一种实时荧光定量RT-PCR检测CSFV的方法技术

本发明专利技术公开了一种实时荧光定量RT-PCR检测CSFV的方法，经过对本发明专利技术所建立的方法进行了特异性、灵敏度的验证，结果显示本方法可以较好的将CSFV同口蹄疫病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒和2型猪圆环病毒区分开，且灵敏度可以达到10拷贝数的数量级。另外，本发明专利技术所建立的方法整个反应过程是闭管操作，在最大程度上减少了体系的污染。本发明专利技术在诊断时间上同传统方法相比自获得待检样品到提取核酸，配制荧光定量RT-PCR反应体系，直到出现反应结果，整个过程可以在2.5h内完成，在保证检验结果的基础上大大缩短了检验所需时间。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及检测
，特别涉及一种可以精确、特异、快速检测CSFV的方法。
技术介绍
猪瘟(swine fever，SF)，又称猪霍乱(hog cholera, HC)、烂肠瘟，在欧洲则被称为古典猪瘟(classical swine fever，CSF)，是世界上养猪业的一种重要的传染病，一度给养猪业带来了严重的经济损失。对于CSF的传统诊断方式主要有动物试验、免疫荧光试验、血清中和试验、ELISA、 单克隆抗体试验。动物试验是检测猪瘟病毒的敏感方法，但是检测时间较长且目前存在流行的猪瘟病毒大多为低毒力病毒株即使接种也不呈现出典型猪瘟症状；免疫荧光试验方法较为特异，但是在实际检测应用过程中此项技术要求具有荧光抗体、荧光显微镜以及检验者较高的检测技术；血清中和试验和ELISA试验除检测时间较长外，均难以鉴别疫苗抗体和感染后产生的抗体，很容易出现假阳性；单克隆抗体技术特异性较强，但是操作起来过程复杂，成本较高，不适应于大批量样品诊断的要求。因此，现有技术还有待于改进和发展。
技术实现思路
鉴于上述现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种实时荧光定量RT-PCR检测CSFV的方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种用于实时荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ检测ＣＳＦＶ的特异性引物，其特征在于，ＣＳＦＶ的特异性引物序列如ＳＥＱ　ＮＯ．１－２所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：罗宝正，薄清如，廖秀云，沙才华，徐海聂，王振全，陈轩，苏惠龙，
申请(专利权)人：珠海出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：44