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一种测定吞噬细胞对结核杆菌杀伤活性的方法技术

技术编号:6681485 阅读:406 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术属于抗感染免疫的技术领域,具体说是一种测定吞噬细胞杀伤结核杆菌的方法。其步骤包括:(1)结核杆菌体外培养后用荧光染料标记;(2)人或动物血液标本,或分离或培养的吞噬细胞,与荧光染料标记结核杆菌于37℃共孵育1至90分钟或更长时间后,洗涤除去未被吞噬结核杆菌;(3)将吞噬结核杆菌的吞噬细胞置于37℃1至90分钟或更长时间后,裂解吞噬细胞,释放出结核杆菌;(4)用流式细胞仪检测荧光降低的结核杆菌比例,计算吞噬细胞对结核杆菌的杀伤活性。本发明专利技术方法是应用荧光染料标记的结核杆菌被杀伤后荧光强度明显降低的原理,能在短时间内检测吞噬细胞对结核杆菌杀伤活性。其优点是操作简便和快捷,客观性和重复性好。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
1.一种检测吞噬细胞杀伤结核分枝杆菌的方法,包括以下步骤:(1)结核分枝杆菌体外培养扩增后用荧光染料标记,并用流式细胞仪检测荧光标记率。(2)荧光染料标记的结核分枝杆菌与吞噬细胞置于37℃共同孵育1至90分钟或更长时间后,离心洗涤除去未被吞噬的结核分枝杆菌。(3)将吞噬结核分枝杆菌的吞噬细胞置于37℃孵育0至90分钟或更长时间后,裂解吞噬细胞,释放被出的结核分枝杆菌。(4)用流式细胞仪检测荧光阴性和阳性结核分枝杆菌比率,或结核分枝杆菌荧光的强度,计算吞噬细胞对结核分枝杆菌的杀伤率。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:姜丽娜李柏青贺文欣
申请(专利权)人:蚌埠医学院
类型:发明
国别省市:34

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