【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种重组质粒,具体地,涉及一种含HIH(2 (同源结构域相互作用蛋白激酶2)基因的重组质粒。
技术介绍
11] !^ ; ^^2(homeodomain-interacting protein kinase 2, HIH(2)是定位于细胞核内的丝/苏氨酸蛋白激酶家族成员之一,它能与同源框类蛋白相互作用而广泛参与转录调控。HPK家族蛋白具有一个保守的激酶结构域和一个同源蛋白相互作用结构域,因其能够增强同源蛋白转录活性,故取名为同源结构域相互作用蛋白激酶,目前已知该激酶有3个亚型,分别为HIHQ、HIH(2、HIH(3,其中对HIPK2研究最多。HIPK2存在于不同生物体(如线虫、啮齿类动物和人类),HIPK2在除神经组织外的正常人体组织中表达水平非常低,在脑、白细胞、辜丸、前列腺、卵巢和小肠组织中则几乎测不到,仅在心、 肌肉和肾脏相对较高表达。HIPK2基因定位于人类第7条染色体7q32-q34,小鼠染色体6B,全长15. 2kb,编码区序列长约3595bp。HIPK2从美丽线虫到人类高度保守,小鼠与人类之间氨基酸98%同源,有 L4kb、4· ...
【技术保护点】
1.一种含HIPK2基因的重组质粒,其特征在于,该重组质粒包含HIPK2基因的编码序列以及载体质粒DNA序列,所述的载体质粒DNA序列中包含与HIPK2基因连接的调节序列;所述的重组质粒通过以下步骤构建:步骤1,以含有人HIPK2基因的真核表达载体pENTR223.1/HIPK2为模板设计引物序列,分别引入Nhe I和Kpn I酶切位点;步骤2,对HIPK2基因进行PCR扩增;步骤3,对所得HIPK2基因序列和载体质粒进行Nhe I和Kpn I双酶切以及纯化;步骤4,将步骤3所得产物进行T4 DNA连接酶酶切,使HIPK2基因目的片段和载体质粒相连接;步骤5,用步骤4所得连 ...
【技术特征摘要】
1.一种含HIPK2基因的重组质粒,其特征在于,该重组质粒包含HIPK2基因的编码序列以及载体质粒DNA序列,所述的载体质粒DNA序列中包含与HIPK2基因连接的调节序列; 所述的重组质粒通过以下步骤构建步骤1,以含有人HIPK2基因的真核表达载体pENTR223. 1/HIPK2为模板设计引物序列, 分别引入Nhe I和Kpn I酶切位点;步骤2,对HIPK2基因进行PCR扩增;步骤3,对所得HIPK2基因序列和载体质粒进行Nhe I和Kpn I双酶切以及纯化;步骤4,将步骤3所...
【专利技术属性】
技术研发人员:周利红,李琦,范忠泽,王炎,殷佩浩,慈书俊,周宁,
申请(专利权)人:上海中医药大学附属普陀医院,上海市普陀区中心医院,
类型:发明
国别省市:31
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