苏云金芽孢杆菌制剂微胶囊原粉及其悬浮剂的制法制造技术

本发明专利技术为苏云金芽孢杆菌制剂微胶囊原粉及其悬浮剂的制法，其工艺为采用常规发酵法制取含菌数４０－８０亿／ｍｌ的半成品为原料，经浓缩，经加入甲基纤维素微囊化，加乙醇沉淀，沉淀物加防腐剂制得微胶囊悬浮剂成品，如不加防腐剂，即对沉淀物离心脱水处理达到含水率≤５％，粉碎至粒度为５－４００μｍ，即为微胶囊原粉，其工艺特点采用了微囊化技术，成品效价高、分散性好、缓释、耐紫外光照射。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

Preparation of Bacillus thuringiensis preparation microcapsule powder and suspending agent thereof

The invention relates to a preparation of Bacillus thuringiensis microcapsule suspending agent raw powder and its preparation method, the process for semi-finished products containing the number of bacteria in 40 - 8 billion / ml as raw material, using the conventional fermentation method by enrichment, by adding methyl cellulose microcapsules, ethanol precipitation, sediment preservatives microcapsule suspension agent products, such as no preservatives, namely to precipitate centrifugal dewatering to water ratio is less than 5%, crushed to the particle size of 5 to 400 mu m, namely micro capsule powder, its process characteristics by microencapsulation technology, products with high titer and good dispersion, slow release, resistance to UV irradiation.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术为一种苏云金芽孢杆菌制剂微胶囊原粉及其悬浮剂的制法属于微生物制药的范畴。目前国内外市场上流通的苏云金芽孢杆菌制剂的剂型如下美国Dipel Wp生产的可湿性粉剂，生物效价＞1600IU/mg，含有效成分3.2％；Thuricde 90TS Sandon有限公司生产的液剂含固量＞7.5％；法国Bactaspeine的可湿性粉剂，生物效价1600IU/mgAK；前苏联“бTб”可湿性粉剂，生物活性Lc50为0.03；国内林业部洛阳微生物制品厂生产的可湿性粉剂活芽孢数100亿/g；湖南微生物厂生产的可温性粉剂活芽孢数100亿/g；江苏扬州生物实验厂生产的可湿性粉剂，生物效价1000IU/mg；湖北农科院植保所微生物厂生产的悬浮剂，生物效价3000IU/mg，活芽孢数102亿/ml；山东的克贝尔生产的悬浮剂，生物效价2010IU/mg·μl，活芽孢数96亿/ml。以上产品的生产工艺是由常规发酵制取的半成品，经过浓缩制取的悬浮剂面喷雾干燥等方法制取的可湿性粉剂，没有经过微胶囊化，其共同缺点是有效成分的活芽孢在紫外线照射下容易失活，喷洒应用时其有效成份分布不均，影响杀虫效果，保存期短等。本专利技术的目的是针对现有技术的缺点，引入微胶囊化技术，使活芽孢包复在微胶囊中，分散性好，效价提高，耐紫外线照射，缓释、贮存期延长，便于使用，提高杀虫效果，以利微生物农药迅速普及应用，以减少化学农药的环境污染。本专利技术的内容如下利用苏云金芽孢杆菌(简称Bt)常规发酵制取半成品(含菌数40-80亿/ml)作原料，经微胶囊化工艺制得微胶囊悬浮液及微胶囊原粉两种剂型；其制造步骤如下(1)将上述原料在70-75℃温度范围内浓缩至1/4-1/10体积；(2)浓缩液放进搅拌罐中，加进等体积的含0.3-0.35％甲基纤维素的水溶液，开动搅拌10-20分钟，进行微胶囊化；(3)上述(2)的溶液加入等体积的95％工业乙醇，搅拌5-10分钟混合均匀，静止沉淀12-24小时，使其分层，抽出上清液送入乙醇回收装置，剩下的为乳状沉淀物；(4)收集(3)的乳状沉淀物，加入防腐剂混合均匀，即可得到微胶囊悬浮剂制剂；(5)将(3)的乳状沉淀物进行高速防爆离心处理，收集离心后的膏状物，脱水至含水率≤5％，再粉碎至粒度为5-400μm，即为微胶囊原粉。上述第(4)步中加入防腐剂为0.3％的苯甲酸钠水溶液，第(5)步中高速防爆离心处理时，所用离心机为15000转/分，脱水方法为低温真空干燥或冷冻干燥，低温真空干燥的温度为70-75℃。本专利技术的优点和效果本专利技术方法特点是生产稳定可靠，回收率可达90％以上，生产中无废料，无工业污染。用本方法制造的产品微胶囊原粉的生物效价为1600-66000IU/mg(试虫为马尾松毛虫)，分散性能好，有效成分在平板上分布均匀(见附图)，国内外同类产品标准列如附表1中。微胶囊原粉可配制成多种剂型，如可湿性粉剂，粉剂和悬浮剂，原料不加任何防腐剂，在常温密封条件下可保存多年不变质，微胶囊悬浮剂在常温密封条件下不加防腐剂也可以保存2年不变质，其杀虫活性基本不下降。在野外应用时抗雨淋，抗紫外光照射，囊化薄膜对有效成份起屏蔽作用，缓释，药效长。实施例1、取苏云金芽孢杆菌常规发酵的半成品料液1吨，含固体物3％(菌种H3a3b)，放罐中在70℃真空浓缩至原体积的1/5，将此浓缩液加进同体积的0.３％甲基纤维素水溶液，搅拌10分钟进行囊化处理，再加入与上述总体积等量的95％工业乙醇搅拌10分钟混合均匀，静置24小时，将上清液抽入乙醇回收装置，下面的乳状沉淀物加入防腐剂0.3％苯甲酸钠，得到微胶囊悬浮剂产品170公斤。如果乳状沉淀物不加入防腐剂制造微胶囊悬浮剂产品，可收集乳状沉淀物，高速离心(1500转/分)，再收集离心后的膏状沉淀物，在70℃真空干燥到含水率5％，粉碎到粒度5-400μm，即为微胶囊原粉，可得6公斤。2、取苏云金牙孢杆菌常规发酵半成品1吨，含固体物3％(菌种H4a4b)，放罐中70℃浓缩至原体积的1/5，放入搅拌贮罐，加同体积的0.35％甲基纤维素液，电动搅拌10分种混合均匀，加入与上述总体积等量的95％工业乙醇，搅拌10分钟使均匀，静止24小时，上清液抽进乙醇回收装置，收集乳状沉淀物，加入0.3％苯甲酸钠作防腐剂，搅拌均匀，得微胶囊悬浮剂制品150公斤。如果不加防腐剂，收集的乳状沉淀物，经高速离心1500转/分，收集离心后膏状沉淀物在75℃下真空干燥至含水率5％，粉碎到5-400μm粒度，得到微胶囊原粉4公斤。3、取苏云金芽孢杆菌常规发酵的半成品1吨，含固体物4％(菌种H5a5b)，真空浓缩至原体积的1/4，装入搅拌贮罐，加入等体积的0.3％甲基纤维水溶液，电动搅拌10分钟，加入与上述总体积等体积的95％工业乙醇，搅拌混合10分种，静置24小时，将其上清液抽进乙醇回收装置，收集下面乳状沉淀物，加入0.3％苯甲酸钠为防腐剂，得到微胶囊悬浮利成品150公斤，或者将收集的乳状沉淀物高速离心，收集离心后沉淀物在70℃真空干燥到含水率4.5％，粉碎至5-400μm，得到微胶囊原粉4公斤。附附图说明图1-2图1未胶囊化的平板菌落生长情况；图2本专利技术胶囊化的平板菌落生长情况；附表1，国内外苏云金芽孢杆菌制剂产品标准比较。附表1国内外苏云金芽孢杆菌制剂产品标准比较 权利要求1.一种苏云金芽孢杆菌制剂微胶囊原粉及其悬浮剂的制法，其特征是利用苏云金芽孢杆菌常规发酵制取的含菌数40-80亿/ml的半成品为原料，其制法如下(1)将上述原料在70-75℃温度范围内浓缩至1/4-1/10体积；(2)放进有搅拌装置的贮罐中，加入与浓缩液等体积的含0.3-0.35％甲基纤维素的水溶液，开动搅拌0-20分钟，进行微胶囊化；(3)上述溶液加入等体积的95％工业乙醇，搅拌5-10分钟混合均匀，静止沉淀12-24小时，使其分层，抽出上清液送入乙醇回收装置，剩下的为乳状沉淀物；(4)收集乳状沉淀物，加入防腐剂混合均匀，即可得到微胶囊悬浮剂制剂。2.根据权利要求1所述的苏云金芽孢杆菌制剂微胶囊原粉及其悬浮剂的制法，其特征是将(3)的乳状沉淀物进行高速防爆离心处理，收集离心后膏状沉淀物，脱水至含水率≤5％，再粉碎至粒度为5-400μm，即为微胶囊原粉。3.根据权利要求2所述的苏云金芽孢杆菌制剂微胶囊原粉及其悬浮剂的制法，其特征是所述的高速防爆离心处理，离心机转数为1500转/分。4.根据权利要求2所述的苏云金芽孢杆菌制剂微胶囊原粉及其悬浮剂的制法，其特征是所述的脱水方法为低温真空干燥或冷冻干燥。5.根据权利要求2所述的苏云金芽孢杆菌制剂微胶囊原粉及其悬浮剂的制法，其特征是所述的防腐剂为0.3％的苯甲酸钠水溶液。全文摘要本专利技术为苏云金芽孢杆菌制剂微胶囊原粉及其悬浮剂的制法，其工艺为采用常规发酵法制取含菌数40-80亿/ml的半成品为原料，经浓缩，经加入甲基纤维素微囊化，加乙醇沉淀，沉淀物加防腐剂制得微胶囊悬浮剂成品，如不加防腐剂，即对沉淀物离心脱水处理达到含水率≤5％，粉碎至粒度为5-400μm，即为微胶囊原粉，其工艺特点采用了微囊化技术，成品效价高、分散性好、缓释、耐紫外光照射。文档编号A01N63/02GK1144039SQ9510761公开日1997年3月本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种苏云金芽孢杆菌制剂微胶囊原粉及其悬浮剂的制法，其特征是：利用苏云金芽孢杆菌常规发酵制取的含菌数４０－８０亿／ｍｌ的半成品为原料，其制法如下：（１）将上述原料在７０－７５℃温度范围内浓缩至１／４－１／１０体积；（２）放进有搅拌装置的贮罐中，加入与浓缩液等体积的含０．３－０．３５％甲基纤维素的水溶液，开动搅拌０－２０分钟，进行微胶囊化；（３）上述溶液加入等体积的９５％工业乙醇，搅拌５－１０分钟混合均匀，静止沉淀１２－２４小时，使其分层，抽出上清液送入乙醇回收装置，剩下的为乳状沉淀物；（４）收集乳状沉淀物，加入防腐剂混合均匀，即可得到微胶囊悬浮剂制剂。２、根据权利要求１所述的苏云金芽孢杆菌制剂微胶囊原粉及其悬浮剂的制法，其特征是将（３）的乳状沉淀物进行高速防爆离心处理，收集离心后膏状沉淀物，脱水至含水率≤５％，再粉碎至粒度为５－４００μｍ，即为微胶囊原粉。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李玉萍，赵路，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院亚热带林业研究所，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]