本发明专利技术涉及基因重组尿激酶原的用途，特别是涉及基因重组尿激酶原在制药领域中的应用。血栓性疾病，包括急性心肌梗塞（ＡＭＩ）、脑梗塞、肺栓塞，下肢深静脉血栓形成、视网膜动、静脉栓塞形成等，是一类严重危及世界各国人民生命及健康的疾病。尿激酶是一个由４１１个氨基酸残基组成的溶栓剂。发明专利技术人发现尿激酶原能用于治疗肺栓塞和治疗视网膜动脉栓塞。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因重组尿激酶原的用途，特别是涉及基因重组尿激酶原在制药领域中的应用。
技术介绍
血栓性疾病，包括急性心肌梗塞(AMI)、脑梗塞、肺栓塞，下肢深静脉血栓形成、视网膜动、静脉栓塞形成等，是一类严重危及世界各国人民生命及健康的疾病。在美国，35～50岁男性死亡者中，35％是由AMI所致。全球十大致死性疾病当中，冠心病(心绞痛、心肌梗塞及心源性猝死)排第一位，每年死于该病720万人，第三位是脑血管疾病，每年死亡人数达460万。心、脑血管疾病目前仍呈上升趋势。全世界每年约有1300万人患有各类血栓性疾病，需要使用溶栓药物治疗。近10年心血管病发病率一直上升，特别是冠心病在我国已成为内科常见病、多发病，并有由城市向农村发展，患者趋于年轻化的势头。本病特征为血栓形成，阻塞局部血流或脱落成栓子堵塞下游血流(血栓栓塞)。血栓是血流在心血管系统血管内面剥落处或修补处的表面所形成的小块，在可变的流体依赖型中，血栓由不溶性纤维蛋白，沉积的血小板，积聚的白细胞和陷入的红细胞组成。血栓形成是一种涉及许多彼此相互作用的遗传和环境因素的多因素变化的过程，在临床上常见到血栓形成素质的患者。血栓性疾病的主要治疗方法包括人工机械方法如球囊导管术和外科栓子切除术和抗栓药物治疗(溶栓治疗和抗凝治疗)以及支持疗法。尿激酶原(Prourokinase，Pro-uk)是一种糖蛋白，天然尿激酶原Asn302为糖基位点。糖基化位点Asn302上的寡糖链可影响Pro-uk在血液中的半衰期和活性。天然的或由哺乳动物细胞表达的糖基化的Pro-uk，和大肠杆菌表达的非糖基化的Pro-uk相比，二者对纤维蛋白的溶解都是血栓特异的，但由于糖基化的Pro-uk被纤溶酶活化的能力比非糖基化Pro-uk弱，因此其催化活性比非糖基化Pro-uk弱(文献1Pannell R，et al.The relative and variable stabilities ofglycosylated and non-glycosylated pro-urokinase in plasma.Thromb Haemost，1997；Suppl504)，但在血浆中稳定性好(文献2Lenich C，et al.The influence of glycosylation on the catalytic andfibrinolytic properties of pro-UK.Thromb Haemost，1992；68539)。尿激酶原分子量54kDa，由411个氨基酸残基组成，氨基酸序列见Entrez Protein DatabaseBAA01919。Pro-uk含12对二硫键，具有三个蛋白结构域(文献3Homes WE，et al.Cloningand expression of the gene for pro-urokinase in Escherichia coli.Biotechnology，1985；3923)(1)表皮生长因子类(EGF-like)结构域，由第5-49位氨基酸残基组成，与表皮生长因子高度同源，富含半胱氨酸，在氨基酸残基11和19、13和31、33和42间各有一对二硫键，该结构域功能不清。(2)kringle结构域。由第50-136位氨基酸组成，呈指形环状，有三对二硫键，其位置分别在第50-130、71和113、102和126残基间。推测该区可能参与蛋白与蛋白之间的相互作用，具体功能尚不清楚。(3)丝氨酸蛋白酶结构域位于Pro-uk羧基端，其中His204，Asp255，与Ser356构成该酶活性中心(Flohe L，et al.single-chain urokinase-type plasminogen activatorNew hopes for clot-specific lysis.Eur Heart，1985；11851)，Asn302为糖基化位点，该区内共有5对二硫键。Pro-uk属丝氨酸蛋白酶家族，是一溶栓剂，它通过将没有活性的纤溶酶原裂解，转变成有活性的纤溶酶(plasmin)，从而达到溶解血栓的效果。Pro-uk的溶栓作用是血栓特异性的，其机制主要有两种解释一种解释是血浆中存在着一种Pro-uk的竞争性抑制因子，但纤维蛋白不存在时，Pro-uk与抑制因子结合而不能表现活性，当纤维蛋白与u-PA结合时，抑制因子被除去，Pro-uk活性恢复，进而激活与纤维蛋白结合的纤溶酶原，产生特异性溶栓作用；第二种解释是血浆中存在的plg主要是以氨基末端为Glu的Glu-plg形式存在，Glu-plg与纤维蛋白羧基端的某些氨基酸如Lys结合后，构型发生变化，u-PA能特异性地激活这种构型变化的plg，产生特异性溶栓作用。1973年Bernik(文献4Bernik MB.Increased plasminogen activaor(urokinase)in tissueculture after fiber deposition.J Clin Invest，1973；52823)首先在组织培养液中发现尿激酶原，1979年Husain等(文献5Husain SS，et al.Isolation of plaminogen activators useful as therapeuticand diagnostic agents(single-chain，hih-fibrin affinity urokinase).US Patent No.4381346(filed1979；issued 1983)，文献6Husain SS，et al.Purifieation of a new，high molecular form ofurokinase from urine.Thromb Haemost，1981；4611)(2，3)从尿中纯化出尿激酶原。1981年Wun等(文献7Wun TC，et al.Aproenzyme form of urokinase.J Biol Chem，1982；2577262)证明它是尿激酶的前体，所以称它为尿激酶原(prourokinase)，1985年国际血栓形成和止血委员会(文献8Report of the Subcommittee of Fibrinolysis，San Diego，CA，USA，July 13，1985.Thromb Haemost，1985；54893)将其命名为单链尿激酶型纤溶酶原激活剂(single-chainurokinase-type plasminogen activator(scu-PA))。继Husain之以后，人们又先后从人胎肾细胞(文献9Nolan C，et al.Plasminogen activator from himan embryonic kidney cell cultureEvidence of a proactivator.Biochim Biophys Acta，1977；496384)、恶性胶质瘤细胞(文献10Nielsen LS，et al.Purification of zymogen to plasminogen activator fro本文档来自技高网...
【技术保护点】
尿激酶原在制备治疗肺栓塞的药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.尿激酶原在制备治疗肺栓塞的药物中的应用。2.权利要求1所述的用途，其中尿激酶原为基因重组尿激酶原。3.权利要求1所述的用途，其中所说的药物为注射剂型。4.权利要求3所述的用途，其中所说的注射剂型是是冻干粉针。5.权利要求4所述的用途，其中尿激酶原在药物中的含量为1％-95％。6.权利要求5所述的用途，其中尿激酶原在药物中的含量为1.5％-4％(W/W)。7.权利要求6所述的用途，其中尿激酶原在药物中的含量为2％-3％(W/W)。8.尿激酶原...
【专利技术属性】
技术研发人员：姜燕，
申请(专利权)人：天津天士力制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]
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