一种治疗肿瘤的组合物制造技术

一种治疗肿瘤的组合物，其特征在于包含沙棘总黄酮和苦参碱。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药品，特别是治疗肿瘤的组合物药品。
技术介绍
沙棘为胡颓子科沙棘属植物。沙棘总黄酮是从沙棘中提取出来的黄酮类化合物，黄酮类化合物存在于沙棘的各个部位当中。可采用水或水-醇法从沙棘中提取沙棘总黄酮，另外超临界法也可用于从沙棘中提取沙棘总黄酮。以往的研究表明沙棘总黄酮具有遏制粥样动脉硬化、降低血液胆固醇的作用。沙棘总黄酮还具有增加心脏的收缩和舒张功能，有明显的抗心肌缺血和抗心率失常作用。中药苦参是豆科植物苦参的根，苦参中含有的生物碱具有一定抗肿瘤作用和抗病毒作用等药理作用。
技术实现思路
鉴于上述，本专利技术的目的在于提供一种治疗肿瘤的新的组合物。本专利技术的一种治疗肿瘤的组合物，包含有治疗有效剂量的沙棘总黄酮和苦参碱。上述的沙棘总黄酮是从沙棘属植物中提取出的黄酮总体。上述的沙棘总黄酮为按本领域技术人员所熟知的提取方法，如水醇法，从各种沙棘中提取出来的所有黄酮类化合物的总体混合物。沙棘总黄酮中主要有异鼠李素，槲皮素、异鼠李素-3-O-鼠李半乳糖甙、异鼠李素-3-O-葡萄糖甙、异鼠李素-3-O-鼠李葡萄糖甙、异鼠李素-3-O-半乳糖甙、异鼠李素-7-O-鼠李糖甙、槲皮素-3-O-半乳糖甙、槲皮素-3-O-葡萄糖甙、槲皮素-7-O-鼠李糖甙等。上述的苦参碱是苦参总生物碱、苦参碱单体、氧化苦参碱单体或氧化苦参碱单体与苦参碱单体的混合物。上述的苦参总生物碱是指从各种苦参中按本领域技术人员所熟知的提取方法，从各种苦参中提取出来的所有生物碱类化合物的总体混合物。苦参总生物碱主要有苦参碱、氧化苦参碱、羟基苦参碱、去氢苦参碱、巴普叶碱、安那吉碱等。本组合物中上述的沙棘总黄酮和苦参碱按重量份计量的含量是沙棘总黄酮1～10，苦参碱1～10。较好是沙棘总黄酮1～3，苦参碱1～3。最好是沙棘总黄酮3，苦参碱1。本专利技术的组合物适用于治疗肿瘤，特别是适用于治疗宫颈癌、肝癌、舌鳞癌、肺腺癌等肿瘤。本专利技术的组合物治疗肿瘤的机理如下1、诱导肿瘤细胞凋亡和分化施以本组合物后的肿瘤细胞的形态和生长曲线测定，以及流式细胞仪检测的结果来看。本组合物可以诱导肿瘤细胞的凋亡和分化，从而产生治疗肿瘤的作用。2、抑制肿瘤细胞的增殖通过3H-TdR(3H标记的脱氧胸腺嘧啶核苷酸)掺入实验及流式细胞仪检测的结果，本组合物可以抑制DNA的合成并且可以抑制肿瘤细胞的增殖。经本组合物处理的肿瘤细胞被阻止于细胞周期中的G0/G1(细胞周期中的间期0期和1期)期，进入分裂期的肿瘤细胞比例下降。3、影响肿瘤细胞基因的表达肿瘤细胞的基因表达在被施用本组合物前后有明显的变化。通过流式细胞仪的检测，施用本组合物后，肿瘤细胞的Bcl-2、c-myc和c-ha-ras的表达明显降低，同时P-53、Bax的表达上升。c-myc和c-ha-ras的表达过量与肿瘤形成有密切关系，而bcl-2是抑制肿瘤细胞凋亡的基因。p53基因可促进肿瘤细胞凋亡；bax基因的表达上升也可以促进肿瘤细胞的凋亡。bcl-2、c-myc和c-ha-ras三个基因在本组合物处理过的肿瘤细胞中表达降低，同时p53、bax的表达上升说明了本组合物可使肿瘤细胞产生分化凋亡。本专利技术的组合物中的沙棘总黄酮和苦参碱共同使用可以通过以上三种机理来达到治疗肿瘤的作用。而且，沙棘总黄酮和苦参碱共同使用可以产生协同作用，与仅单独使用沙棘总黄酮或仅单独使用苦参碱相比，在相同的剂量下可以更有效的治疗肿瘤。为了方便治疗使用，可以使用本领域技术人员已知的方法，将本组合物制成适合使用的剂型。比如将本组合物溶于适当溶剂如生理盐水制备成静脉输注液；或将本组合物制成粉末添加适当赋形剂制备成口服剂型，如胶囊、片剂等。为了更好地理解本专利技术，下面用药效实验和动物体内抗肿瘤实验来说明本组合物对肿瘤的治疗作用。一、本组合物对肿瘤治疗的药效实验。以下的本组合物中按重量份计量的含量是沙棘总黄酮3，苦参碱1。(一)本组合物对人宫颈癌细胞(Hela细胞)的药效实验。接种细胞以2×105个/ml于25ml培养瓶中，第二天随机分组加药，治疗组采用含浓度为20μg/ml本组合物的细胞培养液来处理Hela细胞，阴性对照组为采用不含本组合物的培养液处理Hela细胞。1、细胞形态接种细胞以2×105个/ml于25ml培养瓶中，第二天随机分组加药，药物处理两天后在倒置显微镜下观察。对照组肿瘤细胞排列密集，细胞呈圆形，核大核仁多。治疗组肿瘤细胞排列稀疏，细胞呈长形或多边形，部分细胞内出现大小不等的空泡。2、细胞生长测定采用MTT法(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基溴化四唑)测定Hela细胞对照组与治疗组的生长情况。 经本组合物处理后的肿瘤细胞与对照组细胞相比，细胞生长受到明显抑制。3、平板集落形成实验接种细胞以2×105个/ml于25ml培养瓶中，第二天随机分组加药，药物处理两天后以每一平皿500个细胞换普通培养液继续培养7天后，经甲醇固定、Giemsa染色(姬姆萨染色)。计数集落总数及集落形成率。 经本组合物处理后的肿瘤细胞与对照组细胞相比，细胞集落形成率明显降低，说明肿瘤细胞在沙棘总黄酮作用后增殖能力下降。4、3H-TdR(3H标记的脱氧胸腺嘧啶核苷酸)掺入实验药物处理24小时后加入3H-TdR(终浓度为0.5μCi/ml(μCi微居))，4小时后消化，离心后蒸馏水溶解细胞，采用纸片法在液体闪烁计数器上测定细胞的cpm(每分钟脉冲数)值 经本组合物处理后的肿瘤细胞与对照组细胞相比，3H-TdR掺入明显较少。说明肿瘤细胞经本组合物作用后DNA合成下降，肿瘤细胞的生长受到抑制。5、流式细胞仪检测结果 注G0/G1细胞周期中的间期0期和1期。S细胞周期中的DNA合成期。G2+MG2是细胞周期中的间期2期，M是细胞周期中的分裂期。经本组合物处理后的肿瘤细胞与对照组细胞相比，肿瘤细胞处于细胞周期中的G0/G1期的比例上升，处于G2+M期的肿瘤细胞比例下降。分裂期的肿瘤细胞比例下降，表示本组合物降低了肿瘤的分裂增生速度。同时被本组合物作用后的肿瘤细胞凋亡率明显上升，基因表达改变，分化程度升高。6、结论Hela细胞(人宫颈癌细胞)在经本组合物处理后，细胞形态改变、增殖变慢、集落形成率降低、3H-TdR掺入减少、细胞周期分布改变、基因表达率改变、凋亡率增加。说明本组合物使Hela细胞分化凋亡，并且降低Hela细胞的DNA合成速率和增殖能力，达到治疗宫颈癌的作用。(二)本组合物对人舌鳞癌细胞(Tca-8113细胞)的药效实验。接种细胞以2×105个/ml于25ml培养瓶中，第二天随机分组加药，治疗组采用含浓度为20μg/ml本组合物的细胞培养液来处理Tca-8113细胞，阴性对照组为采用不含本组合物的培养液处理Tca-8113细胞。1、细胞形态接种细胞以2×105个/ml于25ml培养瓶中，第二天随机分组加药，药物处理两天后在倒置显微镜下观察。对照组肿瘤细胞排列密集，细胞呈圆形，核大核仁多。治疗组肿瘤细胞排列稀疏，细胞呈长形或多边形，部分细胞内出现大小不等的空泡。2、细胞生长测定采用MTT法测定Tca-8113细胞对照组与治疗组的生长情况。 经本组合物处理后的肿瘤细胞与对照组细胞相比，细胞生长受到明显抑制。3、平板集落形本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种治疗肿瘤的组合物，其特征在于包含沙棘总黄酮和苦参碱。2.根据权利要求1中所说的一种治疗肿瘤的组合物，其特征在于所说的沙棘总黄酮是从沙棘属植物中提取出的黄酮总体。3.根据权利要求1中所说的一种治疗肿瘤的组合物，其特征在于所说的苦参碱是苦参总生物碱、苦参碱单体、氧化苦参碱单体或氧化苦参碱单体与苦参碱单体的混合物中的一种。4.根据权利要求1、2或3中所说的一种治疗肿瘤的组合物，其特征在于按重量份计量的含量沙棘总黄酮1～10，苦参碱1～10。5.根据权利要求1、2或3中所说的一种治疗肿瘤的组...

【专利技术属性】
技术研发人员：王正荣，王跃锜，
申请(专利权)人：王正荣，
类型：发明
国别省市：