本发明专利技术涉及一种犬17个基因座荧光标记复合扩增检测试剂盒，该系统可以同时分析犬基因组DNA17个基因座的遗传多态性，其中的17个基因座DAmel、PEZ1、PEZ2、PEZ3、PEZ5、PEZ6、PEZ8、PEZ12、PEZ15、PEZ20、PEZ21、FH2010、FH2054、FH2079、FH2132、FH2611、VWFX分为4组，共涉及5种颜色的荧光标记。本发明专利技术的荧光标记复合扩增检测试剂盒提供用于复合扩增17个基因座的寡核苷酸引物混合物；系统中包含的用于鉴别DNA样品性别的基因座是DAmel基因座。该系统的检测结果表明其多态性高、平衡性好、灵敏度高、特异性强、分型结果准确、种属特异性强，完全能够满足犬类个体识别、亲权鉴定以及DNA数据库建设的需要。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种荧光标记复合扩增检测试剂盒，具体是涉及一种通过复合扩增同时分析犬基因组DNA16个STR基因座和DAmel基因座的五色荧光标记复合扩增检测试剂盒。
技术介绍
STR (short tandem r印eat，短串联重复序列)是存在于真核生物基因组中的一类具有长度多态性的DNA序列，其核心序列由2 6个碱基构成，因该核心序列在不同个体间呈不同数目的串联重复而呈现出长度多态性，因而短串联重复序列遗传多态性在个体识别、亲权鉴定、法医鉴定、遗传育种及遗传连锁图谱构建等应用上起着非常重要的作用。STR基因座具有因片段小而容易扩增、各基因座的扩增条件相似而能够构建检测试剂盒的特点，因而具有灵敏、准确、快速、信息量大等优点，尤其是在建立DNA数据库方面，STR复合扩增技术具有极大的优越性。长期的DNA检验实践表明，STR基因座的遗传多态性在品种间存在一定的差异，各个基因座间差别也很大。在犬类的个体识别、亲权鉴定和遗传育种等方面多采用美国ABI公司推荐的MockMarks Animal Genotyping System的10 个犬基因座。在实现本专利技术的过程中，专利技术人发现现有技术至少存在以下问题美国ABI公司推荐的MockMarks Animal Genotyping System中仅有10个犬基因座，而且有部分基因座遗传多态性不高，或是不同犬群间差异较大，由此给DNA检验技术的应用及其效率带来一定的影响，不能满足使用的要求。
技术实现思路
专利技术目的本专利技术的目的是提供一种犬17个基因座的荧光标记复合扩增检测试剂盒，提高了系统的累计个体识别力和累积非父排除率，满足犬的个体识别、亲权鉴定和遗传育种等方面应用的需要。技术方案一种同时分析犬基因组DNA 17个基因座的荧光标记检测试剂盒，其特征在于该试剂盒含有引物混合物如下权利要求1. 一种同时分析犬基因组DNA 17个基因座的荧光标记检测试剂盒，其特征在于该试剂盒含有引物混合物如下2.根据权利要求1所述的一种同时分析犬基因组DNA17个基因座的荧光标记检测试剂盒，其特征在于所述的17个基因座对应的引物分四组并分别用四种不同的荧光染料进行标记；其中PEZ1、PEZ2、FH2010、PEZ5 和 PEZ12 为一组，DAmel、PEZ21、PEZ3、PEZ6 和 PEZ8 为一组；FH2054、VWFX、F!E611 和 FH2132 为一组；PEZ20、PEZ15 和 FH2079 为一组；根据权利要求2所述的一种同时分析犬基因组DNA 17个基因座的荧光标记检测试剂盒，其特征在于四种荧光染料为FAM、HEX、TAMRA, R0X。3.根据权利要求3所述的一种同时分析犬基因组DNA17个基因座的荧光标记检测试剂盒，其特征在于PEZ1、PEZ2、FH2010、PEZ5 和 PEZ12 为一组，其对应的引物采用 FAM 标记；DAmel、PEZ21、 PEZ3、PEZ6 和 PEZ8 为一组，其对应的引物采用 HEX 标记；FH2054、VffFX, FH2611 和 FH2132 为一组，其对应的引物采用TAMRA标记；PEZ20、PEZ15和 2079为一组，其对应的引物采用 ROX标记；具体为4.根据权利要求1-4所述的一种同时分析犬基因组DNA 17个基因座的荧光标记检测试剂盒，其特征在于所述的试剂盒为5. 一种同时分析犬基因组DNA 17个基因座的荧光标记检测试剂盒的检测方法，其特征在于按如下步骤实现A、犬基因组DNA提取；B、按权利要求3或4所述的17个基因座的分组并对相应的引物进行荧光标记；C、PCR扩增体系6.根据权利要求6所述的一种同时分析犬基因组DNA17个基因座的荧光标记检测试剂盒的检测方法，其特征在于步骤A中的犬基因组DNA样品来源包括血液、血痕、组织、精斑、口腔拭子或毛发。7.一种同时分析犬基因组DNA 17个基因座的荧光标记检测试剂盒的应用，其特征在于该试剂盒应用于鉴别犬性别。全文摘要本专利技术涉及一种犬17个基因座荧光标记复合扩增检测试剂盒，该系统可以同时分析犬基因组DNA17个基因座的遗传多态性，其中的17个基因座DAmel、PEZ1、PEZ2、PEZ3、PEZ5、PEZ6、PEZ8、PEZ12、PEZ15、PEZ20、PEZ21、FH2010、FH2054、FH2079、FH2132、FH2611、VWFX分为4组，共涉及5种颜色的荧光标记。本专利技术的荧光标记复合扩增检测试剂盒提供用于复合扩增17个基因座的寡核苷酸引物混合物；系统中包含的用于鉴别DNA样品性别的基因座是DAmel基因座。该系统的检测结果表明其多态性高、平衡性好、灵敏度高、特异性强、分型结果准确、种属特异性强，完全能够满足犬类个体识别、亲权鉴定以及DNA数据库建设的需要。文档编号C12Q1/68GK102321752SQ20111023246公开日2012年1月18日 申请日期2011年8月15日 优先权日2010年8月19日专利技术者付平峰, 兰康, 叶俊华, 李涛, 杜蔚安, 杨前勇, 熊勇华, 王博, 郑卫国, 陈丽娜 申请人:公安部南昌警犬基地, 无锡中德美联生物技术有限公司本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种同时分析犬基因组ＤＮＡ １７个基因座的荧光标记检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒含有引物混合物如下：，上述１７基因座对应的引物对中至少有一个引物的５’端进行荧光染料标记。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：杜蔚安，叶俊华，郑卫国，杨前勇，熊勇华，兰康，陈丽娜，李涛，付平峰，王博，
申请(专利权)人：无锡中德美联生物技术有限公司，公安部南昌警犬基地，
类型：发明
国别省市：32
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