荧光乳液制造技术

本发明专利技术涉及一种荧光乳液、其用途以及包含其的标记试剂。本发明专利技术的荧光乳液是水包油型的，其包含至少一个水连续相，至少一个油相的液滴分散在所述水连续相中，所述液滴通过表面活性剂层来稳定，其特征在于，所述乳液包含至少一对由供体荧光标记和受体标记形成的彼此不同的标记，所述供体荧光标记以波长λ１吸收、以不同于与λ１的波长λ２发射，所述受体标记以供体荧光标记发射的波长λ２吸收；供体荧光标记和受体标记通过如下方式来保持靠近一起：将它们中的一个包裹在油相液滴中，并且要么将它们中的另一个与油相液滴／水相界面相连、要么将它们中的另一个包裹在油相液滴中；并且所述乳液包含至少一种两亲表面活性剂分子和至少一种增溶性脂质的分子。本发明专利技术的荧光乳液可应用于光学荧光成像领域，特别是可应用于生物光学荧光成像。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种荧光乳液、其用途以及含有所述乳液的标记试剂。
技术介绍
人们不断地开发出基于利用被探测信号中散射成分的光学成像技术，因为该技术允许散射物体、更具体地说是较厚的散射物体被探测到。在生物医学成像领域，这些技术例如通过扩散光学层析成像，而为如下常规技术用于例如癌症肿瘤提供了选择放射线照相术和X射线断层照相术、正电子发射断层显像、 以及用于探测和定位的磁共振成像。这些常规 技术，在非电离辐射的可见范围内的波长、更准确地说是生物组织具有最小吸光度(absorption)的红光或近红外波长范围内，用于监测异常吸收和/或散射区域。近年来，归功于特异性荧光标记的应用，人们不断开发荧光分子光学成像技术 (optical fluorescence molecular imaging techniques)。这些特异性焚光标记优选被附接于所关注的靶细胞例如癌细胞，并且提供比非特异性标记更好的监测对比度。这些技术的目的不仅在于在空间中定位荧光标记，而且还在于测定其浓度，由此能够间接定位肿瘤， 并获得有关其形状以及其生物活性的信息。取决于所使用的光源，可以将利用光传播进入散射介质的设备划分为三个分类 连续式；频率调制式；和时间调制式。在历史上，首先研发出的是使用连续光源的设备。然而，它们其中具有不能提供有关组织的散射性能的缺陷，因此必须提供先验(a priori)。时间调制方法和频率调制方法与傅里叶变换法有关，并且两者皆具有更丰富的信息。使用成对源/探测器的单一获得物的设备例如可以测定均勻介质的光学吸收和各自表示为μ a和 μ s 的各向同性散身寸性能(isotropic scattering properties) 在荧光分子光学成像技术中，将荧光标记或者荧光造影剂(contrast agents)注入被研究的被散射组织中，并特异性或非特异性地定位在所研究区域中。然后，所述组织用准单色光源、或者激光束来照亮，所述准单色光是通过使用带通滤波器或低通滤波器所获得的。来自光源的光在组织中散射，并且通过向红光滑移的波长的荧光发射，一些光子到达了荧光标记或荧光分子，所述荧光标记或荧光分子再发射(re-emit)出由它们所吸收的光源提供的能量。直到到达组织边缘并由此显现(emerging)为止，所述光通过荧光本身的传播来发出进入所研究的散射组织中。预先过滤由成像设备例如照相机、红外照相机、光纤或其它成像设备所收集的输出光，由此除去激发信号(excitation signal)并且仅收集荧光光子。通过光源所发射的光和通过荧光团(fluorophore)再发射的荧光所发出的光位于红光或近红外区，称为治疗窗区域，所述光的波长可用于人体和动物组织，因为在这些波长处人体和动物组织吸收最少。更具体地说，血液代表较短波长的光吸收，水代表较长波长的光吸收。因此，选择荧光分子或荧光团在这些波长内即640nm至900nm之间吸收并发射。目前，荧光分子不是这样注入所研究的组织中，而是以光学探针的方式注入。一般而言，该光学探针是由荧光分子组成的分子集合，所述荧光分子例如可以是有机荧光团、稀土络合物、或者发光半导体纳米晶体(luminescent semiconductive nanocrystal，“量子点，，，例如 CdSe, CdTe, InP、Si 等)。 这些光学探针可以包含一种以上的如下组分a)生物配体，其使特异性生物过程(biological process)有可能成像。这种配体可以是i)生物靶向配体所述配体是生物实体(抗体、肽、糖类等)或者化学实体(例如，叶酸)，其能够进行特定器官中特定细胞(例如，肿瘤细胞，例如，如以下文章中所述 S. Achilefu, Technology in Cancer Research & Treatment，2004，3，393-408)的特异性识别；ii)作为用于给定生物活性例如酶活性的标记的生物配体。例如，这些生物配体将会是能够被给定蛋白酶裂解的肽，标记荧光抑制剂将会被接枝到所述肽的末端上。该类型的配体可使蛋白酶的酶活性能够特异性地成像(specifically image)，如以下文章中所述C. H. Tung,Biopolymers, 2004，76，391-403。另一个例子由生物配体组成，所述配体包含将标记和所述标记荧光抑制剂分开的二硫桥键。然后，该生物配体使得细胞中光学探针的内在化(internalization)可以特异性地成像，例如，如公布编号为FR 2 888 938的法国专利申请中所述的那样；b)隐形剂(stealth agent)这是加入到光学探针的实体，从而使其相对于免疫系统隐形、增加其在生物体中的循环时间、并降低其消除(elimination)；c) “组装载体(assembly vector) ”这是可以组合荧光标记和/或生物靶向标记和/或隐形剂和/或一种以上其它功能特性(例如，药物释放、其它成像模式、治疗作用) 的实体。荧光分子可以被包括在乳液中。然而，没有荧光标记的人体或动物组织具有固有荧光(称为内源荧光或自体荧光)，所述固有荧光可增加寄生信号(spurious signal) 0非弹性散射的激发或过滤不良的激发也可以是寄生信号的来源。此外，通过荧光分子再发射的荧光具有较宽的光谱。因此，难以具有来自不同荧光分子(在下文中也称为供体荧光标记)的信号，这意味着可能没有或者几乎没有任何复用 (multiplexing)。最终，目前，当荧光分子(荧光标记)被传送入生物体中时，现有的光学探针不能进行测定。光学荧光成像应用的另一领域是用于监测在基底媒质(host medium)中所关注的物质的释药(delivery)、形状或大小或状态的差异。例如，可以监测如下项目在人体或动物中药物释药；或者在植物中、或者在细胞或组织或者人体、动物、或植物的特定器官或者这些细胞、组织、或器官的合成介质代表中的农药释药。然而，所述基底媒质也可以是含有有机体或者特定物质的合成或天然媒质，需要监测所述基底媒质的路径(path)。然而，光学荧光成像也可以用于研究纳米乳液，从而监测纳米颗粒的尺寸评估、或者知道何时这些颗粒会爆裂(burst)、或者测定标记的释放速度。
技术实现思路
因此，本专利技术的目的在于提供一种荧光乳液，其能够用于所有这些应用，并且能抑制甚至阻止由于基底媒质的自体荧光引起的寄生信号，所述乳液注入基底媒质中并且/或者允许数个荧光标记同时使用、并且/或者监测基底媒质中所关注的药物或物质的释药、 形状或尺寸的改变等。为此目的，本专利技术提供了一种水包油型荧光乳液，其包含水连续相，其中分散有油相的液滴，所述油相液滴通过表面活性剂层来稳定，其特征在于，所述乳液包含至少一对由供体荧光标记和受体标记形成的且彼此不同的标记，所述供体荧光标记以波长X1吸收、以不同于X1的波长λ 2发射，所述受体标记以供体荧光标记发射的波长λ 2吸收；所述供体荧光标记和所述受体标记通过如下方式来保持靠近一起将它们中的一个包裹在油相液滴中，并且要么将它们中的另一个连接到油相液滴/水相界面相连上、要么将它们中的另一个包裹在油相液滴中；并且所述乳液包含至少一种两亲表面活性剂的分子和至少一种增溶性脂质的分子。在本本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．水包油型荧光乳液，其包含至少一个水连续相，其中分散有至少一个油相的液滴，所述油相液滴通过表面活性剂层来稳定，其特征在于：－所述乳液包含至少一对由供体荧光标记和受体标记形成的且彼此不同的标记，所述供体荧光标记以波长λ１吸收、以不同于λ１的波长λ２发射，所述受体标记以所述供体荧光标记的发射波长λ２吸收；－所述供体荧光标记和所述受体标记通过下述方式保持靠近一起：将它们中的一个包裹在油相液滴中，并且要么将它们中的另一个连接到油相液滴／水相界面上、要么将它们中的另一个包裹在油相液滴中；以及－所述乳液包含至少一种两亲表面活性剂的分子和至少一种增溶性脂质的分子。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：洛朗·居尤，
申请(专利权)人：法国原子能与替代能源委员会，
类型：发明
国别省市：FR