具有改善的药物动力学特性的修饰嵌合多肽制造技术

本发明专利技术涉及具有改善的药物动力学特性的修饰嵌合多肽。具体地讲，本发明专利技术披露了为了改善其药物动力学特征而作过修饰的嵌合Ｆｌｔ１受体多肽。还披露了制备和使用所述修饰过的多肽的方法，包括，但不限于使用修饰过的多肽降低或抑制哺乳动物的血浆渗漏和／或血管通透性。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
具有改善的药物动力学特性的〗务饰嵌合多肽本申请是申请日为2000年5月23日，申请号为00811544.3，专利技术名 称为"具有改善的药物动力学特性的修饰嵌合多肽"的专利技术专利申请的分 案申请。本申请要求申请日为1999年6月8日的美国临时申请号60/138133 的优先权。在本申请中引用了各种文献。这些文献所披露的内容以其全文 形式收作本申请的参考。简介本专利技术的领域是具有改善了的药物动力学的修饰过的多肽。具体地 讲，本专利技术的领域涉及为了改善其药物动力学特征而作过修饰的Fltl受体 多肽。本专利技术的领域还涉及制备和使用所述修饰过的多肽的方法，包括， 但不限于用这种修饰过的多肽减弱或抑制哺乳动物的血浆渗漏和/或血管 通透性。背景多肽配体结合细胞的能力，以及由此引起诸如细胞生长、存活、细胞 产物分泌或分化的表型反应通常是通过细胞上的跨膜受体介导的。所述受 体的胞外结构域(即展现在细胞表面上的受体部分)通常是该分子的最独 特的部分，因为它能提供具有配体结合特征的蛋白。配体和胞外结构域的 结合，通常会导致信号传导，由此将一种生物学信号传递到胞内目标。通 常，这种信号传导是通过催化性的胞内结构域起作用。这种催化性胞内结 构域的序列基序的特殊排列决定了它接触潜在的激酶底物的能力(Mohammadi等，1990,分子细胞生物学ll: 5068-5078; Fantl等， 1992，细胞69: 413-413)。通过催化性胞内结构域传导信号的受体的例 子包括受体酪氨酸激酶(RTKs),如受体的Trk家族，它通常局限于神 经系统细胞，受体的细胞因子家族，包括三联CNTF受体复合体(Stahl&Yancopoulos, 1994,神经生物学杂志25: 1454-1466)，它一般 也局限于神经系统的细胞，G-蛋白偶联受体，如存在于心肌细胞上的p2-肾上腺素能受体，以及位于肥大细胞和嗜碱性粒细胞的大部分上的多聚 IgE高亲和力受体FcsRI (Sutton&Gould， 1993,自然366: 421-428 )。 到目前为止所鉴定的所有受体在配体结合之后似乎都要发生二聚化、 多聚化、或某些相关的构象变化(Schlessinger,丄，1988, TrendBiochem.Sci.13: 443-447; Ullrich&Schlessinger1990,细胞61: 203-212; Schlessinger& Ullrich, 1992， Neuron9:383-391 ),并且发生在二聚化分子 内结合域之间的分子间的相互作用会导致催化功能的激活。在某些场合 下，如血小板衍生的生长因子(PDGF),所述配体是与两种受体分子结 合的二聚体(Hart等，1988,科学240: 1529-1531; Heldin， 1989，生物 学化学杂志264: 8905-8912),而，举例来说，对于表皮生长因子 (EGF)来说，所述配体是单聚体(Weber等，1984，生物学化学杂志 259: 14631-14636 )。对于FcsRI受体来说，结合于FcsRI上的配体 IgE以单聚体形式存在，并且只有在抗原结合于IgE/Fc s RI复合体上之后 并与相邻的IgE分子交联之后才被激活(Sutton&Gould, 1993,自然 366: 421-428)。通常， 一种特定受体在高等生物体内的组织分布提供了该受体的生物 学功能的线索。诸如成纤维细胞生长因子(FGF)的某些生长和分化因子 的RTKs是广泛表达的，因此在组织生长和维持中似乎起着某种一般作 用。更常见的是，受体的TrkRTK家族的成员(Glass&YancopouIos，1993, 细胞生物学趋势，3: 262-268)局限于神经系统细胞，而神经生长因子家 族包括神经生长因子(NGF)、脑衍生的神经营养因子(BDNF)、神经 营养蛋白-3 (NT-3)和神经营养蛋白-4/5 (NT-4/5)，它能结合TrkRTK 家族受体，促进大脑中和外周的各种神经原的分化(Lindsay, R.M, 1993，参见神经营养因子，S.E丄oughlin&丄H.Falkm著，257-284页，San Diego, CA，学术出版社)。FcsRI局限于数量非常有限的类型的细胞， 如肥大细胞和嗜碱性粒细胞。肥大细胞源于骨髓多能造血干细胞系，但是 在离开血液之后在组织中完成其成熟(参见Janeway&Tmvers, 1996,免 疫生物学，第2版，M.Robertson&E丄awrence著，1: 3-1: 4页，当代生 物学有限公司，伦敦，英国，出版人)，并且与过敏反应有关。很多研究已经证实，受体的胞外结合域提供了特殊的配体结合特性。 另外，表达受体的细胞环境可能影响配体与受体结合时所表现出的生物学 反应。例如，当表达Trk受体的神经原细胞接触神经营养蛋白时，该蛋白 能结合所述受体，导致神经原的存活和分化。当成纤维细胞表达相同的受 体时，接触神经营养蛋白会导致成纤维细胞的增殖(Glass等，1991,细 胞66: 405-413)。业已鉴定了 一种由细胞衍生的对血管内皮细胞具有选择性的二聚体促 细胞分裂剂，并被命名为血管内皮细胞生长因子(VEGF)。业已从以下条件生长培养基中纯化了 VEGF:大鼠神经胶质瘤细胞的条件生长培养基 ,和牛垂 体滤泡心形细胞的条件生长培养基和来自人U937细胞的条件 生长培养基。VEGF 是表观分子量为大约46kDa的二聚体，每一个亚基的表观分子量大约 23kDa。 VEGF与血小板衍生的生长因子(PDGF)具有某些结构相似性， 后者是结缔组织细胞的促细胞分裂剂，但不能促进来自大的血管的血管内 皮细胞的分裂。被称为Flt的膜结合酪氨酸激酶受体被证实为VEGF受体(DeVries, C.等，1992,科学，255, 989-991页)。能特异性结合VEGF的Fit受体 能诱导细胞分裂。被称为KDR的另一种形式的VEGF受体也能结合 VEGF并诱导细胞分裂。KDR的部分cDNA序列以及几乎完整的蛋白序 列是众所周知的。持续的血管形成可以导致或加重某些疾病，如牛皮癣、类风湿性关节 炎，血管瘤、血管纤维瘤、糖尿病性视网膜病和新生血管青光眼。VEGF 活性抑制剂可以用作所述疾病和其他VEGF诱导的病理性血管形成和血管 通透性症状的治疗剂，如胂瘤血管化。本专利技术涉及一种基于VEGF受体 Fltl的抑制剂。血浆渗出是发炎的一个关键因素，它发生在一种特殊类型的微细血管 中。具体地讲，在大多数器官中，血浆渗出特别发生在小静脉中。与动脉 血管和毛细血管不同，小静脉会因为各种炎性介体的出现而发生渗漏，所 述介体包括组胺、緩激肽和血清紧张素。发炎的一个特征是血浆渗漏，它 是由于在小静脉的内皮细胞中所形成的细胞间隙所导致的。大多数发炎实 -睑冲莫型证实，所述细胞间隙出现在后毛细血管和集中小静脉的内皮细胞之 间(Baluk， P.,等，美国病理学杂志1998, 152: 1463-76)。业已证 实，某些凝集素可用于揭示发炎的小静脉中内皮细胞边界上的血浆渗漏、 内皮细胞间隙和指状过程的集中部位(Thurston, 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种融合多肽在制备用于治疗眼病的药物中的用途，所述融合多肽具有与多聚化成分连接的ＶＥＧＦ受体成分，其中　（ａ）血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）受体成分是第一种ＶＥＧＦ受体的免疫球蛋白样（Ｉｇ）结构域２，和第二种ＶＥＧＦ受体的Ｉｇ结构域 ３，并且不包括任何其他ＶＥＧＦ受体结构域；　（ｂ）多聚化成分是免疫球蛋白结构域，并且　所述融合多肽具有图２１Ａ－２１Ｃ、图２２Ａ－２２Ｃ或图２４Ａ－２４Ｃ的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：NJ帕帕多波洛斯，S达维斯，GD岩科波洛斯，
申请(专利权)人：里珍纳龙药品有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]