【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种弓形虫IgG抗体检测试剂，尤其是涉及一种采用胶体金免疫层析技术(immunochromatography)进行的弓形虫IgG抗体快速检测试剂条及其制备方法。
技术介绍
弓形虫病(Toxoplasmosis)是刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)引起的一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病，其病原体弓形虫可寄生在人及多种动物的有核细胞内，人群及动物普遍易感。该病广泛分布于世界各地，据统计全球约有10亿人被弓形虫感染([1]奚琳琳，李威.弓形虫致病机理，毒力及基因型研究进展[J].中国病原生物学杂志，2009，4(11) :859-861.)。弓形虫病在我国分布很广泛，全国各省、市、自治区均有弓形虫感染的报道，我国正常人群平均感染率在4% 9%左右([2]刘敏，陈晓光.中国人群弓形虫病的流行特征分析[J].寄生虫与医学昆虫学报，2010，17(3) :131-134)，特殊人群如肿瘤患者、精神病患者、先天缺陷婴幼儿、免疫抑制、免疫缺陷患者感染率更高。所幸的是极大多数免疫功能正常的成人或儿童被弓形虫感染后常无症状或仅有轻微症状，且多能自愈并...
【技术保护点】
１．弓形虫ＩｇＧ抗体胶体金免疫层析检测试剂条，其特征在于设有载体板、加样垫、胶体金垫、硝酸纤维膜、弓形虫ＩｇＧ抗体检测线、对照线和吸收垫；加样垫、胶体金垫、硝酸纤维膜和吸收垫依次粘贴在载体板上表面，加样垫的一端设在胶体金垫的一端上，胶体金垫的另一端设在硝酸纤维膜的一端上，吸收垫的一端设在硝酸纤维膜的另一端上，弓形虫ＩｇＧ抗体检测线和对照线依次设在硝酸纤维膜上；在弓形虫ＩｇＧ抗体检测线处包被抗人ＩｇＧ特异性片段γ链单克隆抗体，在对照线处包被羊抗弓形虫抗原ＳＡＧ１（Ｐ３０）、ＳＡＧ２（Ｐ２２）、ＲＯＰ２和ＧＲＡ７的ＩｇＧ抗体。
【技术特征摘要】
1.弓形虫IgG抗体胶体金免疫层析检测试剂条，其特征在于设有载体板、加样垫、胶体金垫、硝酸纤维膜、弓形虫IgG抗体检测线、对照线和吸收垫；加样垫、胶体金垫、硝酸纤维膜和吸收垫依次粘贴在载体板上表面，加样垫的一端设在胶体金垫的一端上，胶体金垫的另一端设在硝酸纤维膜的一端上，吸收垫的一端设在硝酸纤维膜的另一端上，弓形虫IgG 抗体检测线和对照线依次设在硝酸纤维膜上；在弓形虫IgG抗体检测线处包被抗人IgG特异性片段Y链单克隆抗体，在对照线处包被羊抗弓形虫抗原SAGl (P30)、SAG2(P22)、R0P2 和GRA7的IgG抗体。2.如权利要求1所述的弓形虫IgG抗体胶体金免疫层析检测试剂条，其特征在于所述载体板为PVC板。3.如权利要求1所述的弓形虫IgG抗体胶体金免疫层析检测试剂条的制备方法，其特征在于包括以下步骤1)制备弓形虫重组抗原SAGl(P30)、SAG2 (P22)、R0P2和GRA7采用基因克隆技术，PCR扩增编码弓形虫抗原的DNA，并插入大肠杆菌中使其表达，得弓形虫重组抗原 SAGl (P30)、SAG2 (P22)、R0P2 和 GRA7 ；2)硝酸纤维素膜的点样在硝酸纤维素膜IgG检测线上包被抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体，在对照线处包被羊抗弓形虫抗原SAGl (P30)、SAG2 (P22)、R0P2和GRA7的IgG抗体，晾干；3)制备胶体金采用柠檬酸三钠还原方法制备25nm胶体金，取氯金酸ImL加入到IOOmL去离子双蒸水中，得到的氯金酸浓度为0. 01%，置于带冷凝装置的烧瓶中加热至沸腾，磁力加热搅拌下加入1 %柠檬酸三钠水溶液2. OmL,继续加热直至溶液呈葡萄酒色为止，冷却后置于棕色瓶中4°C冰箱保存备用；4)胶体金与SAGl (P30)、SAG2 (P22)、ROP2 和 GRA7 的标记(1)胶体金与弓形虫抗原SAGl(P30)的标记取胶体金10mL，用0. lmol/L NaOH调至 pH5. 4，加 IOOyg SAGl (P30)，混勻，放置 5min，加入 5% BSA Im L 混勻，4°C、10 000r/min 离心lh，弃上清，将沉淀用TBS缓冲液溶解至10m L，4°C、10 000r/min离心lh，弃上清，沉淀用TBS稀释至lmL，得胶体金标记的SAGl (P30)抗原；(2)胶体金与弓...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭永炼，章家新，吴统健，陈桂美，曹凤玲，张长弓，
申请(专利权)人：厦门市仙岳医院，
类型：发明
国别省市：92
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