重组人尿激酶原氨基末端片段的制备、活性测定方法及其在疾病治疗中的应用技术

本发明专利技术涉及一种抑制尿激酶原（ｐｒｏＵＫ）／尿激酶原受体（ｕＰＡＲ）相互作用的重组蛋白的制备方法和活性鉴定。由于ｕＰＡ／ｕＰＡＲ在许多病理生理过程中发挥了重要的作用，阻断这一通路将会对疾病的发生和发展起到阻滞作用。本发明专利技术中制备的人尿激酶原氨基末端片段（ＡＴＦ）通过体外活性鉴定表明其能够抑制尿激酶原与位于细胞表面的尿激酶原受体的结合。同时也能抑制尿激酶（ＵＫ）对纤溶酶原（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ）以及纤溶酶（ｐｌａｓｍｉｎ）对ｐｒｏＵＫ的激活。这预示着ｒｈＡＴＦ可能在抑制ｕＰＡ／ｕＰＡＲ参与的病理生理过程中发挥重要作用。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用基因工程方法生产一种能够抑制proUK/UK与uPAR相互作用的蛋白片段以及在疾病治疗中的应用。
技术介绍
细胞迁移是细胞黏附和去黏附的周期性过程。在生物体的生长发育、组织形成、分化、炎症反应、创伤修复、动脉粥样硬化、肿瘤血管的生成、肿瘤细胞的侵袭等多种生理、病理过程中均会有细胞迁移。近年来的一些研究表明uPA/uPAR在细胞迁移过程中发挥了很重要的作用。uPAR介导的细胞表面蛋白裂解和非蛋白裂解是细胞迁移和趋化的中枢。uPA与uPAR的结合诱导uPAR与玻蛋白结合，调节uPAR与整合素之间的相互作用或促进胞内信号传导级联，促进前导区黏附，从而刺激细胞迁移；同时在细胞尾部，uPA促进纤溶酶原转化生成纤溶酶，促进迁移细胞尾部细胞外基质和细胞黏附分子的降解，导致细胞尾部的回缩。在大部分发生黏附和迁移的上皮细胞和肿瘤细胞中，uPA可以通过与β1β3整合素连同富含小窝蛋白或激酶的细胞膜区域各种蛋白分子相互作用，来调控整合素的黏附特性及其信号传导能力。uPAR在迁移细胞的引导表面呈局限性分布，从而通过结合uPA促进纤溶酶原向纤溶酶的转化。纤溶酶是一种能够直接降解纤粘连蛋白，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组人尿激酶原氨基末端片段的制备方法，其特征为表达质粒的构建，阳性克隆的筛选，重组人尿激酶原氨基末端片段的诱导表达及纯化。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：刘建宁，陈新园，孙自勇，朱镇华，
申请(专利权)人：南京大学生物制药工程研究中心，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]