电泳多试样组分采集器制造技术

一种组分采集器，包括由电泳径迹构成的分离装置，分离试样，以及传递装置，传递已分离的成分，传递装置包括试样传递毛细管，以特定间隙使其一端靠近电泳径迹的一端，传递已分离的成分，输送装置，向所述间隙输送缓冲液，并把已分离成分由缓冲液的护套流带入试样传递管中，分级装置，对试样传递管中的分离成分进行分级，检测装置，从分离成分发出的光来检测其流出，以及控制装置，根据检测装置输出信号控制分级装置，从而根据检测装置输出信号对试样传递管内的分离成分进行分级。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种电泳多试样组分采集器，尤其涉及一种适用于把包括DNA(脱氧核糖核酸)、RNA(核糖核酸)或蛋白质的多试样进行分级(fractionate)的设备。生命科学以及生物工艺学的进步增加了对DNA段进行分离(separating)和分级的需要。例如，当DNA段用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶被电泳时，它们便按分子大小分离开来。在凝胶电泳之后，电泳板用色料，例如溴化3，8—二氨基—5—乙基—6—苯基菲啶鎓染色，从而把被分离的DNA带染色，被染色部分的凝胶被切断并被浸入缓冲溶液(溶剂)中，这样，便能够取出缓冲溶液中的分离开的DNA段并将其进行分级。另一种已有的方法是从垂直于电泳凝胶管的端部的方向加入缓冲液，借以把被分离开的DNA段洗提在缓冲液中，并将其进行分级(日本专利公开NO.3—115850)。借助切断凝胶并将DNA段洗提入缓冲液中从而进行分级DNA段的方法的缺点是费力且麻烦。同时常规的由溴化3，8—二氨基—5—乙基—6—苯基菲啶鎓染色的方法还有检测分离开的DNA的灵敏度低的缺点。因此，这种方法不适用于少量的DNA段的分级。所述的常规方法使用管电泳径迹把被分离开的DNA段洗入缓冲液中并将其分离，只能同时处理一种试样，因此，每一单位时间只能处理有限的量。同时，该方法使用光吸收率来辨别DNA段，从而使检测灵敏度变低。而且，当同时有许多试样要进行分离和分级的处理时，常规方法就需要使用许多电泳管。这又导致需要相同数量的其它设备，其中包括和电泳管数量相同的昂贵的检测器，因而使得分级系统投资太大。同时使用一长的塑料管来分开被分离的DNA段，并把DNA段吸收在管的内壁上，这便使得难于分离小量的成分。本专利技术的目的在于， 提供一种新的仪器，它能解决所述常规技术中涉及的问题，减少从凝胶电泳板切断DNA带的工作量，允许同时处理多种试样，并使被分离开的成分用简单而有效的方式分级。本专利技术人以前提出了关于日本专利公开NO.6—138037的专利技术的电泳装置。在这装置中，多个毛细凝胶电泳管放于含有用于电泳的阴极的缓冲液容器和含有用于电泳的阳极的缓冲液容器之间，并在其中部被一分为二，并面对面地以特定间隙对置，被电泳分离的试样被洗提进入间隙中并被检测。借助于向间隙照射激光，并检测被激光照射的由荧光团标记的DNA发生的荧光来检测被分离的成分。被分离的成分通过照射区之后，随缓冲溶液流入下面的无凝胶的管中。日本专利公开号6—138037的专利技术的专利技术目的在于，同时分离多种试样并对其进行有效的测量。由本专利技术人详述的研究结果已经揭示出，对已专利技术的装置增加适当的分级功能就可进行极简单且有效的多试样的分级。即本专利技术的目的，可借助于一分级收集装置实现，其特征在于分离装置系统的组合方面，包括用来借助于电泳进行试样分离的一个或多个电泳径迹，以及传递装置，传递装置包括一个或多个毛细管试样传递管，以特定间隙置于电泳径迹的端部，并且其入口与电泳径迹相对。借助于在电泳径迹和试样传递管之间的间隙中供应缓冲溶液，把从电泳径迹流出的分离的成分引入毛细试样传递管，这和日本专利公开号6—138037的专利技术相似。使用某种适当方法检测从被分离开的成分中发出的荧光来进行被分离开的成分的检测，这也与关于日本专利公开号6—138037的专利技术相似。然而，应当注意，本专利技术提供了一种新的装置，用来分级流入试样传递毛细管的分离开的成分，并且所述用来分级的装置根据由检测从被分离开的成分发出的荧光获得的输出信号进行控制，借以使被分离开的成分分级。用于试样分离的电泳径迹，例如可由已知的电泳凝胶板或凝胶电泳毛细管构成，这又与日本专利公开号6—138037的专利技术类似。电泳径迹的数目并不总是需要等于两个或多个。如后所述，当采用识别多于一个波长的光的检测器时，就可以用一个电泳径迹同时分离用荧光团标记的具有不同荧光波长的多个试样。但是，用一个电泳径迹进行多个试样的分离和分级自然有其局限性。因此，一般最好使用多个电泳径迹。借助于使用凝胶板把电泳板分成几部分或使用多个毛细凝胶电泳管可以容易地获得多个电泳径迹。不过应当注意，在这种情况下，必须准备与用于分级的电泳径迹数量相等的多个试样毛细传递管。借助于检测从被分离开的成分发出的荧光来进行从电泳径迹流出的被分离开的成分的检测。从原理来说，可以使用当光照射到被分离开的成分时发生的光的散射和光的吸收来进行被分离开的成分的检测。为保证较高的检测灵敏度，最好预先用荧光团标记要被分开的试样，这和日本专利公开6—138037的专利技术类似。在这种情况下，借助于在电泳径迹的端部和传递试样毛细管之间的间隙上照射激光，借以检测从每一被分离开成份发出的荧光来进行被分离开的成分的检测。用来分级通过传递试样毛细管传递的被分离开的成分的装置可以具有试样瓶支撑装置，它具有专用的试样瓶，该试样瓶被这样设置，使得各个成分可被传递进各自的试样传递送管内。试样瓶支撑装置由试样瓶支撑控制器根据从电泳径迹流出的被分离开的成分的检测信号以这样的方式进行操作，使得被分离开的成分被分级并被放入特定的试样瓶中。试样(例如DNA段)在用电泳被分离之后，具有小的分子的试样在较短时间内到达电泳径迹的终端，并且被洗提进入间隙中。被洗提进的被分离开的成分可容易地通过检测由被分离开的成分发出的光信号(即荧光)进行检测。当缓冲液借助重力向下流进传递试样毛细管的入口时，将从电泳径迹洗提出的被分离开的成分包围形成所谓的“护套流”。结果，每种伴有缓冲液的被分离开的成分平稳而均匀地流进每个试样传递管中，而不和从其它电泳径迹洗提出的被分离开的成分混合。为了形成稳定的护套流，可以用泵或其它类似的装置对缓冲液施加合适的压力。附图说明图1是本专利技术的组分采集器的第一实施例的透视图；图2是本专利技术的组分采集器的第二实施例的透视图；图3是表示要被分级的DNA部分的碱基顺序的例图；图4是表示用荧光团标记的DNA段的碱基顺序的例图；图5A、5B和5C是表示用荧光团标记的DNA段获得的电泳图的例图；以及图6是表示由护套流传递试样的示意图。实施例1图1表示本专利技术的第一实施例。本装置包括分离部分A，检测部分B和收集部分C。分离部分A由使用凝胶板的电泳板1构成，在其中形成电泳径迹。多种试样以特定间隔放在顶端(未示出)。借助于由在顶上的阴极(未示出)和底部的阳极6之间施加直流电进行电泳来分离试样。多种试样成分通过图中向下的不同的电泳径迹被电泳并且被分离。较小分子的试样在较短的时间内到达电泳板1的底部，并从电泳板1的底部进行洗提。使用隔离壁把凝胶电泳板1分割成几个迁移径迹可以使多个电泳径迹被完全隔离(即形成几个槽作为迁移动路径)。浓度为百分之5到20的聚丙烯酰胺凝胶或浓度为百分之0.5到3的琼脂糖凝胶经常用作分离凝胶。检测部分B包括缓冲液容器5，激光源4和二维检测器9。缓冲液容器5是一种细长的结构，以水平方向沿凝胶电泳板1的全长延伸，并且加入足能浸没凝胶电泳板1的整个底部的缓冲溶液。激光10的照射角被如此调节，使其能照到由多个电泳径迹洗出的所有被分离开的成分上。当使用由荧光团标记的标本时，从凝胶电泳板1洗提出的被分离开的成分接收来自光源4的激光10，从而发出荧光50。使用两维检测器9来检测发出的荧光，从而进行被分离开的成分的高灵敏度的检测。为了减本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种组分采集器，其特征在于包括： 具有电泳径迹的分离装置，用来通过电泳分离试样， 传递装置，用来传递从所述电泳径迹流出的被分离开的成分，所述传递装置包括试样传递毛细管，其一端以特定间隙靠近所述电泳径迹的一端， 输送装置，用来向所述间隙供应缓冲液，并把所述被分离开的成分通过所述缓冲液的护套流带入所述试样传递毛细管中， 分级装置，用来把移动到所述每个试样传递管中的被分离开的成分进行分级， 检测装置，用来通过检测在间隙处从所述被分离开的成分发出的光来检测所述被分离开的成分的流出，以及 控制装置，用来根据所述检测装置获得的信号控制所述分级装置。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：神原秀记，
申请(专利权)人：株式会社日立制作所，
类型：发明
国别省市：JP[日本]