一种布鲁氏菌菌壳及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及微生物领域，具体公开了一种布鲁氏菌菌壳及其制备方法和应用。该制备方法将如SEQ?ID?NO：1所示核苷酸序列的裂解基因E克隆到质粒pBV220中，得到重组质粒pBV220::E，接着扩增重组质粒pBV220::E，扩增产物连接到质粒pBBR1MCS-2中，然后转化到布鲁氏菌中，将重组菌株在25-30℃进行繁殖培养至其OD600值为0.8-1.2后升温至37-45℃进行诱导培养至其OD600值稳定，然后离心收集菌体，洗涤后用高渗溶液冻融即得。本发明专利技术采用生物技术将温控调节序列和裂解基因E的融合序列转化到布鲁氏菌中，制备成安全性高、保护效果好的菌壳，对控制布鲁氏菌病的流行和传播具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物领域，更具体的说是涉及一种布鲁氏菌菌壳及其制备方法和应用。
技术介绍
布鲁氏菌(Brucella spp.)是一种胞内寄生、人兽共患病原菌，而布鲁氏菌病(布病)是指由布鲁氏菌引起的一种流行广泛、传染性强、危害极大、感染后难以根治的人兽共患传染病。动物布病主要症状为发热、流产、不育、慢性关节炎及神经损害等，能引起怀孕的雌性动物在怀孕后期流产，以及雄性动物的睾丸炎和附睾炎等；人布病主要通过皮肤粘膜、 消化道和呼吸道感染，其临床表现为长期发热，伴有多汗、关节痛、肝脾肿大以及生殖系统损伤等。人感染布鲁氏菌后，需要长时间的抗生素治疗，而且往往会留下较严重的后遗症。感染的家畜是人布病的主要传染源，人主要通过接触患病的牲畜及其产品或其污染物而感染布病。布病不仅严重危害着人类和动物健康，同时影响畜牧业、旅游业、国际贸易及经济发展。该病在世界各地都有广泛流行，每年因此造成的经济损失高达数十亿美元。 布病在我国流行范围广、危害严重，自新中国成立后开展了全面而系统的防治，有效地控制了布病的发生和流行。然而，从上世纪90年代以来，我国人与动物布病的发病率又有明显上升的趋势。当前使用的布本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种布鲁氏菌菌壳的制备方法，其特征在于，包括：步骤１、将如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１所示核苷酸序列的裂解基因Ｅ克隆到质粒ｐＢＶ２２０中，得到重组质粒ｐＢＶ２２０：：Ｅ；步骤２、用如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２所示核苷酸序列的正向引物ＢＲＵ１和如ＳＥＱ　ＩＤＮＯ：３所示核苷酸序列的反向引物ＢＲＵ２扩增重组质粒ｐＢＶ２２０：：Ｅ，将扩增后的产物连接到质粒ｐＢＢＲ１ＭＣＳ－２中ＳｐｅＩ和ＳａｌＩ酶切位点之间，得到重组质粒ｐＢＢＲ１ＭＣＳ－２－Ｅ；步骤３、重组质粒ｐＢＢＲ１ＭＣＳ－２－Ｅ转化到布鲁氏菌菌株中得到重组菌株，将重组菌株在２５－３０℃进行繁殖培养至其ＯＤ６００值为０．８－１．２后迅速升温至３７－４...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘军，刘爽，冯书章，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所，
类型：发明
国别省市：82