心脑血管疾病蛋白标志物的联合并行检测方法及其诊断试剂盒技术

技术编号:6457935 阅读:269 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种心脑血管疾病蛋白标志物的联合检测方法及其诊断试剂盒,联合并行检测方法的特征是能够一次性检测同一个样品中的多种蛋白标志物,即通过液相芯片的制备,形成“信号标记的检测抗体-心脑血管疾病蛋白标志物-捕获抗体-微球”的四联复合体,通过检测四联复合体中不同微球的标记信号,从而确定待检测样品中各种不同的心脑血管疾病蛋白标志物的存在及含量。本发明专利技术还公开了该诊断试剂盒的组成成分及该诊断试剂盒的应用。本发明专利技术所述的方法及试剂盒具有高通量性、高灵敏度和特异性、检测快速准确等突出优点,能够对心脑血管疾病的多种蛋白标志物同时进行定性和定量检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种体外诊断检测方法及其诊断试剂盒,特别是涉及心脑血管疾病蛋白标志物的液相芯片联合并行检测方法及其诊断试剂盒。
技术介绍
心脑血管疾病是中国城市人口和西方发达国家的主要疾病和主要死亡原因之一, 主要包括以冠心病、高血压等为代表的心血管疾病,以及缺血性脑血管病和出血性脑血管病。缺血性脑血管病,又称急性缺血性脑血管综合症(AICQ,包括脑梗死(亦称脑梗塞,Cl) 和短暂性脑缺血性发作(TIA);出血性脑血管病包括脑出血和蛛网膜下腔出血。心脑血管疾病蛋白标志物的联合检测已成为心脑血管疾病的危险因素筛查或预测、早期诊断、疾病进程、疗效监测和预后判断的非常重要的指标,而多指标联合并行检测的高通量迅速性、准确性和稳定性就更加至关重要。近年来研究发现的与心脑血管疾病的发生发展相关的蛋白标志物包括血管内皮生长因子(VEGF)、单核细胞趋化蛋白-l(MCP-l)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、人基质金属蛋白酶抑制因子-I (TIMP-I)、干扰素-Y (IFN- y )。目前,对于心脑血管疾病蛋白标志物的测定已有多种检测方法,包括免疫比浊分析、酶联免疫分析(ELISA)、放射免疫分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种心脑血管疾病蛋白标志物的联合并行检测方法,其特征在于,包括以下主要步骤:(1)将捕获抗体与不同编号的微球Beads偶联,形成“捕获抗体-微球”二联复合体,所述的每一种捕获抗体分别抗一种心脑血管疾病蛋白标志物,从而使待测样品中的心脑血管疾病蛋白标志物与捕获抗体形成“心脑血管疾病蛋白标志物-捕获抗体-微球”三联复合体;所述的心脑血管疾病蛋白标志物包含以下标志物的任意一种或任意多种或加上其它标志物的组合:血管内皮生长因子VEGF、单核细胞趋化蛋白-1MCP-1、金属基质蛋白酶-9MMP-9、人基质金属蛋白酶抑制因子-1TIMP-1、干扰素-γIFN-γ;(2)将不同的检测抗体进行信号标记,其...

【技术特征摘要】
1.一种心脑血管疾病蛋白标志物的联合并行检测方法,其特征在于,包括以下主要步骤(1)将捕获抗体与不同编号的微球Beads偶联,形成“捕获抗体_微球”二联复合体, 所述的每一种捕获抗体分别抗一种心脑血管疾病蛋白标志物,从而使待测样品中的心脑血管疾病蛋白标志物与捕获抗体形成“心脑血管疾病蛋白标志物-捕获抗体-微球”三联复合体;所述的心脑血管疾病蛋白标志物包含以下标志物的任意一种或任意多种或加上其它标志物的组合血管内皮生长因子VEGF、单核细胞趋化蛋白-1MCP-1、金属基质蛋白酶-9MMP-9、人基质金属蛋白酶抑制因子-1TIMP-1、干扰素-γ IFN- γ ;(2)将不同的检测抗体进行信号标记,其中所述的每一种检测抗体分别抗一种心脑血管疾病蛋白标志物且对应于捕获抗体,并与捕获抗体分别结合于该蛋白标志物的不同抗原表位;(3)将步骤(1)形成的三联复合体与步骤( 中的带有信号标记的检测抗体混合,从而形成“信号标记的检测抗体-心脑血管疾病蛋白标志物-捕获抗体-微球”四联复合体;(4)用液相芯片法xMAP检测出四联复合体中不同微球的标记信号,从而确定待检测样品中各种心脑血管疾病蛋白标志物的存在及含量。2.如权利要求1所述的心脑血管疾病蛋白标志物的联合并行检测方法,其特征在于, 步骤中,所述确定待检测样品中各种心脑血管疾病蛋白标志物的含量,其具体方法为 将步骤中测定的标记信号与标准曲线进行比较,从而确定待检测样品中各种心脑血管疾病蛋白标志物的含量。3.如权利要求1所述的心脑血管疾病蛋白标志物的联合并行检测方法,其特征在于, 步骤(1)中,所述的微球是一种颜色编码微球Color-coded Beads,且结合了不同荧光染料的聚苯烯微球。4.如权利要求1所述的心脑血管疾病蛋白标志物的联合并行检测方法,其特征在于, 所述的捕获抗体和检测抗体是针对以下5种标志物自由组合的心脑血管疾病蛋白标志物的捕获抗体和检测抗体血管内皮生长因子VEGF、单核细胞趋化蛋白-1MCP-1、金属基质蛋白酶-9MMP-9、人基质金属蛋白酶抑制因子-1TIMP-1、干扰素-γ IFN- γ。5.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员:邵棠莫晓月陈庆袁福美
申请(专利权)人:江苏迈迪基因生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:32

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