机盐选自硫酸铵、硫酸钠、磷酸氢二钾或氯化钠，质量浓度为10％-25％；(e)收集无机盐下相，采用超滤膜过滤浓缩，所述的超滤膜工作压力为0.1-0.6MPa，超滤膜的截留分子量为3000-20000Da，超滤时间20-40min，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张朝燕，缪志刚，吴文惠，王小雨，
申请(专利权)人：上海海洋大学，
类型：发明
国别省市：上海;31