保护性寡聚脱氧核糖核苷酸的制药用途制造技术

本发明专利技术涉及保护性寡聚脱氧核糖核苷酸用于治疗患者的用途，所述患者正在接受免疫抑制剂的治疗。本发明专利技术进一步涉及一种药物组合物，它含有有效治疗剂量的免疫抑制剂和有效治疗剂量的保护的寡聚脱氧核糖核苷酸。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及使用放射治疗和/或化疗的领域。更具体地，本专利技术涉及减轻与这种治疗相关的副作用的方法。现有技术的说明同种异基因干细胞移植(SCT)是一种公知方法，用于治疗血液瘤和不断增加的各种其它恶性疾病。SCT主要由两个顺序的步骤组成预移植处理，它经典地由全身辐射(TBI))和化疗组成，从而使得残留疾病和受体免疫抑制最小化，以作为第一步，和同种异基因干细胞的转移以作为第二步，这种同种异基因干细胞的转移应当最后提供对病人的治愈。然而，由于在主要组织相容性抗原(MHC)和次要组织相容性抗原(mHAg)内的差异，在移植后的不同阶段中可能发生严重的炎症反应，其中包括急性移植物对抗宿主的疾病(GvHD)。基于本专利技术者1和数个其它研究者2，3的研究，广泛被接受的是，预移植处理藉助于非特异性发炎助长了这些与移植有关的并发症(TRC)。另外，特别是TBI的直接毒性已得到证明4，5。这已导致目前正在研究的各种可供替代的预移植处理方案。另外，新的预移植治疗允许扩展治疗方案和患者的选择。这些新型预移植处理概念的一种化合物是氟达拉滨(fludarabine)，一种非骨髓消融(non-myleoablative)免疫抑制剂，它最初用于治疗慢性淋巴白血病6。氟达拉滨与例如BCNU和美法仑、环磷酰胺或其它试剂的结合可替代TBI或与剂量降低的TBI方案一起使用7，8。迄今为止获得的临床数据支持氟达拉滨的低副作用以及造血和免疫细胞特异性9。然而，该化合物对非造血细胞如内皮和上皮细胞的影响还尚未进行研究。事实上所有TRC与内皮功能障碍和损坏有关10。本专利技术者和其它人已证明，内皮是在体内和体外进行预移植处理的目标。电离辐射诱发内皮细胞内的程序性细胞死亡(apoptosis)11-14。与此同时，内皮以粘附分子表达的方式被激活，从而导致了作为炎症反应的先决条件的增加的白细胞-内皮细胞相互作用15，16。通过细菌的内毒素(脂质多糖，LPS)显著加强了这些效果，所述细菌的内毒素可通过破损的粘膜阻挡层从胃肠道易位17。另外，已表明LPS增加了内皮细胞对同种异基因CD8+细胞毒性T淋巴细胞的抗原性18。迄今为止获得的含有氟达拉滨的降低强度的处理(RIC)方案的临床结果表明，对预移植处理相关的毒性具有明显向下调节作用，而没有影响免疫重建25。接受RTC的患者中，急性GvHD的发病率与接受经典处理方案的那些患者相当或甚至要小26。然而，关于同样严重或甚至加剧的后期效果如骨坏死27、肺部并发症28和更多慢性GvHD29病例的报道，清楚地证明与氟达拉滨治疗相关的严重副作用。专利技术概述本专利技术基于下述发现氟达拉滨激活并破坏内皮和上皮细胞。这些细胞的激活导致其中使用氟达拉滨的治疗环境的破坏，例如当使用SCT治疗恶性肿瘤时。可以通过采用去纤苷酸(defibrotide)治疗，来保护内皮和上皮细胞免除这种激活和破坏。这种治疗可以是伴随的，或者在用氟达拉滨治疗之前或之后给予去纤苷酸。缩写和定义SCT造血干细胞移植免疫抑制剂一旦给药，将向下调节受试验者免疫应答的物质。免疫抑制剂用于对接受干细胞治疗的患者的免疫系统进行抑制。免疫抑制剂的例子包括氟达拉滨、环磷酰胺、BCNU、环胞霉素(cyclosporin)、雷帕霉素(sirolimus)、他克莫司(tacrolimus)和美法仑。在本申请的上下文内优选氟达拉滨(也称为2-氟-9-β-D-阿拉伯呋喃糖基腺嘌呤)。保护性寡聚脱氧核糖核苷酸(protective oligodeoxyribonucleotide)在本申请的上下文中，应当指在美国专利5,646,268中所定义的寡聚脱氧核糖核苷酸和美国专利5,223,609中所定义的多脱氧核糖核苷酸这二者，在此通过参考将其全文引入。美国专利5,646,268公开了一种生产具有下述物理化学和化学特征的寡聚脱氧核糖核苷酸的方法分子量 4000-10000h ＜10A+T/C+G*1.100-1.455A+G/C+T*0.800-1.160比旋度 +30°-+48°*基本摩尔比h＝增色参数生产这种寡聚脱氧核糖核苷酸的方法包括通过添加选自由乙醇、丙醇和异丙醇组成的一组物质中的一种烷基醇，在20℃下，沉淀0.8M多脱氧核糖核苷酸钠盐的醋酸钠水溶液。美国专利5,223,609公开了一种去纤苷酸，若形成它的核苷酸部分与以下的无规序列的多脱氧核糖核苷酸分子式在化学计量上一致的话，则它满足某些药物和治疗性能，因此是特别合适的P1-5，(dAP)12-24，(dGp)10-20，(dTp)13-26，(dCp)10-20其中P＝磷基dAP＝脱氧腺苷酸单体(deoxyadenylic monomer)dGp＝脱氧鸟苷酸单体(deoxyguanylic monomer)dTp＝脱氧胸苷酸单体(deoxythymidylic monomer)dCp＝脱氧胞苷酸单体(deoxycytidylic monomer)相应于该分子式的去纤苷酸此外显示出下述物理化学性能电泳＝均匀阳极的迁移率；消光系数，在260±1nm处的E1cm1％＝220±10；消光比，E230/E260＝0.45±0.04；摩尔消光系数(指磷)，ε(P)＝7.750±500；旋光度[α]D20°＝53°±6；在天然DNA内以％表示的可逆增色性，h＝15±5。优选的保护性寡聚脱氧核糖核苷酸是去纤苷酸(CAS登记号83712-60-1)，熟练本领域的技术人员公知的一种多核苷酸，它通常被认为是通过从动物和/或植物组织中萃取获得的多脱氧核糖核苷酸(US3,770,720和US3,899,481)；这种多脱氧核糖核苷酸通常以碱金属盐，通常钠盐的形式使用，和通常具有约45-50kDa的分子量。去纤苷酸主要是因它的抗凝活性而被使用，例如用于治疗急性肾功能不足(US4,694,134)和治疗急性心肌缺血(US4,693,995)。美国专利US4,985,552和US5,223,609公开了一种生产去纤苷酸的方法，它能使获得的产品具有恒定和非常确定的物理化学特征，且还不具有任何非所需的副作用。专利技术详述本专利技术涉及治疗患者的方法，所述患者正在接受免疫抑制剂的治疗，该方法包括给患者施用有效剂量的保护性寡聚脱氧核糖核苷酸的步骤。采用免疫抑制剂的治疗优选在SCT期间发生。免疫抑制剂优选选自包括抗代谢物(例如5-氟尿嘧啶(5-FU))、甲氨蝶呤(MTX)、氟达拉滨、抗微管剂(例如长春新碱、长春碱、紫杉烷类(taxanes)(如紫杉醇和多烯紫杉醇))、烷化剂(例如环磷酰胺、抗瘤氨酸美法仑、双氯乙亚硝脲(BCNU))、铂试剂(例如顺铂(也称为cDDP)、卡铂、奥沙利铂，JM-216，CI-973)、蒽环霉素(例如阿霉素、柔毛霉素)、包括丝裂霉素-C在内的抗生素，拓扑异构酶抑制剂(例如依托泊苷、喜树碱)、环胞菌素、他克莫司、雷帕霉素(sirolimus)，和起到抑制免疫系统作用的其它细胞毒试剂。可在Gonzale等著的，Alergol.Immunol.Clin.15，161-181，2000中，找到在恶性肿瘤的治疗中常用的这种试剂的综述，在此通过参考将其引入。优选的免疫抑制剂是核苷(即来自从核苷酸中除去磷酸基团的糖苷)，顺便说一下，例如氟达拉滨，对于本专利技术目的来说，它本文档来自技高网...

【技术保护点】
保护性寡聚脱氧核糖核苷酸在制造药物中的用途，所述药物用于治疗正在接受免疫抑制剂治疗的患者。

【技术特征摘要】
US 2002-5-31 60/384,114;US 2002-6-11 60/387,4381.保护性寡聚脱氧核糖核苷酸在制造药物中的用途，所述药物用于治疗正在接受免疫抑制剂治疗的患者。2.保护性寡聚脱氧核糖核苷酸在制造药物中的用途，所述药物用于保护上皮细胞和/或内皮细胞避免免疫抑制剂的影响。3.保护性寡聚脱氧核糖核苷酸在制造药物中的用途，所述药物用于保护上皮细胞和/或内皮细胞避免因施用免疫抑制剂诱导的细胞凋亡和/或激活。4.如权利要求1-3中任何一项所述的用途，其特征在于，所述免疫抑制剂是一种核苷。5.如权利要求1-3中任何一项所述的用途，其特征在于，所述免疫抑制剂选自包括氟达拉滨、环磷酰胺、BCNU、美法仑的物质组。6.如权利要求1-3中任何一项所述的用途，其特征在于，所述免疫抑制剂是氟达拉滨。7.如权利要求1-3中任何一项所述的用途，其特征在于，所述保护性寡聚脱氧核糖核苷酸是去纤苷酸。8.如权利要求1-7中任何一项所述的用途，其特征在于，在给患者施用免疫抑制剂的伴随过程中、同时、之后或之前，发生施用保护性寡聚脱氧核糖核苷酸的步骤。9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，在给患者施用免疫抑制剂之后，发生施用保护性寡聚脱氧核糖核苷酸的步骤。10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，在施用保护性寡聚脱氧核糖核苷酸的步骤和给患者施用免疫抑制剂的步骤之间的时间延迟为约1小时至约2周，优选约2天至约7天。11.如权利要求8所述的用途，其特征在于，在给患者施用免疫抑制剂之前，发生施用保护性寡聚脱氧核糖核苷酸的步骤。12.如权利要求11所述的用途，其特征在于，在施用保护性寡聚脱氧核糖核苷酸的步骤和给患者施用免疫抑制剂的步骤之间的时间差为约1小时至约2周，优选约2小时至约2天。13.如权利要求1-12中任何一项所述的用途，其特征在于，选择所施用的去纤苷酸的剂量，以便...

【专利技术属性】
技术研发人员：甘特艾斯内，恩斯特霍勒，
申请(专利权)人：雷根斯堡大学医学院，
类型：发明
国别省市：DE[德国]