混合多肽疫苗及其制备和应用制造技术

本发明专利技术提供一种混合多肽疫苗，它可诱发体内产生针对自身多种不同炎症趋化因子的抗体，它由不同种的杂交肽混合组成，其中每种杂交肽都是由特定的趋化因子的氨基末端片段与免疫识别片段共价连接而成；本发明专利技术还提供了这些产品的制备方法，特别采用化学合成的生产方法，以及产品的测试方法；利用本发明专利技术可制备治疗各种自身免疫疾病的混合疫苗；本发明专利技术的混合疫苗，易于制备，且可根据疾病种类和病情选择组合配制，达到同时抑制多种不同的炎症趋化因子效果，使用方便，作用持久，适合长期依赖药物的自身免疫疾病。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及医用配制品，尤其涉及一种能够抑制自身免疫疾病的混合多肽疫苗及其制备生产和应用。
技术介绍
蛋白质一般由50-80个以上氨基酸组成的，具有一定三维空间构象的化合物。多肽一般由50个以下氨基酸组成的，具有一定三维空间构象的化合物。小肽由30个以下氨基酸组成。一般不具有三维空间构象。细胞趋化因子动物体内所分泌的能够诱导各种白细胞移动的蛋白质。抗原引起动物产生免疫反应，包括产生抗体的物质。抗原一般都是非自身的物质。自身抗原引起动物产生免疫反应，包括产生抗体的身体自身的物质。自身免疫耐受性正常情况下，体内对自身物质不产生免疫反应及不产生抗自身物质的抗体，这种机制称为“自身免疫耐受性”。抗原特异性是指物质之间的相互吻合性或针对性、专一性。CpG细菌特有的核酸序列，其中的核苷酸不被甲基化。细菌的毒素一些细菌分泌一些特殊的蛋白质，这些蛋白质可引起人体巨大的不良反应，这些蛋白质分子量都很大，往往由几个不同的亚单位组成，比方破伤风杆菌分泌的破伤风毒素其整个分子由1315个氨基酸组成。共价连接化合物间的连接是通过化学定义的共价键，包括肽键，二硫桥键等。有关趋化因子的国际命名和缩写MCP-1monocyte chemoattractant protein 1；MCP-3monocyte chemoattractant protein 3；MCP-4monocyte chemoattractant protein 4；MCP-5monocyte chemoattractant protein 5；MIP-1 alphamacrophage inflammatory protein 1 alpha；RANTESregulated on activation，normal T-cell expressed andsecreted；IL-8Interleukin 8，人的趋化因子；IP-10IFN-gamma inducible protein 10；MIGmonokine induced by IFN-gamma；ITACinterferon-inducible T cell alpha chemoattractant；GRO-alphagrowth related oncogene alpha； SLC即6Ckine6-cysteine chemokine；ELC即MIP-3 betamacrophage inflammatory protein 3 beta；ENA-78epithelial cell-derived neutrophil activating protein 78；MIP-2monocyte inflammatory protein-2，鼠的趋化因子；除去特别指出种属的以外，上述趋化因子都存在于人和鼠体内。人和鼠的趋化因子序列有同系性，但不相同。自身免疫病如风湿性关节炎，红斑狼疮，非感染性结肠炎，牛皮癣，多发性硬肌症等，都是由于肌体的过度免疫反应引起的。病人由于基因缺陷或后天病毒/细菌感染导致免疫调节失控，对人体自身的组织和器官产生免疫反应，造成骨骼，结肠，肾脏，心脏或神经的永久损害。这些疾病的特点都是反复发作，不断恶化，病程很长，有的病例长达数十年，甚至终生不愈，最终由于机体组织的严重破坏而导致很难处理的综合症，甚至危及生命或形成癌变。例如硬皮病，又称系统性硬化症，是以局限性或弥漫性皮肤及内脏器官结缔组织纤维化、硬化及萎缩为特点的结缔组织病，病情进展凶险，甚至危及生命。部分病人病情经过很长时间才出现特殊内脏肾脏、心脏等重要器官受累的临床表现。又比如干燥综合征，是一种以侵犯泪腺、唾液腺为主的自身免疫性疾病，它不仅侵犯外分泌腺体，造成口干、眼干，还可侵犯全身多个器官，产生多种多样的临床表现，是仅次于类风湿关节炎的常见风湿病。另一个例子是系统性红斑狼疮。肾病和心脏病是系统性红斑狼疮最常见的临床表现之一，可以导致肾功能衰竭而死亡。因此只有及早治疗，才能防止，才能延长系统性红斑狼疮的生存期。异体组织移植排斥反应也是由于机体的过度免疫反应引起的。自身免疫疾病和器官移植患者一般都长期依赖抗异体排斥药物。目前市场上无论西药、中药均不能根治。对于病状较轻的患者，目前有些药物可以控制疾病的活动性，减轻症状，但不能防止复发。对于病情严重，用一般药物难以控制病情的患者则必须使用免疫抑制剂。而目前市场上的抑制免疫反应的药物都不理想，或者副作用很高，或者疗效不明显。而且药物在体内的半衰期都短暂，病人需要每日多次服药，方可维持疗效。这样的治疗方式无论从经济上还是生活上都使患者不堪重负。因此市场急需长效，无显著副作用，而且廉价的制剂，以便满足这类病人对抑制发病，药物使用和经济方面的特殊需求。研究发现，细胞趋化因子的蛋白质(Chemokine)对许多自身免疫疾病的病理过程起着重要的作用。比如，溃疡性结肠炎和牛皮癣，造成其病理损害的主要成员是单核细胞和中性粒细胞，而这些细胞正是由一些细胞趋化因子诱发侵润进入组织的。细胞趋化因子是动物或人体内分泌的，能够诱导各种白细胞移动的蛋白质。至今发现人体共有40多种细胞趋化因子，分子量在7,000-11,000左右。按照其化学结构共划分为C，CC，CXC和CX3C四个家族。趋化因子通过与白细胞表面的特殊受体结合并激活受体来发挥其诱导功能。除了诱导细胞移动，趋化因子还诱导细胞的钙离子流。在体内，一些趋化因子参与各类炎症反应，而另一些趋化因子参与细胞正常移动。趋化因子具有种属特异性，即各种动物分泌的趋化因子序列有同系性，但不相同。细胞趋化因子(Chemokine)又可大致分为可诱导的细胞趋化因子和基本的细胞趋化因子两大类。可诱导的趋化因子可被各种炎症因子诱导表达，或增强表达。表达的水平最高在诱导后3小时之内可达正常状态的300倍。在炎症疾病比如红斑狼疮，多发型硬皮病，牛皮癣，风湿病，以及异体组织移植排斥反应，可诱导的趋化因子的表达水平明显增高。因而可诱导的细胞趋化因子又被称为炎症细胞趋化因子，包括IP-10，Mig，ITAC，IL-8，MCPs(MCP-1，2，3，4，5)，RANTES，MIP-1alpha/beta，NEA-78，GRO-alpha/beta，SLC，ELC，BCA-1等等。从各种疾病观察到的另一个现象是，一般表达水平同时明显增高的都不是单纯的一种，而是多种炎症趋化因子。这说明了疾病的复杂性和多种趋化因子同时参与作用的事实。最新研究显示，给生病的动物注射抗趋化因子的抗体，达到中和或抵消上述炎症趋化因子的作用，可以部分缓解病情。但是，使用外来抗体作治疗会诱导患者产生对该抗体的过敏免疫反应，不能长期反复使用，所以不适合需要长期治疗的自身免疫疾病。而动物由于天生具有自身耐受性，不可能对自身物质产生免疫反应，不能产生抗自身物质，如自身趋化因子的抗体。
技术实现思路
为了克服现有技术存在的上述缺点，本专利技术提供一种混合多肽疫苗，它可诱发体内产生针对自身多种不同炎症趋化因子的抗体。它是由不同种的杂交肽混合组成，其中每种杂交肽都是由特定的炎症趋化因子的氨基末端片段与免疫识别片段共价连接而成；本专利技术还提供了这些产品的制备方法，特别是利用化学合成的制备方法，以及产品的测试方法；所述混合本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种混合多肽疫苗，其由多种不同种的杂交肽混合组成，每种杂交肽由趋化因子的氨基末端片段与免疫识别片段共价连接而成；其中，趋化因子的氨基末端片段为炎症趋化因子蛋白质的氨基末端的小肽片段；免疫识别片段为免疫系统能够辨认为异己的多肽或ＤＮＡ片段。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：龚疆红，
申请(专利权)人：龚小迪，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]