抗癌肽及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及生物医药领域，具体而言，涉及一种抗癌肽。所述抗癌肽选自下列组的序列中的一种或两种：a)、具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列；b)、具有SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。该抗癌肽具有尤其显著的抗癌活性，且毒性小，对人体更为安全。本发明专利技术还涉及该抗癌肽的制备方法及其在制备抗癌药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】
抗癌肽及其制备方法与应用
本专利技术涉及生物医药领域，具体而言，涉及一种抗癌肽及其制备方法与应用。
技术介绍
乳腺癌是女性群体中最常见的癌症，每年新增的乳腺癌患者可达138万人。WHO调查表明，2014年中国女性中乳腺癌患者已达到187,213人，在所有女性癌症种类中位列第二。目前，化疗是治疗大多数癌症的一个标准疗法。已知的可以治疗乳腺癌的化疗药物包括天然活性成分(例如紫杉醇、姜黄素、长春新碱、芹黄素和三氧化二砷等)和化学药物(例如环磷酰胺、卡培他滨、5-氟尿嘧啶等)。由于乳腺癌分子表型各异，对同种药物或疗法的敏感性也差异甚大，不同表型的乳腺癌免疫原性也不尽相同，且反复用药还会导致耐药性的形成。因此，探索不同机制的药物克服以上困难迫在眉睫。抗癌肽(Anticancerpeptides，ACPs)是一类阳离子的两亲性小肽，其氨基酸残基不超过50个且含有碱性和疏水残基。由于微生物细胞膜表面和肿瘤细胞膜表面一样，都富含负电荷的糖脂和(或)糖蛋白，因而很多抗菌肽(Antimicrobalpeptides，AMPs)往往同时兼备抗菌和抗肿瘤的双重作用。ACPs和AMPs均可通过自身的正电荷与肿瘤细胞膜或者微生物细胞膜表面带负电荷分子的静电作用而定位到细胞膜上，进而在膜上聚集镶嵌在细胞膜内或者穿透细胞膜进入细胞，通过干扰细胞膜的整合而使细胞裂解或者诱导细胞凋亡。所以ACPs和AMPs也被称为细胞渗透性多肽。由于CPPs的细胞渗透性，使其不仅可以作为开发ACPs和AMPs的资源库，也可以作为其他药物—核酸、蛋白、成像试剂和小分子药物等的载体，介导这些药物进入靶细胞。ACPs因其独特的作用机制而可以成为很有潜力的抗肿瘤药物。但是，天然来源的ACPs有很多缺点，例如活性不高、选择性不强、溶血活性太强、稳定性差等，因而不能直接应用于临床。同时，采用化疗药物对不同亚型的乳腺癌进行治疗的过程中，药物可能会通过对乳腺癌细胞ABC转运蛋白(ATPbindingcassettetransporter)在翻译水平上进行调控，诱导癌细胞DNA甲基化的异常，或者促进乳腺癌细胞过表达诸如P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp/MDR1)、多药耐药相关蛋白(Multidrugresistanceassociatedprotein，MRP)和乳腺癌耐药蛋白(Breastcancerresistanceprotein，BCRP)药物外排转运蛋白等多种途径形成多药耐药机制。尽管肿瘤细胞对ACPs的耐药性尚未见报道，但是一些病原菌，例如链球菌属(Streptococcus)、葡萄球菌属(Staphylococci)和粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)对AMPs的耐药性已有报道。因此，克服天然ACPs的不足，使其更加符合临床要求以改善其抗肿瘤活性势在必行。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种天然抗癌肽的改造方法，以解决上述问题。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：一种抗癌肽，其选自下列组的序列中的一种或两种：a)、具有SEQIDNO：1所示的氨基酸序列；b)、具有SEQIDNO：2所示的氨基酸序列。本专利技术共提供了13条对癌细胞具有显著抑制作用的抗癌肽，其中CMAP-L-242(SEQIDNO：1所示的氨基酸序列)及CMAP-L-253(SEQIDNO：2所示的氨基酸序列)具有尤其显著的抗癌活性，在本专利技术的实施例中，这两条多肽对癌细胞的抑制作用与对照组相比差异达到了极显著水平(Duncan-test，P<0.01)，且细胞毒性也很小。如上所述的抗癌肽在制备抗癌药物中的应用。本专利技术提供的抗癌肽细胞毒性小，在人体中使用安全。优选的，所述抗癌药物对抗的肿瘤种类选自：肠癌、卵巢癌、前列腺癌症、肝癌、肺癌、淋巴癌、胰腺癌、甲状腺癌、鼻咽癌、宫颈癌、子宫内膜癌、耳沟癌、腮腺癌、喉道癌等；更优选的，所述抗癌药物对抗的肿瘤选自乳腺癌。本专利技术对所提供的抗癌肽在MDA-MB-231、MCF7、BT-474和ZR-75-1四种乳腺癌细胞的敏感性进行了验证，证明所述抗癌肽可很好地用于乳腺癌的治疗。一种用于抑制癌细胞增殖或者增加癌细胞凋亡的药物组合物，所述药物组合物包含由选自于SEQIDNO：1和SEQIDNO：2的氨基酸序列所示的肽或者上述两种肽的组合，以及可药用的载体、稀释剂或赋形剂。包含所述肽或所述物质作为活性成分的组合物可以包含多于一类的选自于盐水、缓冲盐水、葡萄糖、水、甘油和乙醇的药物稀释剂，但所述稀释剂不限于这些。根据服药目的和具体疾病可以以不同的方式给予所述组合物。应理解，实际给予的活性成分的量应该根据多种相关因素确定，包括需要治疗的病症，患者症状的严重程度，同时服用的其他药物(例如化学治疗剂)，所述患者个体的年龄、性别、体重，饮食，服药时间，选择的给药途径以及所述组合物的比例。所述组合物药的剂量和给药途径可根据疾病的类型和严重程度进行调节。包含本专利技术的肽或物质的组合物可以通过口服或肠胃外途径给药。肠胃外服药意思是通过口服之外的途径给予药物，包括直肠给药、静脉内给药、腹膜内给药和肌内给药、动脉内给药、经皮给药、鼻内给药、吸入、眼部给药以及皮下给药。可以将包含所述肽或物质的药物制剂制备成口服剂型、注射液或局部用制剂等任何形式。所述制剂可以被优选制备成口服和注射给药(真溶液、悬液或乳剂)的形式，并且最优选是口服形式例如片剂、胶囊、软胶囊、液体药剂、丸剂、颗粒剂等等。在制备所述制剂过程中，可以在无任何赋形剂的情况下将所述肽填充进软胶囊中，或者将所述肽与载体混合或用载体稀释后形成适当的制剂。合适的载体的实例为淀粉、水、盐水、林格氏(Ringer’s)溶液、葡萄糖等。本专利技术还请求保护编码如上所述抗癌肽的基因序列；优选的，所述基因序列具有SEQIDNO：3或SEQIDNO：4所示的核苷酸序列。SEQIDNO：3所示的核苷酸序列编码SEQIDNO：1所示的氨基酸序列；SEQIDNO：4所示的核苷酸序列编码SEQIDNO：2所示的氨基酸序列；需要注意的是，本专利技术还请求保护与上述核苷酸序列互补的核苷酸序列，以及功能等价体序列。本专利技术请求保护的基因序列不仅限于SEQIDNO：3或SEQIDNO：4所示的核苷酸序列，还包括根据宿主细胞对密码子的偏好性推算出来的具有简并性的其他核苷酸序列，这对本领域技术人员来说是熟悉的。功能等价体序列还包括与SEQIDNO：1或2所示序列有至少90％、95％、96％、97％、98％、或99％序列同一性，且具有编码抗癌活性多肽的核苷酸序列，在基于本专利技术提供内容的基础上，这对本领域技术人员来说是容易通过有限次实验进行验证的。其中，序列同一性的百分比可以通过公知的生物信息学算法来获得，包括Myers和Miller算法(Bioinformatics，4(1)：11-17，1988)、Needleman-Wunsch全局比对法(J.Mol.Biol.，48(3)：443-53，1970)、Smith-Waterman局部比对法(J.Mol.Biol.，147：195-197，1981)、Pearson和Lipman相似性搜索法(PNAS，85(8)：2444-2448，1988)、Ka本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗癌肽，其选自下列组的序列中的一种或两种：a)、具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列；b)、具有SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种抗癌肽，其选自下列组的序列中的一种或两种：a)、具有SEQIDNO：1所示的氨基酸序列；b)、具有SEQIDNO：2所示的氨基酸序列。2.权利要求1所述的抗癌肽在制备抗癌药物中的应用。3.权利要求1所述的抗癌肽在制备抗乳腺癌药物中的应用。4.一种用于抑制癌细胞增殖或者增加癌细胞凋亡的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含由选自于SEQIDNO：1和SEQIDNO：2的氨基酸序列所示的肽或者上述两种肽的组合，以及可药用的载体、稀释剂或赋形剂。5.编码权利要求1所述抗癌肽的基因序列；优选的，所述基因序列具有SEQIDN...

【专利技术属性】
技术研发人员：周礼红，
申请(专利权)人：贵州源熙生物研发有限公司，
类型：发明
国别省市：贵州,52