【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及DNA重组技术和药物领域,涉及通过融合表达的重组人β 干扰素,含编码该融合蛋白的DNA序列,含该DNA序列的载体,含该载体的宿主细胞,用于基因工程制备该蛋白的方法,以及该蛋白在治疗疾病领域的应用。
技术介绍
人β干扰素是成纤维细胞和上皮细胞产生的一类具有广泛生物学活性,包括抗病毒、抗肿瘤以及免疫调节作用的重要细胞因子(KozovsKa ME, et al. Neurology (J), 1999,53 :1692-1697),具有 5 个 α 螺旋结构和 22KDa 的分子量 (Arduini, et al. Protein Science〔J〕,1999,8 :1867-1877)。目前人 β 干扰素分为 β 干扰素-Ia和β干扰素_lb,其中β干扰素-Ia是天然结构,包含有糖基化结构。而β 干扰素-Ib是将17位的Cys突变成Ser而成,且N端不含甲硫氨酸,由165个氨基酸组成(Goodkin DE, et al. Lancet〔J〕,1994,344 :1057-1060)。大量研究表明,人 β 干扰素可在大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞中实现 ...
【技术保护点】
1.一种在大肠杆菌中可溶性融合表达人β干扰素和重组制备方法,其特征在于:融合蛋白标签为硫氧还原蛋白(TRX),融合表达方式为:TRX-Linker-IFN-β,其中TRX位于N末端,IFN-β位于C末端,中间由连接肽Linker相连。
【技术特征摘要】
1.一种在大肠杆菌中可溶性融合表达人β干扰素和重组制备方法,其特征在于融合蛋白标签为硫氧还原蛋白(TRX),融合表达方式为=TRX-Linker-IFN-β,其中TRX位于N末端,IFN-β位于C末端,中间由连接肽Linker相连。2.权利1中所述人β干扰素序列(SEQID NO :1),第1位氨基酸前可带有甲硫氨酸 (Met)或甘氨酸(Gly)。3.权利要求1中所述的重组融合蛋白中连接肽(Linker)含有专一性的蛋白酶切位点。4.权利要求1、3中所述重组融合蛋白中连接肽含有位于蛋白酶酶切位点前的6XHis 标签。5.权利要求3、4中所述蛋白酶切位点可以是肠激酶酶切位点DDDDK,或凝血酶酶切位点LVPRGS,或TEV酶酶切位点E...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘日勇,李祥,陈海容,谭克海,胡春兰,
申请(专利权)人:重庆富进生物医药有限公司,
类型:发明
国别省市:85
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